| 致谢 | 第4-5页 |
| 缩略语 | 第5-10页 |
| 摘要 | 第10-12页 |
| 1 文献综述 | 第12-22页 |
| 1.1 绵羊卵母细胞体外成熟 | 第12页 |
| 1.2 卵母细胞成熟影响因素 | 第12-15页 |
| 1.2.1 季节和年龄、卵巢大小 | 第12页 |
| 1.2.2 卵母细胞的获取 | 第12-13页 |
| 1.2.2.1 卵母细胞的储存温度、采集方法及时间 | 第12页 |
| 1.2.2.2 卵母细胞形态和卵泡的大小 | 第12-13页 |
| 1.2.3 培养温度和时间 | 第13页 |
| 1.2.4 培养基添加的成分 | 第13-15页 |
| 1.2.4.1 血清 | 第13页 |
| 1.2.4.2 激素 | 第13-14页 |
| 1.2.4.3 卵泡液 | 第14页 |
| 1.2.4.4 生长因子和细胞因子 | 第14页 |
| 1.2.4.5 抗氧化物质 | 第14-15页 |
| 1.3 哺乳动物卵母细胞成熟的一般过程和鉴定 | 第15页 |
| 1.3.1 成熟的一般过程 | 第15页 |
| 1.3.2 卵母细胞成熟的鉴定 | 第15页 |
| 1.4 胞质内单精子注射（ICSI） | 第15-22页 |
| 1.4.1 胞质内单精子注射的研究简史 | 第15-16页 |
| 1.4.2 卵子状态对ICSI的影响 | 第16-17页 |
| 1.4.3 精子对ICSI的影响 | 第17-18页 |
| 1.4.3.1 精子来源和状态 | 第17-18页 |
| 1.4.3.2 精子的预处理 | 第18页 |
| 1.4.4 卵母细胞的激活机制 | 第18-19页 |
| 1.4.5 ICSI卵的人工激活 | 第19-20页 |
| 1.4.6 显微操作技术 | 第20页 |
| 1.4.7 第一极体的位置对ICSI的影响 | 第20-21页 |
| 1.4.8 ICSI技术的应用前景及存在问题 | 第21-22页 |
| 2 引言 | 第22-23页 |
| 3 材料和方法 | 第23-31页 |
| 3.1 材料与仪器 | 第23-25页 |
| 3.1.1 试验材料 | 第23页 |
| 3.1.2 试剂药品 | 第23页 |
| 3.1.3 主要仪器 | 第23-24页 |
| 3.1.4 主要溶液 | 第24-25页 |
| 3.2 实验方法和设计 | 第25-29页 |
| 3.2.1 卵巢的清洗 | 第25-26页 |
| 3.2.2 卵母细胞的采集 | 第26页 |
| 3.2.3 卵母细胞的分级 | 第26页 |
| 3.2.4 卵母细胞体外成熟 | 第26页 |
| 3.2.5 卵母细胞成熟的鉴定 | 第26-27页 |
| 3.2.6 颗粒细胞单层的制备 | 第27页 |
| 3.2.7 精子处理: | 第27页 |
| 3.2.8 显微操作针的制备 | 第27-28页 |
| 3.2.8.1 制作显微操作针前的玻璃管处理 | 第27-28页 |
| 3.2.8.2 拉针 | 第28页 |
| 3.2.8.3 制作注射针 | 第28页 |
| 3.2.8.4 持卵针的制作 | 第28页 |
| 3.2.9 操作盘的准备 | 第28-29页 |
| 3.2.10 精子的注射 | 第29页 |
| 3.2.11 ICSI卵的激活 | 第29页 |
| 3.2.12 ICSI卵的培养 | 第29页 |
| 3.2.13 数据分析 | 第29页 |
| 3.3 实验设计 | 第29-31页 |
| 3.3.1 比较不同季节对绵羊卵母细胞的数量和成熟质量的影响 | 第29页 |
| 3.3.2 比较不同成熟时间对ICSI的影响 | 第29-30页 |
| 3.3.3 比较高渗操作液对ICSI的影响。 | 第30页 |
| 3.3.4 第一极体位置对ICSI的影响 | 第30页 |
| 3.3.5 比较精子预处理对ICSI的影响 | 第30页 |
| 3.3.6 比较精子共孵育和非共孵育对胚胎发育的影响 | 第30页 |
| 3.3.7 培养系统对ICSI胚发育的影响 | 第30-31页 |
| 4 结果与分析 | 第31-34页 |
| 4.1 不同季节采卵对绵羊卵母细胞获得数和体外成熟的影响 | 第31页 |
| 4.2 卵母细胞成熟时间对绵羊ICSI的影响 | 第31-32页 |
| 4.3 操作液不同渗透压对ICSI注射效率的影响 | 第32页 |
| 4.4 第一极体的位置对绵羊ICSI的影响 | 第32-33页 |
| 4.5 超声波处理不同状态精子对ICSI卵的影响 | 第33页 |
| 4.6 精子不同预处理方法对 ICSI 的影响 | 第33页 |
| 4.7 培养系统对ICSI胚发育的影响 | 第33-34页 |
| 5 讨论 | 第34-38页 |
| 5.1 不同季节对采集卵母细胞的数量和质量的影响 | 第34页 |
| 5.2 卵母细胞成熟时间对ICSI的影响 | 第34-35页 |
| 5.3 高渗操作液对显微操作及ICSI卵发育的影响 | 第35页 |
| 5.4 第一极体位置对ICSI注射的影响 | 第35-36页 |
| 5.5 不同状态精子处理对ICSI的影响 | 第36页 |
| 5.6 精子不同方法预处理和外源 DNA 共孵育对 ICSI 的影响 | 第36-38页 |
| 5.7 培养系统对绵羊ICSI胚发育的影响 | 第38页 |
| 6 结论 | 第38-39页 |
| 参考文献 | 第39-47页 |
| 附图 | 第47-50页 |
| ABSTRACT | 第50页 |
