| 摘要 | 第10-11页 |
| 英文摘要 | 第11页 |
| 1 前言 | 第12-23页 |
| 1.1 空肠弯曲杆菌的病原学 | 第12-13页 |
| 1.1.1 生长特性 | 第12页 |
| 1.1.2 理化性质 | 第12-13页 |
| 1.2 空肠弯曲杆菌的流行病学 | 第13-14页 |
| 1.2.1 空肠弯曲杆菌流行情况 | 第13页 |
| 1.2.2 传染源、传播途径、易感动物 | 第13-14页 |
| 1.3 临床特征与病理变化 | 第14-15页 |
| 1.3.1 临床特征 | 第14-15页 |
| 1.3.2 病理变化 | 第15页 |
| 1.4 致病机理 | 第15-17页 |
| 1.4.1 鞭毛 | 第15-16页 |
| 1.4.2 内毒素 | 第16页 |
| 1.4.3 肠毒素致病机理 | 第16-17页 |
| 1.5 外膜蛋白 | 第17-18页 |
| 1.5.1 CadF | 第17-18页 |
| 1.5.2 MOMP | 第18页 |
| 1.5.3 PEB1 | 第18页 |
| 1.5.4 Omp50 | 第18页 |
| 1.6 诊断方法 | 第18-21页 |
| 1.6.1 常规生化试验 | 第18-19页 |
| 1.6.2 分子生物学技术 | 第19-20页 |
| 1.6.3 免疫学方法 | 第20-21页 |
| 1.7 预防和治疗 | 第21页 |
| 1.8 研究的目的和意义 | 第21-23页 |
| 2 材料与方法 | 第23-36页 |
| 2.1 材料 | 第23-26页 |
| 2.1.1 菌株、质粒、阳性血清 | 第23页 |
| 2.1.2 培养基、抗生素及主要试剂 | 第23页 |
| 2.1.3 仪器设备 | 第23-24页 |
| 2.1.4 细菌培养基及抗生素的配制 | 第24页 |
| 2.1.5 SDS-PAGE和Western blot相关缓冲液的配制 | 第24-25页 |
| 2.1.6 蛋白纯化所需缓冲液的配制 | 第25页 |
| 2.1.7 ELISA所需试剂的配制 | 第25-26页 |
| 2.2 方法 | 第26-36页 |
| 2.2.1 引物设计及合成 | 第26页 |
| 2.2.2 C.jejuni Q11株cad F基因的克隆 | 第26-29页 |
| 2.2.3 CadF蛋白的原核表达及抗原性分析 | 第29-31页 |
| 2.2.4 重组蛋白的纯化 | 第31页 |
| 2.2.5 重组蛋白的复性 | 第31-32页 |
| 2.2.6 重组蛋白浓度的测定 | 第32-33页 |
| 2.2.7 空肠弯曲杆菌间接ELISA方法的建立 | 第33-35页 |
| 2.2.8 特异性试验 | 第35页 |
| 2.2.9 敏感性试验 | 第35页 |
| 2.2.10 重复性试验 | 第35页 |
| 2.2.11 临床样品的检测 | 第35-36页 |
| 3 结果 | 第36-48页 |
| 3.1 Q11株cad F基因的克隆与鉴定 | 第36-37页 |
| 3.1.1 cad F基因的PCR扩增结果 | 第36页 |
| 3.1.2 重组质粒p MD18-T-cad F的鉴定 | 第36-37页 |
| 3.2 Cad F蛋白的原核表达及抗原性分析 | 第37-41页 |
| 3.2.1 目的基因PCR扩增结果 | 第37-38页 |
| 3.2.2 重组质粒p ET32a-cad F的鉴定 | 第38-39页 |
| 3.2.3 重组蛋白诱导条件的优化 | 第39页 |
| 3.2.4 重组蛋白的SDS-PAGE结果 | 第39-40页 |
| 3.2.5 Western blot结果 | 第40-41页 |
| 3.3 重组蛋白纯化结果 | 第41页 |
| 3.4 重组蛋白的复性及蛋白浓度测定结果 | 第41-42页 |
| 3.4.1 重组蛋白复性 | 第41页 |
| 3.4.2 蛋白浓度的测定 | 第41-42页 |
| 3.5 空肠弯曲杆菌间接ELISA方法的建立 | 第42-45页 |
| 3.5.1 最佳抗原包被浓度和最佳血清稀释度的确定 | 第42页 |
| 3.5.2 抗原最佳包被液的选择 | 第42页 |
| 3.5.3 抗原最适包被时间的选择 | 第42-43页 |
| 3.5.4 最佳封闭液的确定 | 第43页 |
| 3.5.5 封闭时间的优化 | 第43-44页 |
| 3.5.6 阴阳血清作用时间的优化 | 第44页 |
| 3.5.7 酶标二抗最佳工作浓度的确定 | 第44页 |
| 3.5.8 酶标二抗作用时间的优化 | 第44-45页 |
| 3.5.9 底物作用时间的优化 | 第45页 |
| 3.5.10间接ELISA阴阳临界OD值的确定 | 第45页 |
| 3.6 特异性试验 | 第45-46页 |
| 3.7 敏感性试验 | 第46-47页 |
| 3.8 重复性试验 | 第47页 |
| 3.8.1 批内重复试验 | 第47页 |
| 3.8.2 批间重复试验 | 第47页 |
| 3.9 临床样品的检测 | 第47-48页 |
| 4 讨论 | 第48-52页 |
| 4.1 cad F基因的原核表达及抗原性分析 | 第48-49页 |
| 4.1.1 目的蛋白的选择 | 第48页 |
| 4.1.2 表达载体的选择 | 第48-49页 |
| 4.1.3 重组蛋白诱导条件的优化 | 第49页 |
| 4.1.4 重组蛋白的纯化 | 第49页 |
| 4.2 空肠弯曲杆菌间接ELISA方法的建立 | 第49-52页 |
| 5 结论 | 第52-53页 |
| 致谢 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-62页 |
| 附录 | 第62-63页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第63页 |
