| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-10页 |
| 第1章 引言 | 第10-14页 |
| 第2章 材料与方法 | 第14-28页 |
| ·材料 | 第14-15页 |
| ·实验动物 | 第14页 |
| ·主要试剂 | 第14-15页 |
| ·主要仪器 | 第15页 |
| ·方法 | 第15-28页 |
| ·卵巢体外培养体系的配制 | 第15-16页 |
| ·siRNA的构建、转染及筛选 | 第16-20页 |
| ·siRNA的构建 | 第16-17页 |
| ·siRNA筛选的实验分组 | 第17页 |
| ·siRNA的转染 | 第17-18页 |
| ·RT-PCR筛选最有效的siRNA干扰片段 | 第18-20页 |
| ·有效干扰片段的慢病毒包装 | 第20-21页 |
| ·慢病毒携带c-myc shRNA和neu1 shRNA感染培养中的卵巢组织 | 第21页 |
| ·实验分组 | 第21页 |
| ·慢病毒携带c-myc shRNA和neu1 shRNA的感染 | 第21页 |
| ·慢病毒携带c-myc shRNA和neu1 shRNA感染卵巢后,干扰效果的检测 | 第21-23页 |
| ·RT-PCR及琼脂糖凝胶电泳 | 第21页 |
| ·蛋白免疫印迹 | 第21-23页 |
| ·卵巢组织的石蜡制片 | 第23页 |
| ·基因芯片相关实验的方法 | 第23-27页 |
| ·实验分组 | 第23页 |
| ·提取总RNA所用器械、试剂的处理 | 第23页 |
| ·卵巢组织样品总RNA的提取和鉴定 | 第23-24页 |
| ·基因芯片检测筛选大鼠卵巢组织差异表达基因 | 第24-27页 |
| ·统计学处理 | 第27-28页 |
| 第3章 结果 | 第28-48页 |
| ·慢病毒携带c-myc shRNA感染卵巢后,c-myc mRNA和c-Myc蛋白表达变化 | 第28-31页 |
| ·c-myc siRNA干扰片段筛选 | 第28-29页 |
| ·慢病毒携带c-myc shRNA感染卵巢后,c-myc mRNA和蛋白表达变化 | 第29-31页 |
| ·慢病毒携带neu1 shRNA感染卵巢后,neu1 mRNA和Neu1蛋白表达变化 | 第31-34页 |
| ·neu1 siRNA干扰片段筛选 | 第31-32页 |
| ·慢病毒携带neu1 shRNA感染卵巢后,neu1 mRNA和蛋白表达变化 | 第32-34页 |
| ·慢病毒携带c-myc shRNA和neu1 shRNA感染卵巢后,原始卵泡启动生长发育的情况 | 第34-36页 |
| ·新生大鼠卵巢在正常Waymouth培养体系中培养8天前后的组织学观察 | 第34页 |
| ·慢病毒携带c-myc和neu1 shRNA感染卵巢后的组织学观察 | 第34-36页 |
| ·新生大鼠卵巢原始卵泡启动生长过程中,信号通路相关基因表达的变化 | 第36-48页 |
| ·大鼠卵巢组织中提取的全基因组总RNA的浓度和纯度 | 第36-37页 |
| ·基因芯片杂交的质量控制 | 第37-38页 |
| ·基因芯片的杂交结果 | 第38-40页 |
| ·原始卵泡启动生长过程中,信号通路相关基因表达的变化 | 第40-44页 |
| ·慢病毒携带c-myc shRNA感染卵巢后,原癌基因c-myc信号通路相关基因表达的变化 | 第44-45页 |
| ·慢病毒携带neu1 shRNA感染卵巢后,原癌基因neu1信号通路相关基因表达的变化 | 第45-46页 |
| ·慢病毒携带NC shRNA感染卵巢后,原癌基因c-myc和neu1信号通路相关基因表达的变化 | 第46-47页 |
| ·慢病毒携带pGCL-GFP感染卵巢后,原癌基因c-myc和neu1信号通路相关基因表达的变化 | 第47-48页 |
| 第4章 讨论 | 第48-59页 |
| ·卵巢组织体外培养RNA干扰体系的健全和完善 | 第48页 |
| ·原癌基因c-myc在原始卵泡启动生长中的作用 | 第48-49页 |
| ·原癌基因neu1在原始卵泡启动生长中的作用 | 第49-50页 |
| ·新生大鼠卵巢在正常Waymouth培养体系中培养8天前后,信号通路相关基因表达的变化 | 第50-52页 |
| ·慢病毒携带c-myc shRNA感染卵巢后,c-myc信号通路相关基因表达的变化 | 第52-55页 |
| ·慢病毒携带neu1 shRNA感染卵巢后,neu1信号通路相关基因表达的变化 | 第55-59页 |
| 第5章 结论 | 第59-60页 |
| 致谢 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-67页 |
| 附录 | 第67-70页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第70-71页 |
| 综述 | 第71-79页 |
| 参考文献 | 第79页 |
