| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 英文缩略表 | 第12-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-24页 |
| 1.1 OPAQUE-2(O2)转录因子 | 第13-14页 |
| 1.2 玉米胚乳修饰基因及QPM | 第14-16页 |
| 1.3 OPAQUE-2玉米近等基因系 | 第16-17页 |
| 1.4 ADPG焦磷酸化酶(AGPASE) | 第17页 |
| 1.5 蔗糖合酶(SuSY) | 第17-19页 |
| 1.6 酵母单杂交 | 第19-22页 |
| 1.7 研究内容和目的 | 第22-24页 |
| 1.7.1 研究目的 | 第22页 |
| 1.7.2 研究内容 | 第22-23页 |
| 1.7.3 技术路线 | 第23-24页 |
| 第二章 O2-NILS构建 | 第24-30页 |
| 2.1 材料与方法 | 第24-27页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第24页 |
| 2.1.2 实验仪器及耗材 | 第24页 |
| 2.1.3 实验试剂及药品 | 第24页 |
| 2.1.4 实验药品配制 | 第24页 |
| 2.1.5 试验方法 | 第24-27页 |
| 2.2 试验结果 | 第27-29页 |
| 2.3 讨论 | 第29-30页 |
| 第三章 O2转录因子对SH1、SH2基因作用研究 | 第30-54页 |
| 3.1 O2转录因子与SH1、SH2基因启动子互作 | 第30-40页 |
| 3.1.1 材料方法 | 第30-31页 |
| 3.1.1.1 实验材料 | 第30页 |
| 3.1.1.2 实验仪器及耗材 | 第30-31页 |
| 3.1.1.3 实验试剂及药品 | 第31页 |
| 3.1.1.4 实验药品配制 | 第31页 |
| 3.1.2 实验方法 | 第31-37页 |
| 3.1.2.1 酵母单杂载体构建 | 第31-36页 |
| 3.1.2.2 EGY48酵母菌株复苏 | 第36页 |
| 3.1.2.3 EGY48酵母感受态制备 | 第36页 |
| 3.1.2.4 pLacZi质粒与pB42AD质粒的共转化 | 第36-37页 |
| 3.1.2.5 酵母细胞阳性克隆检测 | 第37页 |
| 3.1.2.6 O2转录因子与Sh1、Sh2基因启动子互作检测 | 第37页 |
| 3.1.3 实验结果与分析 | 第37-40页 |
| 3.1.3.1 Sh1、Sh2目的片段的获得及pLacZi载体构建 | 第37-38页 |
| 3.1.3.2 pB42AD-O2与pLacZi-Sh1/Sh2成功共转化酵母营养缺陷型菌株EGY48 | 第38页 |
| 3.1.3.3 O2转录因子能与Sh1、Sh2启动子片段发生互作 | 第38-40页 |
| 3.2 O2转录因子调控SH2基因的表达 | 第40-50页 |
| 3.2.1 材料方法 | 第40-41页 |
| 3.2.1.1 实验材料 | 第40-41页 |
| 3.2.1.2 实验仪器及耗材 | 第41页 |
| 3.2.1.3 实验试剂及药品 | 第41页 |
| 3.2.1.4 实验药品配制 | 第41页 |
| 3.2.2 实验方法 | 第41-45页 |
| 3.2.2.1 材料种植 | 第41页 |
| 3.2.2.2 胚乳材料准备 | 第41页 |
| 3.2.2.3 玉米胚乳总RNA提取 | 第41页 |
| 3.2.2.4 RNA质量检测 | 第41-42页 |
| 3.2.2.5 RNA反转录 | 第42-43页 |
| 3.2.2.6 实时荧光定量引物设计 | 第43页 |
| 3.2.2.7 荧光定量引物特异性检测 | 第43页 |
| 3.2.2.8 探索实时荧光定量cDNA模版最佳浓度 | 第43页 |
| 3.2.2.9 实时荧光定量 | 第43-45页 |
| 3.2.3 实验结果与分析 | 第45-50页 |
| 3.2.3.1 提取玉米籽粒RNA | 第45页 |
| 3.2.3.2 荧光定量引物特异性检测结果 | 第45-46页 |
| 3.2.3.3 近等基因系中O2基因的相对表达 | 第46-48页 |
| 3.2.3.4 近等基因系中Sh2基因的相对表达 | 第48-50页 |
| 3.3 o2近等基因系籽粒淀粉含量差异 | 第50-52页 |
| 3.3.1 实验材料 | 第50页 |
| 3.3.2 实验方法 | 第50-51页 |
| 3.3.3 实验结果 | 第51-52页 |
| 3.4 讨论 | 第52-54页 |
| 3.4.1 OPAQUE-2对Sh1、Sh2的作用 | 第52页 |
| 3.4.2 o2-NILs中Sh2基因的差异表达 | 第52-53页 |
| 3.4.3 O2基因参与淀粉合成途径 | 第53-54页 |
| 第四章 全文结论 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-60页 |
| 附录 | 第60-79页 |
| 附录1 O2-NILS构建系谱 | 第60-63页 |
| 附录2 DNA提取(CTAB裂解法) | 第63-64页 |
| 附录3 SSR电泳操作方法步骤 | 第64-66页 |
| 附录4 SH1、SH2启动子目的片段序列 | 第66-67页 |
| 附录5 酵母单杂交载体PLACZI、PB42AD相关信息 | 第67-69页 |
| 附录6 SH1、SH2启动子片段克隆后测序与数据库中W153R序列比对结果 | 第69-70页 |
| 附录7 酵母单杂交实验中试剂和培养基的配制 | 第70-73页 |
| 附录8 酵母细胞感受态制备 | 第73-74页 |
| 附录9 酵母细胞阳性克隆检测 | 第74-76页 |
| 附录10 质粒DNA提取方法步骤 | 第76-77页 |
| 附录11 玉米籽粒胚乳总RNA提取方法(离心柱型) | 第77-79页 |
| 致谢 | 第79页 |
