| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-21页 |
| 1.1 拟南芥概述 | 第11页 |
| 1.2 植物耐盐性概述 | 第11-15页 |
| 1.2.1 盐胁迫对植物的伤害 | 第12-14页 |
| 1.2.3 植物对盐胁迫的适应机制 | 第14-15页 |
| 1.3 bHLH转录因子概述 | 第15-19页 |
| 1.3.1 bHLH转录因子的结构特点 | 第16-17页 |
| 1.3.2 bHLH转录因子的分类 | 第17页 |
| 1.3.3 植物bHLH转录因子的生物学功能 | 第17-18页 |
| 1.3.4 bHLH转录因子调节植物的抗逆性 | 第18-19页 |
| 1.4 CFLAP1基因研究现状 | 第19页 |
| 1.5 CFLAP1编码蛋白参与ABA信号通路 | 第19页 |
| 1.6 本研究的目的与意义 | 第19-21页 |
| 第二章 CFLAP1过表达载体构建与转化 | 第21-35页 |
| 2.1 Gateway技术和蘸花法概述 | 第21-23页 |
| 2.1.1 Gateway克隆技术 | 第21-22页 |
| 2.1.2 农杆菌介导蘸花法 | 第22-23页 |
| 2.2 植物材料及培养方法 | 第23页 |
| 2.3 CFLAP1过表达载体的构建 | 第23-28页 |
| 2.3.1 入门克隆 | 第24页 |
| 2.3.2 入门载体构建 | 第24页 |
| 2.3.3 大肠杆菌感受态的制备 | 第24-25页 |
| 2.3.4 转化大肠杆菌DH5α感受态细胞 | 第25-26页 |
| 2.3.5 CFLAP1表达载体构建 | 第26-27页 |
| 2.3.6 过表达载体转化农杆菌 | 第27-28页 |
| 2.4 蘸花法转化野生型拟南芥 | 第28页 |
| 2.4.1 农杆菌菌液制备 | 第28页 |
| 2.4.2 转化野生型拟南芥 | 第28页 |
| 2.5 结果 | 第28-30页 |
| 2.5.1 创建入门载体 | 第28-29页 |
| 2.5.2 表达载体构建 | 第29-30页 |
| 2.5.3 转化野生型拟南芥 | 第30页 |
| 2.6 CFLAP1序列分析 | 第30-32页 |
| 2.6.1 一级结构分析 | 第30-31页 |
| 2.6.2 二级结构分析 | 第31-32页 |
| 2.6.3 蛋白三维结构预测 | 第32页 |
| 2.7 氨基酸序列进化树 | 第32-33页 |
| 2.8 本章小结 | 第33-35页 |
| 第三章 过表达CFLAP1基因拟南芥的筛选与鉴定 | 第35-47页 |
| 3.1 植物材料及培养 | 第35-36页 |
| 3.2 过表达CFLAP1转基因拟南芥筛选 | 第36页 |
| 3.2.1 T1代转基因株系筛选 | 第36页 |
| 3.2.2 T2代转基因株系筛选 | 第36页 |
| 3.2.3 T3代转基因株系筛选 | 第36页 |
| 3.3 分子水平鉴定转基因植株 | 第36-38页 |
| 3.3.1 融合DNA的验证 | 第36-38页 |
| 3.4 Western Blot鉴定转基因株系中CFLAP1蛋白表达 | 第38-41页 |
| 3.4.1 蛋白质提取 | 第38页 |
| 3.4.2 蛋白质定量 | 第38-39页 |
| 3.4.3 SDS-PAGE | 第39-40页 |
| 3.4.4 免疫印迹 | 第40-41页 |
| 3.5 荧光显微镜观察融合蛋白表达位置 | 第41-42页 |
| 3.5.1 临时切片的制作 | 第41页 |
| 3.5.2 荧光显微镜观察 | 第41-42页 |
| 3.6 结果 | 第42-46页 |
| 3.6.1 过表达CFLAP1转基因植株筛选 | 第42-44页 |
| 3.6.2 Western Blot验证CFLAP1蛋白表达 | 第44-45页 |
| 3.6.3 荧光显微镜观察CFLAP1定位于根部细胞膜 | 第45-46页 |
| 3.7 本章小结 | 第46-47页 |
| 第四章 过表达CFLAP1转基因拟南芥株系作用分析 | 第47-55页 |
| 4.1 植物材料及培养 | 第47页 |
| 4.2 转基因植株表型观察 | 第47页 |
| 4.3 过表达CFLAP1转基因拟南芥耐盐性验证 | 第47-50页 |
| 4.3.1 盐处理下发芽率测定 | 第47页 |
| 4.3.2 盐处理下根长测定 | 第47-48页 |
| 4.3.3 盐处理下生长指标测定 | 第48页 |
| 4.3.4 盐处理下生理指标测定 | 第48-50页 |
| 4.4 结果 | 第50-55页 |
| 4.4.1 过表达CFLAP1转基因拟南芥纯系表型鉴定 | 第50页 |
| 4.4.2 盐处理下过表达CFLAP1转基因拟南芥与野生型发芽率一致 | 第50-51页 |
| 4.4.3 盐处理下过表达CFLAP1转基因拟南芥促进拟南芥根的延伸 | 第51-53页 |
| 4.4.4 植物生长生理指标的测定 | 第53-55页 |
| 第五章 结论与讨论 | 第55-58页 |
| 5.1 结论 | 第55-56页 |
| 5.2 讨论 | 第56-58页 |
| 参考文献 | 第58-64页 |
| 附录 | 第64-70页 |
| 致谢 | 第70-71页 |
| 个人简历 | 第71页 |
