| 摘要 | 第8-9页 |
| 英文摘要 | 第9-10页 |
| 1 前言 | 第11-18页 |
| 1.1 试验研究的目的与意义 | 第11页 |
| 1.2 转录因子概述 | 第11-16页 |
| 1.2.1 转录因子的概念 | 第11-12页 |
| 1.2.2 转录因子的结构特征 | 第12页 |
| 1.2.3 植物对非生物胁迫的应答机制 | 第12-13页 |
| 1.2.4 WRKY转录因子 | 第13-16页 |
| 1.3 病毒诱导的基因沉默技术 | 第16页 |
| 1.4 研究内容 | 第16-17页 |
| 1.5 技术路线 | 第17-18页 |
| 2 材料和方法 | 第18-28页 |
| 2.1 番茄WRKY基因家族生物信息学的分析 | 第18页 |
| 2.1.1 实验方法 | 第18页 |
| 2.2 番茄WRKY基因组织特异性分析 | 第18-21页 |
| 2.2.1 实验材料 | 第18-19页 |
| 2.2.2 实验方法 | 第19-21页 |
| 2.3 番茄WRKY基因在非生物胁迫条件下的表达模式分析 | 第21-22页 |
| 2.3.1 材料逆境胁迫处理 | 第21页 |
| 2.3.2 表达模式分析 | 第21-22页 |
| 2.4 番茄WRKY基因沉默分析 | 第22-25页 |
| 2.4.1 Sl WRKY50-TRV2和PDS-TRV2载体构建 | 第22-25页 |
| 2.5 番茄植株侵染 | 第25-26页 |
| 2.5.1 植物材料准备 | 第25页 |
| 2.5.2 侵染过程 | 第25-26页 |
| 2.6 基因沉默植株沉默效果检测 | 第26页 |
| 2.6.1 沉默植株表型观察 | 第26页 |
| 2.6.2 基因表达量分析 | 第26页 |
| 2.7 基因沉默植株逆境胁迫处理及样品采集 | 第26页 |
| 2.8 相关生理指标测定 | 第26-28页 |
| 2.8.1 丙二醛（MDA）活性测定 | 第26页 |
| 2.8.2 脯氨酸（Proline）活性测定 | 第26-27页 |
| 2.8.3 超氧化歧化酶（SOD）活性测定 | 第27-28页 |
| 3 结果与分析 | 第28-50页 |
| 3.1 番茄WRKY基因家族生物信息学的分析 | 第28-39页 |
| 3.1.1 番茄WRKY基因家族成员的鉴定及理化性质的分析 | 第28-31页 |
| 3.1.2 番茄WRKY基因家族的进化分析 | 第31-33页 |
| 3.1.3 番茄WRKY基因家族的保守元件，基因结构及染色体定位分析 | 第33-35页 |
| 3.1.4 番茄WRKY蛋白保守结构域的鉴定和分析 | 第35-38页 |
| 3.1.5 蛋白质三级结构分析 | 第38-39页 |
| 3.2 番茄WRKY基因组织特异性分析 | 第39-40页 |
| 3.2.1 RNA的提取 | 第39页 |
| 3.2.2 组织特异性表达分析 | 第39-40页 |
| 3.3 番茄WRKY基因在非生物胁迫条件下的表达模式分析 | 第40-43页 |
| 3.3.1 番茄高盐胁迫处理分析 | 第40-41页 |
| 3.3.2 番茄干旱胁迫处理分析 | 第41-42页 |
| 3.3.3 番茄低温胁迫处理分析 | 第42-43页 |
| 3.4 番茄S1WRKY50基因TRV2载体的构建 | 第43-50页 |
| 3.4.1 RNA的提取 | 第43-44页 |
| 3.4.2 目标片段Sl WRKY50和PDS的扩增 | 第44页 |
| 3.4.3 质粒的提取 | 第44页 |
| 3.4.4 重组菌液PCR验证 | 第44-45页 |
| 3.4.5 重组质粒的酶切鉴定 | 第45-46页 |
| 3.4.6 重组质粒的测序结果 | 第46-47页 |
| 3.4.7 农杆菌侵染 | 第47-48页 |
| 3.4.8 SlWRKY50基因沉默植株逆境下生理指标的测定 | 第48-50页 |
| 4 讨论 | 第50-52页 |
| 4.1 番茄WRKY基因家族的生物信息学分析 | 第50页 |
| 4.2 番茄组织特异性及非生物胁迫表达模式分析 | 第50-51页 |
| 4.2.1 番茄组织特异性分析 | 第50页 |
| 4.2.2 番茄非生物胁迫表达模式分析 | 第50-51页 |
| 4.3 S1WRKY50基因的功能 | 第51-52页 |
| 5 结论 | 第52-53页 |
| 致谢 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-60页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第60页 |
