中文摘要 | 第6-8页 |
Abstract | 第8-10页 |
缩略词表 | 第11-12页 |
前言 | 第12-16页 |
实验研究 | 第16页 |
第一部分 肾阴虚及肾阳虚证候动物模型的建立 | 第16-33页 |
1 实验材料 | 第16-17页 |
1.1 实验试剂 | 第16-17页 |
1.2 实验动物 | 第17页 |
1.3 实验仪器 | 第17页 |
2 实验方法 | 第17-20页 |
2.1 肾阴虚证候动物模型的分组及造模 | 第17-18页 |
2.2 肾阳虚证候动物模型的分组及造模 | 第18页 |
2.3 大鼠行为学指标观察 | 第18页 |
2.4 放免法测定大鼠血清T3和T4的含量 | 第18-20页 |
2.5 酶联免疫法测定大鼠血清cAMP、cGMP、E_2、T、Cort的含量 | 第20页 |
2.6 统计学方法 | 第20页 |
3 实验结果 | 第20-31页 |
3.1 一般状况 | 第20-21页 |
3.2 对大鼠血清T3和T4含量的影响 | 第21-25页 |
3.3 对大鼠血清cAMP、cGMP、cAMP/cGMP的影响 | 第25-27页 |
3.4 对大鼠血清E_2、T、Cort的影响 | 第27-31页 |
4 小结 | 第31-33页 |
第二部分 不同肾虚证候何首乌含药血清对肝细胞凋亡的影响 | 第33-59页 |
1 实验材料 | 第33-35页 |
1.1 实验药物 | 第33-34页 |
1.2 实验动物 | 第34页 |
1.3 实验仪器 | 第34-35页 |
1.4 实验试剂 | 第35页 |
2 实验方法 | 第35-40页 |
2.1 不同证候何首乌含药血清的制备 | 第35-36页 |
2.2 L02肝细胞的培养 | 第36页 |
2.3 MTT法测定肝细胞增殖状况 | 第36页 |
2.4 荧光显微镜分析肝细胞凋亡指数 | 第36-37页 |
2.5 透射电镜观察肝细胞超微结构 | 第37页 |
2.6 流式细胞仪测定肝细胞凋亡率 | 第37-38页 |
2.7 DTNB法测定细胞内GSH和GSSG的含量 | 第38-39页 |
2.8 2-TBA反应测定细胞内MDA的含量 | 第39-40页 |
2.9 统计学方法 | 第40页 |
3 实验结果 | 第40-57页 |
3.1 对肝细胞增殖及形态的影响 | 第40-46页 |
3.2 对肝细胞凋亡指数的影响 | 第46-48页 |
3.3 对肝细胞超微结构的影响 | 第48-49页 |
3.4 对肝细胞凋亡率的影响 | 第49-52页 |
3.5 对肝细胞GSH、GSSG及MDA含量的影响 | 第52-57页 |
4 小结 | 第57-59页 |
第三部分 何首乌对肾虚证候整体动物模型肝毒性的影响及其毒性机制研究 | 第59-98页 |
1 实验材料 | 第59-63页 |
1.1 实验药物 | 第59-60页 |
1.2 实验动物 | 第60页 |
1.3 实验仪器 | 第60-61页 |
1.4 实验试剂 | 第61-63页 |
2 实验方法 | 第63-75页 |
2.1 肾阴虚及肾阳虚大鼠模型的建立及分组给药 | 第63-64页 |
2.2 全自动生化分析仪检测大鼠血清生化酶水平 | 第64-67页 |
2.3 HE染色观察肝组织形态学的改变 | 第67页 |
2.4 比色法测定肝组织中GSH-Px活力 | 第67-68页 |
2.5 2-TBA反应测定肝组织MDA含量 | 第68-70页 |
2.6 TUNEL法测定肝组织细胞凋亡指数 | 第70页 |
2.7 大鼠肝脏线粒体的提取纯化 | 第70-71页 |
2.8 大鼠肝线粒体SDH活力的测定 | 第71-72页 |
2.9 大鼠肝线粒体呼吸链复合物Ⅰ活性的测定 | 第72-73页 |
2.10 S-P法测定肝组织Fas/FasL蛋白表达的影响 | 第73页 |
2.11 实时荧光定量PCR检测肝组织Bcl-2和Bax mRNA的表达 | 第73-75页 |
2.12 统计学方法 | 第75页 |
3 实验结果 | 第75-95页 |
3.1 一般状况 | 第75-76页 |
3.2 大鼠肝组织形态的HE染色观察结果 | 第76-77页 |
3.3 对大鼠血清ALT、AST、ALP、TBIL、DBIL含量的影响 | 第77-80页 |
3.4 对大鼠肝组织GSH-Px活力及MDA含量的影响 | 第80-82页 |
3.5 对大鼠肝组织细胞凋亡指数的影响 | 第82-85页 |
3.6 对大鼠肝脏线粒体中SDH活力的影响 | 第85-86页 |
3.7 对大鼠肝脏线粒体呼吸链复合物Ⅰ活性的影响 | 第86-88页 |
3.8 对大鼠对肝组织Fas/FasL蛋白表达的影响 | 第88-91页 |
3.9 对大鼠肝组织Bcl-2和Bax mRNA表达的影响 | 第91-95页 |
4 小结 | 第95-98页 |
讨论 | 第98-112页 |
1 肾阴虚及肾阳虚证候动物模型的建立 | 第98-101页 |
1.1 造模动物的选择 | 第98页 |
1.2 肾阴虚证候的造模方法 | 第98-100页 |
1.3 肾阳虚证候的造模方法 | 第100-101页 |
2 不同肾虚证候何首乌含药血清对肝细胞凋亡的影响 | 第101-104页 |
2.1 血清药理学实验 | 第101页 |
2.2 MTT实验结果分析 | 第101-102页 |
2.3 细胞凋亡率、凋亡指数及细胞超微结构变化 | 第102-103页 |
2.4 细胞内GSH、GSSG及MDA含量检测结果分析 | 第103-104页 |
3 何首乌对不同肾虚证候整体动物模型肝毒性的影响 | 第104-112页 |
3.1 血液生化酶水平检测结果分析 | 第104-106页 |
3.2 GSH-Px活力、MDA含量检测结果分析 | 第106-107页 |
3.3 肝组织细胞凋亡指数检测结果分析 | 第107页 |
3.4 肝线粒体SDH、NADH-Q还原酶复合体检测结果分析 | 第107-109页 |
3.5 Fas/FasL蛋白表达检测结果分析 | 第109-110页 |
3.6 Bcl-2和Bax mRNA表达检测结果分析 | 第110-112页 |
结论 | 第112-113页 |
创新点 | 第113-114页 |
问题与展望 | 第114-115页 |
致谢 | 第115-116页 |
参考文献 | 第116-124页 |
综述一 肾虚证动物模型的研究进展 | 第124-135页 |
参考文献 | 第130-135页 |
综述二 何首乌不同炮制品肝毒性的研究进展 | 第135-144页 |
参考文献 | 第140-144页 |
在读期间公开发表的学术论文、专著及科研成果 | 第144-145页 |