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鸡ANXA2基因在卵泡发育中的表达及调控研究

摘要第1-4页
Abstract第4-7页
第一章 前言第7-13页
   ·家禽卵巢结构及卵泡发育特征第7-11页
     ·原始卵泡和初级卵泡第8页
     ·等级前卵泡第8-9页
     ·卵泡选择机制第9页
     ·排卵前卵泡与排卵后卵泡第9-10页
     ·卵泡的血管化和神经支配第10-11页
     ·禽类卵泡闭锁第11页
   ·膜联蛋白Ⅱ(ANXA2)的生物学特征及在卵巢发育中的功能第11-12页
   ·本研究的目的及意义第12-13页
第二章 实验材料与方法第13-31页
   ·实验材料第13-15页
     ·实验动物与样品采集第13页
     ·主要仪器及厂商第13页
     ·主要试剂及来源第13-14页
     ·常用试剂的配制第14页
     ·主要分子生物学数据库和软件第14-15页
   ·实验方法第15-30页
     ·鸡卵巢组织DNA的提取第15页
     ·DNA凝胶回收第15-16页
     ·鸡卵巢组织及膜细胞和颗粒细胞总RNA的提取及cDNA的合成第16-19页
     ·实时荧光定量PCR(Quantitative Real-time PCR)第19-20页
     ·ANXA2基因的 5′调控区分析第20-26页
     ·ANXA2基因过表达载体的构建第26-27页
     ·细胞瞬时转染和荧光素酶检测第27-29页
     ·ELISA定量检测细胞培养液中VEGFA的含量第29-30页
     ·MTT法检测细胞的增殖活性第30页
   ·统计分析第30-31页
第三章 实验结果与分析第31-44页
   ·总RNA的提取第31页
   ·ANXA2基因mRNA在卵巢中的表达变化分析第31-36页
     ·ANXA2基因在开产前后卵巢中的表达变化第33页
     ·ANXA2基因在开产后的不同卵泡中的表达变化第33-34页
     ·ANXA2基因在开产后的卵泡膜细胞和颗粒细胞中的表达变化第34页
     ·不同促性腺激素和类固醇激素对膜细胞ANXA2基因表达的调节作用第34-36页
   ·ANXA2基因的启动子区分析第36-41页
     ·鸡卵巢组织基因组DNA的提取第36页
     ·ANXA2基因启动子区的PCR扩增第36-37页
     ·pGL3-ANXA2-2283载体序列比对分析第37-38页
     ·ANXA2基因启动子区不同缺失片段载体的构建第38-39页
     ·双荧光素酶分析ANXA2基因启动子区不同片段的活性第39页
     ·添加FSH对ANXA2基因不同启动子区启动活性的影响第39-40页
     ·ANXA2基因启动子区的生物信息学分析第40-41页
   ·对膜细胞中ANXA2基因过表达的研究第41-44页
     ·RT-PCR扩增ANXA2基因的编码区第41页
     ·过表达载体pcDNA-ANXA2的构建第41-42页
     ·ANXA2基因过表达后VEGFA及其受体的表达变化第42-43页
     ·MTT检测过表达ANXA2基因后的膜细胞增殖变化第43-44页
第四章 讨论第44-46页
第五章 结论第46-47页
附录:缩略语索引第47-48页
参考文献第48-52页
硕士期间发表的学术论文及专利第52-53页
致谢第53页

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