| 附件 | 第4-5页 |
| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6页 |
| 英文缩略表 | 第12-13页 |
| 第一章 引言 | 第13-19页 |
| 1.1 猪带绦虫概述 | 第13-14页 |
| 1.1.1 猪带绦虫及猪带绦虫病 | 第13页 |
| 1.1.2 猪带绦虫病免疫诊断及治疗研究进展 | 第13-14页 |
| 1.2 组织蛋白酶B概述 | 第14-18页 |
| 1.2.1 蛋白酶及其分类 | 第14-15页 |
| 1.2.2 组织蛋白酶B合成途径及其活性 | 第15页 |
| 1.2.3 组织蛋白酶B生物学功能 | 第15-18页 |
| 1.2.4 抑制剂 | 第18页 |
| 1.3 研究目的与意义 | 第18-19页 |
| 第二章 猪带绦虫组织蛋白酶B基因的克隆与序列分析 | 第19-28页 |
| 2.1 材料与方法 | 第19-21页 |
| 2.1.1 虫体、菌株及试剂 | 第19页 |
| 2.1.2 主要仪器 | 第19页 |
| 2.1.3 试验方法 | 第19-21页 |
| 2.2 结果 | 第21-26页 |
| 2.2.1 总RNA的提取 | 第21页 |
| 2.2.2 组织蛋白酶B基因的克隆 | 第21-22页 |
| 2.2.3 组织蛋白酶B基因的序列分析 | 第22-26页 |
| 2.2.4 组织蛋白酶B基因的荧光定量PCR | 第26页 |
| 2.3 讨论 | 第26-28页 |
| 第三章 猪带绦虫组织蛋白酶B基因的原核表达及组织定位 | 第28-38页 |
| 3.1 材料与试剂 | 第28页 |
| 3.1.1 实验动物、菌株及载体 | 第28页 |
| 3.1.2 血清及主要试剂 | 第28页 |
| 3.1.3 主要仪器 | 第28页 |
| 3.2 实验方法 | 第28-31页 |
| 3.2.1 重组质粒的构建及鉴定 | 第28-29页 |
| 3.2.2 猪带绦虫组织蛋白酶B的原核表达及表达形式鉴定 | 第29页 |
| 3.2.3 猪带绦虫组织蛋白酶B重组蛋白的纯化 | 第29页 |
| 3.2.4 rTscpB的Western-blotting分析 | 第29页 |
| 3.2.5 免疫组化 | 第29-31页 |
| 3.3 结果 | 第31-36页 |
| 3.3.1 组织蛋白酶B基因片段的扩增 | 第31-32页 |
| 3.3.2 重组表达质粒的鉴定 | 第32页 |
| 3.3.3 组织蛋白酶B的原核表达 | 第32页 |
| 3.3.4 组织蛋白酶B表达蛋白的纯化 | 第32-33页 |
| 3.3.5 rTscpB的Western-blot | 第33页 |
| 3.3.6 ELISA检测结果 | 第33-35页 |
| 3.3.7 抗体的纯化及特异性检测 | 第35页 |
| 3.3.8 rTscpB在猪带绦虫成熟节片中的定位观察 | 第35-36页 |
| 3.4 讨论 | 第36-38页 |
| 第四章 猪带绦虫组织蛋白酶B基因的真核表达及活性测定 | 第38-45页 |
| 4.1 材料与试剂 | 第38页 |
| 4.1.1 菌株和载体 | 第38页 |
| 4.1.2 主要试剂 | 第38页 |
| 4.1.3 主要仪器 | 第38页 |
| 4.2 实验方法 | 第38-41页 |
| 4.2.1 重组质粒的构建 | 第38-39页 |
| 4.2.2 重组质粒的线性化、酵母感受态细胞的制备 | 第39页 |
| 4.2.3 电转化及菌落筛选 | 第39页 |
| 4.2.4 重组酵母菌株的诱导表达及SDS-PAGE分析 | 第39-40页 |
| 4.2.6 重组蛋白的纯化 | 第40页 |
| 4.2.7 明胶酶谱法检测重组蛋白的活性 | 第40页 |
| 4.2.8 酶活力实验及抑制动力学实验 | 第40-41页 |
| 4.3 实验结果 | 第41-43页 |
| 4.3.1 重组质粒的线性化 | 第41页 |
| 4.3.2 重组蛋白的表达 | 第41页 |
| 4.3.3 酶动力学及抑制动力学实验 | 第41-42页 |
| 4.3.4 底物降解实验 | 第42-43页 |
| 4.4 讨论 | 第43-45页 |
| 第五章 猪带绦虫组织蛋白酶B蛋白与E-64相互作用模式预测 | 第45-51页 |
| 5.1 软件及序列 | 第45页 |
| 5.1.1 服务器及软件 | 第45页 |
| 5.1.2 序列 | 第45页 |
| 5.2 实验方法 | 第45-46页 |
| 5.2.1 同源模建 | 第45-46页 |
| 5.2.2 分子对接 | 第46页 |
| 5.3 实验结果 | 第46-49页 |
| 5.3.1 同源模建 | 第46-48页 |
| 5.3.2 分子对接 | 第48-49页 |
| 5.4 讨论 | 第49-51页 |
| 第六章 全文结论 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-58页 |
| 致谢 | 第58-59页 |
| 作者简历 | 第59页 |
