摘要 | 第5-6页 |
ABSTRACT | 第6页 |
第一章 MELK基因的研究进展 | 第9-19页 |
1.1 MELK概述 | 第9-10页 |
1.2 MELK在细胞凋亡中的研究 | 第10-14页 |
1.2.1 MELK在癌症中充当重要的角色 | 第10-11页 |
1.2.2 MELK能与BCL-G等相互作用,影响细胞凋亡 | 第11-14页 |
1.3 MELK参与造血作用和胚胎的形成 | 第14页 |
1.4 MELK调控细胞周期 | 第14-16页 |
1.5 MELK参与细胞增殖等细胞过程 | 第16-17页 |
1.6 MELK抑制因子的发现 | 第17-19页 |
第二章 猪MELK基因和催化功能域部分在SUVEC中的表达 | 第19-31页 |
2.1 材料 | 第19-20页 |
2.1.1 载体、细胞和菌种 | 第19页 |
2.1.2 酶和试剂 | 第19-20页 |
2.1.3 主要设备 | 第20页 |
2.2 方法 | 第20-27页 |
2.2.1 构建pEGFP-C1-cd重组真核表达载体 | 第20-25页 |
2.2.2 细胞培养和质粒转染 | 第25-26页 |
2.2.3 Western blotting检测过表达的pMELK和pMELK催化功能域蛋白 | 第26-27页 |
2.3 结果与分析 | 第27-29页 |
2.3.1 重组质粒pEGFP-cd双酶切鉴定和测序结果 | 第27页 |
2.3.2 重组质粒浓度检测结果 | 第27-28页 |
2.3.3 重组质粒转染猪脐静脉血管内皮细胞形态观察 | 第28-29页 |
2.3.4 western blot鉴定结果 | 第29页 |
2.4 讨论 | 第29-30页 |
2.5 小结 | 第30-31页 |
第三章 猪MELK蛋白对猪BCL-G蛋白介导细胞凋亡影响研究 | 第31-40页 |
3.1 材料 | 第31-32页 |
3.1.1 细胞与载体 | 第31-32页 |
3.1.2 主要试剂 | 第32页 |
3.1.3 主要仪器 | 第32页 |
3.2 方法 | 第32-33页 |
3.2.1 细胞转染 | 第32页 |
3.2.2 用STS对转染的细胞进行诱导 | 第32页 |
3.2.3 细胞形态学观察和Hoechst33342染色 | 第32页 |
3.2.4 HA-pMELK融合蛋白在真核细胞中的表达及western blot鉴定 | 第32-33页 |
3.2.5 STS诱导的共表达pBCL-G和pMELK蛋白的SUVEC细胞凋亡检测 | 第33页 |
3.2.6 流式细胞术检测细胞凋亡率 | 第33页 |
3.3 结果 | 第33-38页 |
3.3.1 STS诱导对细胞形态学的影响 | 第33-35页 |
3.3.2 STS诱导的过表达目的蛋白细胞凋亡率检测 | 第35-36页 |
3.3.3 HA-pMELK融合蛋白在真核细胞中表达的检测 | 第36-37页 |
3.3.4 pMELK和pBCL-G共表达对STS诱导的SUVEC细胞凋亡具有显著的抑制作用 | 第37-38页 |
3.4 讨论 | 第38-39页 |
3.5 小结 | 第39-40页 |
结论与创新点 | 第40-41页 |
结论 | 第40页 |
创新点 | 第40-41页 |
参考文献 | 第41-45页 |
致谢 | 第45-46页 |
作者简介 | 第46页 |