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猪MELK抑制BCL-G介导细胞凋亡的研究

摘要第5-6页
ABSTRACT第6页
第一章 MELK基因的研究进展第9-19页
    1.1 MELK概述第9-10页
    1.2 MELK在细胞凋亡中的研究第10-14页
        1.2.1 MELK在癌症中充当重要的角色第10-11页
        1.2.2 MELK能与BCL-G等相互作用,影响细胞凋亡第11-14页
    1.3 MELK参与造血作用和胚胎的形成第14页
    1.4 MELK调控细胞周期第14-16页
    1.5 MELK参与细胞增殖等细胞过程第16-17页
    1.6 MELK抑制因子的发现第17-19页
第二章 猪MELK基因和催化功能域部分在SUVEC中的表达第19-31页
    2.1 材料第19-20页
        2.1.1 载体、细胞和菌种第19页
        2.1.2 酶和试剂第19-20页
        2.1.3 主要设备第20页
    2.2 方法第20-27页
        2.2.1 构建pEGFP-C1-cd重组真核表达载体第20-25页
        2.2.2 细胞培养和质粒转染第25-26页
        2.2.3 Western blotting检测过表达的pMELK和pMELK催化功能域蛋白第26-27页
    2.3 结果与分析第27-29页
        2.3.1 重组质粒pEGFP-cd双酶切鉴定和测序结果第27页
        2.3.2 重组质粒浓度检测结果第27-28页
        2.3.3 重组质粒转染猪脐静脉血管内皮细胞形态观察第28-29页
        2.3.4 western blot鉴定结果第29页
    2.4 讨论第29-30页
    2.5 小结第30-31页
第三章 猪MELK蛋白对猪BCL-G蛋白介导细胞凋亡影响研究第31-40页
    3.1 材料第31-32页
        3.1.1 细胞与载体第31-32页
        3.1.2 主要试剂第32页
        3.1.3 主要仪器第32页
    3.2 方法第32-33页
        3.2.1 细胞转染第32页
        3.2.2 用STS对转染的细胞进行诱导第32页
        3.2.3 细胞形态学观察和Hoechst33342染色第32页
        3.2.4 HA-pMELK融合蛋白在真核细胞中的表达及western blot鉴定第32-33页
        3.2.5 STS诱导的共表达pBCL-G和pMELK蛋白的SUVEC细胞凋亡检测第33页
        3.2.6 流式细胞术检测细胞凋亡率第33页
    3.3 结果第33-38页
        3.3.1 STS诱导对细胞形态学的影响第33-35页
        3.3.2 STS诱导的过表达目的蛋白细胞凋亡率检测第35-36页
        3.3.3 HA-pMELK融合蛋白在真核细胞中表达的检测第36-37页
        3.3.4 pMELK和pBCL-G共表达对STS诱导的SUVEC细胞凋亡具有显著的抑制作用第37-38页
    3.4 讨论第38-39页
    3.5 小结第39-40页
结论与创新点第40-41页
    结论第40页
    创新点第40-41页
参考文献第41-45页
致谢第45-46页
作者简介第46页

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