| 摘要 | 第4-7页 |
| ABSTRACT | 第7-10页 |
| 第一章 引言 | 第13-19页 |
| 1.1 基因修饰鱼面临的问题 | 第13-14页 |
| 1.2 类转录激活因子效应物核酸酶技术在鱼类研究中的应用 | 第14-16页 |
| 1.3 GnRH基因的分类，结构和功能 | 第16-17页 |
| 1.4 研究内容及意义 | 第17-19页 |
| 第二章 cfGnRH基因敲除斑点叉尾鮰的性成熟情况 | 第19-25页 |
| 2.1 材料与方法 | 第19-22页 |
| 2.1.1 TALEN质粒的构建和准备 | 第19-20页 |
| 2.1.2 实验亲鱼和配子 | 第20-21页 |
| 2.1.3 人工授精，电穿孔和受精卵孵化 | 第21-22页 |
| 2.1.4 TALEN鱼的养殖及性别鉴定，性成熟判别依据 | 第22页 |
| 2.2 结果 | 第22-23页 |
| 2.2.1 受精卵孵化结果 | 第22-23页 |
| 2.2.2 3 龄时性成熟率与性别比例 | 第23页 |
| 2.3 讨论 | 第23-25页 |
| 第三章 cfGnRH基因敲除鱼P1代的分子鉴定 | 第25-31页 |
| 3.1 材料与方法 | 第25-27页 |
| 3.1.1 6 月龄时样品的收集和分子鉴定 | 第25-26页 |
| 3.1.2 TA克隆与测序 | 第26-27页 |
| 3.1.3 3 龄时样品的收集和分子鉴定 | 第27页 |
| 3.2 实验结果 | 第27-29页 |
| 3.2.1 高保真PCR和Surveyor CEL-I突变存在检测实验 | 第27-28页 |
| 3.2.2 TA克隆与测序的结果 | 第28-29页 |
| 3.3 讨论 | 第29-31页 |
| 第四章 cfGnRH基因敲除对P1代成鱼排卵、授精能力和荷尔蒙分泌的影响以及F1代幼鱼的分子鉴定 | 第31-46页 |
| 4.1 材料与方法 | 第31-33页 |
| 4.1.1 亲鱼的选择情况 | 第31页 |
| 4.1.2 亲鱼的配对情况以及交配产卵实验 | 第31-32页 |
| 4.1.3 酶联免疫吸附实验 | 第32页 |
| 4.1.4 F1代受精卵的孵化存活情况 | 第32页 |
| 4.1.5 6 月龄F1代幼鱼的分子鉴定 | 第32-33页 |
| 4.1.6 统计分析 | 第33页 |
| 4.2 实验结果 | 第33-43页 |
| 4.2.1 配组与产卵 | 第33-37页 |
| 4.2.2 性激素水平 | 第37-42页 |
| 4.2.3 F1代突变检测 | 第42-43页 |
| 4.3 讨论 | 第43-46页 |
| 小结 | 第46-48页 |
| 参考文献 | 第48-53页 |
| 硕士期间发表论文与参加会议 | 第53-55页 |
| 致谢 | 第55页 |
