摘要 | 第6-8页 |
Abstract | 第8-10页 |
主要符号对照表 | 第11-12页 |
第一章 前言 | 第12-24页 |
1.1 肿瘤及肿瘤治疗方法的概述 | 第12-13页 |
1.2 肿瘤转移的研究 | 第13-15页 |
1.2.1 概述 | 第13页 |
1.2.2 肿瘤转移的影响因素 | 第13-15页 |
1.2.2.1 缺氧与转移 | 第13页 |
1.2.2.2 恶性肿瘤细胞与转移 | 第13-14页 |
1.2.2.3 脉管系统与转移 | 第14页 |
1.2.2.4 免疫调节与转移 | 第14-15页 |
1.2.2.5 细胞外基质与转移 | 第15页 |
1.2.2.6 细胞因子与转移 | 第15页 |
1.3 细胞凋亡的研究 | 第15-18页 |
1.3.1 概述 | 第16页 |
1.3.2 细胞凋亡的形态学特征 | 第16页 |
1.3.3 细胞凋亡的调控 | 第16-17页 |
1.3.4 细胞凋亡的检测 | 第17-18页 |
1.4 厚朴酚 | 第18-22页 |
1.4.1 厚朴的药用价值 | 第18-19页 |
1.4.2 厚朴酚的药理作用 | 第19-20页 |
1.4.2.1 理化性质 | 第19页 |
1.4.2.2 药理作用研究进展 | 第19-20页 |
1.4.3 厚朴酚的抗癌机理研究进展 | 第20-22页 |
1.4.3.1 细胞周期阻滞 | 第20页 |
1.4.3.2 诱导细胞程序性死亡 | 第20-21页 |
1.4.3.3 抑制肿瘤转移 | 第21-22页 |
1.4.3.4 抑制肿瘤血管生成 | 第22页 |
1.5 本文研究的目的和意义 | 第22-24页 |
第二章 实验材料与方法 | 第24-33页 |
2.1 实验材料 | 第24页 |
2.2 实验试剂和仪器 | 第24-25页 |
2.2.1 实验试剂 | 第24页 |
2.2.2 实验仪器与耗材 | 第24页 |
2.2.3 实验涉及软件与引物序列 | 第24-25页 |
2.3 实验方法 | 第25-33页 |
2.3.1 细胞培养 | 第25页 |
2.3.2 MTT法检测细胞活性 | 第25-26页 |
2.3.3 AO/PI染色 | 第26页 |
2.3.4 DAPI染色 | 第26页 |
2.3.5 PE-Annexin-v/7-AAD检测细胞凋亡 | 第26-27页 |
2.3.6 细胞粘附实验 | 第27页 |
2.3.7 细胞迁移和侵袭实验 | 第27-28页 |
2.3.7.1 细胞迁移实验 | 第27页 |
2.3.7.2 细胞侵袭实验 | 第27-28页 |
2.3.8 总RNA提取 | 第28页 |
2.3.9 反转录cDNA | 第28-29页 |
2.3.10 实时荧光定量(RT-PCR) | 第29页 |
2.3.11 Western Blot分析蛋白表达水平 | 第29-32页 |
2.3.11.1 总蛋白质提取 | 第29-30页 |
2.3.11.2 BCA标准曲线及蛋白质定量 | 第30页 |
2.3.11.3 SDS-PAGE | 第30-32页 |
2.3.11.4 蛋白表达量分析 | 第32页 |
2.3.12 统计学方法 | 第32-33页 |
第三章 实验结果与分析 | 第33-44页 |
3.1 厚朴酚对肺癌细胞转移的影响探究 | 第33-40页 |
3.1.1 MTT法检测细胞活性 | 第33页 |
3.1.2 厚朴酚抑制 95D和H460细胞的粘附 | 第33-34页 |
3.1.3 厚朴酚抑制 95D和H460细胞的迁移和侵袭 | 第34-36页 |
3.1.4 厚朴酚从转录和翻译水平抑制MMP-2 表达 | 第36-38页 |
3.1.5 厚朴酚抑制转移的细胞信号通路检测 | 第38-40页 |
3.2 厚朴酚对肺癌细胞A549凋亡影响的初步探究 | 第40-44页 |
3.2.1 MTT法检测肺癌细胞A549活性 | 第40页 |
3.2.2 荧光染色观察厚朴酚对细胞形态的影响 | 第40-42页 |
3.2.2.1 AO/PI染色 | 第40-41页 |
3.2.2.2 DAPI染色 | 第41-42页 |
3.2.3 PE-Annexin V和 7-ADD流式分析A549的细胞凋亡情况 | 第42页 |
3.2.4 实时荧光定量检测细胞凋亡因子的表达情况 | 第42-44页 |
第四章 讨论 | 第44-47页 |
4.1 厚朴酚抑制肺癌转移实验的讨论 | 第44-45页 |
4.2 厚朴酚诱导肺癌细胞凋亡的初探实验讨论 | 第45-47页 |
第五章 展望 | 第47-49页 |
参考文献 | 第49-58页 |
致谢 | 第58-61页 |
在学期间的科研情况 | 第61页 |