| 摘要 | 第5-7页 |
| ABSTRACT | 第7-8页 |
| 第一章 研究背景 | 第14-29页 |
| 1.1 Hedgehog基因家族 | 第14页 |
| 1.2 Hedgehog信号通路简介 | 第14-16页 |
| 1.2.1 Hedgehog信号通路概述 | 第14-15页 |
| 1.2.2 Hedgehog信号通路与人类疾病 | 第15-16页 |
| 1.3 Hedgehog蛋白的生化特性 | 第16-25页 |
| 1.3.1 自裂解与胆固醇修饰 | 第16-19页 |
| 1.3.2 棕榈酸修饰 | 第19页 |
| 1.3.3 Hedgehog蛋白的分泌 | 第19-20页 |
| 1.3.4 Hedgehog蛋白的运输 | 第20-22页 |
| 1.3.4.1 Hedgehog远程信号生物模型 | 第20页 |
| 1.3.4.2 远程信号三种机制假说 | 第20-21页 |
| 1.3.4.3 Hedgehog多聚体形式与远程运输 | 第21-22页 |
| 1.3.5 Hedgehog信号接收以及下游信号通路的激活 | 第22-25页 |
| 1.3.5.1 HSPGs与Hedgehog信号的扩散和接收 | 第22-24页 |
| 1.3.5.2 Ptc、Smo与Hedgehog信号的接收 | 第24页 |
| 1.3.5.3 Smo启动Hedgehog下游信号通路 | 第24-25页 |
| 1.4 HhN蛋白氨基端在多聚体形成和蛋白活性中的作用 | 第25-26页 |
| 1.5 HhN蛋白羧基端的生物学功能 | 第26-29页 |
| 第二章 材料与方法 | 第29-45页 |
| 2.1 实验材料 | 第29-33页 |
| 2.1.1 细菌菌株质粒及细胞系 | 第29页 |
| 2.1.2 常用生物化学物品 | 第29-30页 |
| 2.1.3 主要耗材及仪器 | 第30页 |
| 2.1.4 实验中涉及的引物序列 | 第30-33页 |
| 2.2 实验方法 | 第33-45页 |
| 2.2.1 基因克隆 | 第33页 |
| 2.2.2 琼脂糖凝胶电泳 | 第33页 |
| 2.2.3 割胶回收 | 第33-34页 |
| 2.2.4 割胶产物/酶切产物纯化 | 第34页 |
| 2.2.5 感受态细胞制备（钙转） | 第34-35页 |
| 2.2.6 酶切与连接 | 第35-36页 |
| 2.2.7 连接产物的转化 | 第36页 |
| 2.2.8 无内毒素质粒小量提取 | 第36-37页 |
| 2.2.9 双酶切鉴定及测序 | 第37页 |
| 2.2.10 菌种复苏与冻存 | 第37页 |
| 2.2.11点突变 | 第37-38页 |
| 2.2.12 细胞系培养 | 第38-39页 |
| 2.2.13 细胞转染 | 第39页 |
| 2.2.14 蛋白提取 | 第39-40页 |
| 2.2.15 Western Blot | 第40-42页 |
| 2.2.16 稳定表达克隆筛选 | 第42-43页 |
| 2.2.17 蛋白上清收集 | 第43页 |
| 2.2.18 蛋白超滤浓缩 | 第43页 |
| 2.2.19 分子筛实验 | 第43-44页 |
| 2.2.20 TCA蛋白浓缩 | 第44-45页 |
| 第三章 结果与分析 | 第45-56页 |
| 3.1 Ihh蛋白晶体结构 | 第45-46页 |
| 3.2 IhhN蛋白羧基端保守区域多个截断体在真核细胞的表达 | 第46-49页 |
| 3.3 IhhN蛋白羧基端KSEH四个氨基酸对蛋白自裂解的影响 | 第49-52页 |
| 3.4 ShhN蛋白羧基端对自裂解的影响 | 第52-54页 |
| 3.5 IhhN蛋白羧基端SAA三个氨基酸对多聚体形成的影响 | 第54-56页 |
| 第四章 讨论 | 第56-61页 |
| 4.1 IhhN羧基端对蛋白稳定性的影响 | 第56-57页 |
| 4.2 IhhN羧基端对蛋白自裂解的影响 | 第57-59页 |
| 4.3 IhhN羧基端对蛋白多聚体形成的影响 | 第59-61页 |
| 总结与展望 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-66页 |
| 致谢 | 第66-68页 |
| 攻读硕士学位期间发表（或录用）的学术论文 | 第68页 |
