摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-7页 |
第一章 前言 | 第7-13页 |
·家禽卵巢结构及卵泡发育特征 | 第7-11页 |
·原始卵泡和初级卵泡 | 第8页 |
·等级前卵泡 | 第8-9页 |
·卵泡选择机制 | 第9页 |
·排卵前卵泡与排卵后卵泡 | 第9-10页 |
·卵泡的血管化和神经支配 | 第10-11页 |
·禽类卵泡闭锁 | 第11页 |
·膜联蛋白Ⅱ(ANXA2)的生物学特征及在卵巢发育中的功能 | 第11-12页 |
·本研究的目的及意义 | 第12-13页 |
第二章 实验材料与方法 | 第13-31页 |
·实验材料 | 第13-15页 |
·实验动物与样品采集 | 第13页 |
·主要仪器及厂商 | 第13页 |
·主要试剂及来源 | 第13-14页 |
·常用试剂的配制 | 第14页 |
·主要分子生物学数据库和软件 | 第14-15页 |
·实验方法 | 第15-30页 |
·鸡卵巢组织DNA的提取 | 第15页 |
·DNA凝胶回收 | 第15-16页 |
·鸡卵巢组织及膜细胞和颗粒细胞总RNA的提取及cDNA的合成 | 第16-19页 |
·实时荧光定量PCR(Quantitative Real-time PCR) | 第19-20页 |
·ANXA2基因的 5′调控区分析 | 第20-26页 |
·ANXA2基因过表达载体的构建 | 第26-27页 |
·细胞瞬时转染和荧光素酶检测 | 第27-29页 |
·ELISA定量检测细胞培养液中VEGFA的含量 | 第29-30页 |
·MTT法检测细胞的增殖活性 | 第30页 |
·统计分析 | 第30-31页 |
第三章 实验结果与分析 | 第31-44页 |
·总RNA的提取 | 第31页 |
·ANXA2基因mRNA在卵巢中的表达变化分析 | 第31-36页 |
·ANXA2基因在开产前后卵巢中的表达变化 | 第33页 |
·ANXA2基因在开产后的不同卵泡中的表达变化 | 第33-34页 |
·ANXA2基因在开产后的卵泡膜细胞和颗粒细胞中的表达变化 | 第34页 |
·不同促性腺激素和类固醇激素对膜细胞ANXA2基因表达的调节作用 | 第34-36页 |
·ANXA2基因的启动子区分析 | 第36-41页 |
·鸡卵巢组织基因组DNA的提取 | 第36页 |
·ANXA2基因启动子区的PCR扩增 | 第36-37页 |
·pGL3-ANXA2-2283载体序列比对分析 | 第37-38页 |
·ANXA2基因启动子区不同缺失片段载体的构建 | 第38-39页 |
·双荧光素酶分析ANXA2基因启动子区不同片段的活性 | 第39页 |
·添加FSH对ANXA2基因不同启动子区启动活性的影响 | 第39-40页 |
·ANXA2基因启动子区的生物信息学分析 | 第40-41页 |
·对膜细胞中ANXA2基因过表达的研究 | 第41-44页 |
·RT-PCR扩增ANXA2基因的编码区 | 第41页 |
·过表达载体pcDNA-ANXA2的构建 | 第41-42页 |
·ANXA2基因过表达后VEGFA及其受体的表达变化 | 第42-43页 |
·MTT检测过表达ANXA2基因后的膜细胞增殖变化 | 第43-44页 |
第四章 讨论 | 第44-46页 |
第五章 结论 | 第46-47页 |
附录:缩略语索引 | 第47-48页 |
参考文献 | 第48-52页 |
硕士期间发表的学术论文及专利 | 第52-53页 |
致谢 | 第53页 |