摘要 | 第4-6页 |
Summary | 第6-8页 |
第一章 文献综述 | 第12-27页 |
1 前言 | 第12-13页 |
2 虹鳟的一般生物学 | 第13-14页 |
2.1 形态特征 | 第13页 |
2.2 生长环境 | 第13页 |
2.3 繁殖习性 | 第13-14页 |
3 应激和热应激 | 第14-21页 |
3.1 应激和应激源 | 第14-15页 |
3.2 鱼类热应激 | 第15-16页 |
3.3 鱼类应激反应研究技术与方法 | 第16-21页 |
3.3.1 应激反应对鱼类抗氧化能力的影响 | 第16-17页 |
3.3.2 应激反应对鱼类免疫机能的影响 | 第17-20页 |
3.3.3 应激反应对鱼类血清蛋白的影响 | 第20页 |
3.3.4 应激反应对鱼类血糖的影响 | 第20页 |
3.3.5 应激反应对鱼类血清无机成分的影响 | 第20-21页 |
4 热休克蛋白(HSPs)简述 | 第21-25页 |
4.1 HSPs的发现过程 | 第21-22页 |
4.2 HSPs的分类及特性 | 第22-23页 |
4.3 HSPs的生物学功能及研究现状 | 第23-24页 |
4.4 GRP78 | 第24-25页 |
5 mRNA表达水平的real-time FQ-PCR分析技术 | 第25-27页 |
5.1 Real-time FQ-PCR原理及分类 | 第25-26页 |
5.2 Real-time FQ-PCR定量分析方法 | 第26-27页 |
5.2.1 绝对定量(AQ)分析 | 第26页 |
5.2.2 相对定量(RQ)分析 | 第26-27页 |
第二章 热应激对虹鳟生化指标的影响 | 第27-43页 |
1 材料与方法 | 第27-30页 |
1.1 试验动物 | 第27页 |
1.2 主要试剂 | 第27页 |
1.3 主要仪器设备 | 第27-28页 |
1.4 呼吸爆发测定相关试剂配制 | 第28页 |
1.5 热应激处理及采样 | 第28-29页 |
1.6 虹鳟生化指标的测定 | 第29-30页 |
1.6.1 RB的测定 | 第29-30页 |
1.6.2 T-SOD、MDA、AKP、LDH、CK、LZM和C3的测定 | 第30页 |
1.6.3 ALT、AST、T-Bill、TG、TC和血清蛋白(ALB、GLO、TP)的测定 | 第30页 |
2 数据处理 | 第30-31页 |
3 结果与分析 | 第31-36页 |
3.1 临床症状观察 | 第31页 |
3.2 热应激下虹鳟生化指标的变化 | 第31-36页 |
3.2.1 热应激下虹鳟脾脏RB的变化 | 第31-32页 |
3.2.2 热应激下虹鳟血清T-SOD和MDA的变化 | 第32页 |
3.2.3 热应激下虹鳟血清ALT、AST、T-Bill、LDH、AKP和CK的变化 | 第32-34页 |
3.2.4 热应激下虹鳟血清LZM和C3的变化 | 第34页 |
3.2.5 热应激下虹鳟血清蛋白的变化 | 第34-35页 |
3.2.6 热应激下虹鳟GLU、Ca、Mg和P含量的变化 | 第35-36页 |
4 讨论 | 第36-42页 |
4.1 热应激对虹鳟脾脏RB的影响 | 第36页 |
4.2 热应激对虹鳟血清T-SOD和MDA的影响 | 第36-37页 |
4.3 热应激对虹鳟血清ALT、AST、T-Bill、LDH、AKP和CK的影响 | 第37-39页 |
4.4 热应激对虹鳟血清LZM和C3的影响 | 第39-41页 |
4.5 热应激对虹鳟血清蛋白的影响 | 第41页 |
4.6 热应激对虹鳟GLU、Ca、Mg和P的影响 | 第41-42页 |
5 小结 | 第42-43页 |
第三章 热应激对虹鳟各组织GRP78 mRNA表达水平的影响 | 第43-59页 |
1 材料与方法 | 第43-50页 |
1.1 试验动物 | 第43页 |
1.2 主要试剂 | 第43页 |
1.3 主要仪器设备 | 第43-44页 |
1.4 溶液配制 | 第44页 |
1.4.1 RNA相关试剂配制 | 第44页 |
1.4.2 琼脂糖凝胶电泳试剂配制 | 第44页 |
1.5 热应激处理及采样 | 第44-45页 |
1.6 荧光定量PCR测定GRP78 mRNA表达水平 | 第45-50页 |
1.6.1 总RNA的提取 | 第45-46页 |
1.6.2 RNA浓度及纯度检测 | 第46-47页 |
1.6.3 cDNA第一条链合成 | 第47-48页 |
1.6.4 引物设计与合成 | 第48页 |
1.6.5 普通PCR反应筛选扩增条件 | 第48-49页 |
1.6.6 实时荧光定量PCR(real-time FQ-PCR) | 第49-50页 |
2 数据处理 | 第50页 |
3 结果与分析 | 第50-55页 |
3.1 总RNA提取质量 | 第50-51页 |
3.2 普通PCR扩增产物 | 第51-54页 |
3.2.1 PCR扩增条件优化 | 第51-52页 |
3.2.2 Real-time FQ-PCR扩增曲线 | 第52-53页 |
3.2.3 Real-time FQ-PCR熔接曲线 | 第53-54页 |
3.3 热应激下虹鳟各组织GRP78相对表达量的变化 | 第54-55页 |
3.3.1 GRP78 mRNA组织表达差异 | 第54页 |
3.3.2 同一组织不同温度下GRP78 mRNA组织表达差异 | 第54-55页 |
4 讨论 | 第55-58页 |
4.1 热应激对肝脏和中肾组织GRP78 mRNA表达量的影响 | 第56-57页 |
4.2 热应激对心脏组织GRP78 mRNA表达量的影响 | 第57页 |
4.3 热应激对脾脏组织GRP78 mRNA表达量的影响 | 第57页 |
4.4 热应激对脑组织GRP78 mRNA表达量的影响 | 第57-58页 |
5 小结 | 第58-59页 |
第四章 结论 | 第59-60页 |
致谢 | 第60-61页 |
参考文献 | 第61-71页 |
附录:英文简写对照表 | 第71-73页 |
作者简介 | 第73-74页 |
导师简介 | 第74-75页 |