中文摘要 | 第3-5页 |
ABSTRACT | 第5-7页 |
缩略语 | 第8-14页 |
第一章 绪论 | 第14-28页 |
1.1 前言 | 第14-15页 |
1.2 汉坦病毒的结构与功能 | 第15-19页 |
1.2.1 汉坦病毒的形态与结构研究 | 第15-17页 |
1.2.2 汉坦病毒包膜糖蛋白的主要生物学特性 | 第17-19页 |
1.3 糖蛋白与糖基化 | 第19-21页 |
1.3.1 蛋白质的糖基化 | 第19-20页 |
1.3.2 蛋白质的糖基化类型 | 第20-21页 |
1.4 病毒包膜糖蛋白与糖基化研究 | 第21-25页 |
1.4.1 病毒糖蛋白糖基化与功能研究 | 第21-24页 |
1.4.2 汉坦病毒包膜糖蛋白的糖基化研究 | 第24-25页 |
1.5 重组假病毒技术 | 第25-28页 |
1.5.1 假病毒的特性和优势 | 第25页 |
1.5.2 假病毒的制备方法和载体系统 | 第25-26页 |
1.5.3 重组假病毒技术在病毒学研究中的应用 | 第26-28页 |
第二章 HTNV包膜糖蛋白多糖基化位点突变型重组假病毒的构建与活性鉴定 | 第28-42页 |
2.1 材料 | 第28-31页 |
2.1.1 质粒和菌种 | 第28页 |
2.1.2 细胞和载体 | 第28-29页 |
2.1.3 主要试剂 | 第29-30页 |
2.1.4 培养液 | 第30-31页 |
2.1.5 常用缓冲液系统与溶液 | 第31页 |
2.1.6 主要仪器和器材 | 第31页 |
2.2 实验方法 | 第31-35页 |
2.2.1 构建多糖基化位点共突变体模板的制备 | 第32-34页 |
2.2.2 重组HTNV假病毒的包装 | 第34-35页 |
2.2.3 重组假病毒的培养、扩增及滴度测定 | 第35页 |
2.2.4 重组假病毒表达产物的鉴定—免疫荧光实验 | 第35页 |
2.3 实验结果 | 第35-39页 |
2.3.1 HTNV M基因多糖基化位点的突变结果 | 第35-36页 |
2.3.2 重组慢病毒表达载体的构建与鉴定结果 | 第36-37页 |
2.3.3 假病毒颗粒包装结果 | 第37-38页 |
2.3.4 重组假病毒滴度测定结果 | 第38页 |
2.3.5 重组假病毒表达产物的间接免疫荧光检测结果 | 第38-39页 |
2.4 讨论 | 第39-42页 |
第三章 多糖基化位点突变对HTNV包膜糖蛋白免疫学活性的影响 | 第42-60页 |
3.1 材料 | 第42-43页 |
3.1.1 假病毒株 | 第42页 |
3.1.2 细胞 | 第42页 |
3.1.3 病毒株 | 第42页 |
3.1.4 动物 | 第42页 |
3.1.5 抗体及主要试剂 | 第42-43页 |
3.1.6 其他常用试剂、缓冲液 | 第43页 |
3.1.7 主要仪器、设备 | 第43页 |
3.2 实验方法 | 第43-46页 |
3.2.1 动物免疫 | 第43页 |
3.2.2 重组假病毒免疫小鼠血清抗HTNV特异性抗体检测——ELISA间接法 | 第43-44页 |
3.2.3 重组假病毒免疫小鼠血清中和抗体检测——微量细胞培养中和试验 | 第44页 |
3.2.4 重组假病毒免疫小鼠细胞因子的检测 | 第44-45页 |
3.2.5 重组假病毒免疫对HTNV感染小鼠的保护性试验 | 第45页 |
3.2.6 免疫小鼠脾细胞特异性CTL杀伤活性的检测 | 第45-46页 |
3.2.7 统计分析 | 第46页 |
3.3 结果 | 第46-53页 |
3.3.1 免疫小鼠血清中抗HTNV特异性抗体检测结果 | 第46-47页 |
3.3.2 免疫小鼠血清中和抗体的检测结果 | 第47-48页 |
3.3.3 免疫小鼠细胞因子IFN-γ分泌水平的检测结果 | 第48-50页 |
3.3.4 免疫小鼠的特异性CTL杀伤试验结果 | 第50-51页 |
3.3.5 重组假病毒免疫对HTNV感染小鼠的保护性试验结果 | 第51-53页 |
3.4 讨论 | 第53-60页 |
3.4.1 免疫小鼠体液免疫水平检测结果 | 第53-56页 |
3.4.2 免疫小鼠细胞免疫水平检测结果 | 第56-58页 |
3.4.3 重组假病毒免疫对HTNV感染小鼠的保护性试验结果 | 第58-60页 |
小结 | 第60-62页 |
参考文献 | 第62-77页 |
攻读硕士学位期间研究成果 | 第77-78页 |
致谢 | 第78页 |