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慢病毒介导shRNA沉默Fgl2基因对心肌微血管内皮细胞增殖、迁移的影响及其机制的研究

摘要第1-5页
ABSTRACT第5-11页
第1章 引言第11-13页
第2章 材料与方法第13-24页
   ·实验材料第13-14页
     ·实验动物第13页
     ·主要试剂第13页
     ·主要仪器第13-14页
     ·主要试剂配置第14页
   ·实验方法第14-24页
     ·器材的准备第14-15页
     ·心肌微血管内皮细胞培养与鉴定第15-16页
     ·Fgl2shRNA慢病毒载体的构建第16-17页
     ·阳性克隆的PCR鉴定及DNA测序鉴定及westernblot外源靶选第17-18页
     ·慢病毒包装第18页
     ·实验分组第18页
     ·慢病毒转染大鼠MMVEC s第18页
     ·细胞总RNA提取及鉴定第18-19页
     ·qRT-PCR测定各组MMVECs中Fgl2、Ang1、Ang2、Tie2、Akt2mRNA的表达第19-22页
     ·MTT检测内皮细胞增殖能力第22-23页
     ·Transwell检测细胞迁移能力第23页
     ·统计学分析第23-24页
第3章 实验结果第24-26页
   ·心肌微血管内皮细胞形态学观察第24页
   ·培养细胞免疫荧光法鉴定第24页
   ·Fgl2shRNA慢病毒载体的构建、鉴定及外源靶选第24页
   ·孔稀释测定病毒滴度及慢病毒转染MMVECs第24-25页
   ·Transwell检测细胞迁移能力第25页
   ·MTT检测内皮细胞增殖能力第25页
   ·qRT—PCR检测Fgl2shRNA慢病毒转染MMVECs96小时后Fgl2、Ang1、Ang2、Tie2、Akt2mRNA的表达变化第25-26页
第4章 讨论第26-29页
   ·乳鼠心肌微血管内皮细胞培养与鉴定第26页
   ·Fgl2-shRNA慢病毒载体转染心肌微血管内皮细胞及对其增殖、迁移血管新生的影响第26-29页
第5章 结论第29-30页
致谢第30-31页
参考文献第31-33页
附图第33-42页
攻读学位期间的研究成果第42-43页
综述第43-48页
 参考文献第46-48页

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