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microRNA的电化学检测方法的建立及其应用的研究

符号说明第1-10页
中文摘要第10-13页
Abstract第13-16页
1 前言第16-26页
   ·表观遗传学第16页
     ·表观遗传学概述第16页
     ·表观遗传学研究内容第16页
   ·microRNA概述第16-17页
   ·miRNA检测技术第17-19页
     ·Northern blotting法第17-18页
     ·实时荧光定量PCR法第18页
     ·微阵列芯片法第18-19页
     ·原位杂交法第19页
   ·电化学生物传感器第19-22页
     ·基于纳米材料的电化学生物传感器第19-20页
       ·纳米粒子基电化学生物传感器第19-20页
       ·纳米线基电化学生物传感器第20页
     ·基于酶的信号放大反应的电化学生物传感器第20-21页
     ·基于电活性复合物的电化学生物传感器第21-22页
     ·基于电催化氧化鸟嘌呤的电化学生物传感器第22页
   ·光电化学传感器第22-23页
   ·本课题的提出以及主要研究内容第23-26页
2 材料与方法第26-42页
   ·仪器与试剂第26-30页
     ·仪器第26-27页
     ·试剂第27-29页
     ·实验中主要缓冲溶液的配置第29-30页
   ·试验方法第30-42页
     ·信号“开”模式的光电化学生物传感器检测miRNA-21第30-33页
       ·Au纳米粒子的制备第30页
       ·生物条码的制备第30页
       ·硫化铋的制备及表征第30页
       ·ITO电极预处理第30-31页
       ·生物传感器的制备第31-32页
       ·光电化学信号检测第32页
       ·miRNA生物传感器的选择性第32页
       ·miRNA生物传感器稳定性检测第32-33页
       ·感染禽白血病的鸡细胞中miRNA-21表达量的检测第33页
     ·基于T7核酸外切酶辅助酶循环扩增法检测miRNA-21第33-35页
       ·电极预处理第33页
       ·电沉积纳米金第33-34页
       ·探针DNA的固定第34页
       ·miRNA的杂交第34页
       ·酶切第34页
       ·电化学信号检测第34页
       ·miRNA生物传感器选择性检测第34页
       ·感染禽白血病鸡细胞中miRNA-21的表达量检测第34-35页
     ·基于Anti-DNA:RNA抗体超灵敏检测miRNA-319a第35-37页
       ·玻碳电极的预处理第35页
       ·纳米金修饰电极(AuNPs/GCE)的制备第35页
       ·探针DNA的固定第35-36页
       ·miRNA的杂交第36页
       ·抗体S9.6 的修饰第36页
       ·IgG-ALP的固定第36页
       ·电化学信号检测第36页
       ·特异性检测第36-37页
       ·实际样品中miRNA-319a含量检测第37页
     ·信号“关”模式的光电化学传感器检测miRNA-159a第37-39页
       ·AuNPs和Bi2S3的制备以及ITO电极的预处理第37-38页
       ·固定Bi2S3和AuNPs纳米粒子第38页
       ·探针DNA固定第38页
       ·目标miRNA杂交第38页
       ·固定链霉亲和素第38页
       ·光电化学检测第38-39页
       ·miRNA生物传感器的选择性第39页
       ·miRNA生物传感器稳定性检测第39页
       ·脱落酸对拟南芥种子中miRNA-159a表达量的检测第39页
     ·基于缺铁蛋白包铜纳米粒超灵敏检测miRNA-159a第39-42页
       ·缺铁蛋白包铜纳米粒子的合成第39-40页
       ·Au电极预处理第40页
       ·电沉积纳米金第40页
       ·探针DNA的固定第40页
       ·与miRNA、DNA杂交第40-41页
       ·固定缺铁蛋白包铜纳米粒子第41页
       ·电化学信号检测第41页
       ·miRNA生物传感器选择性检测第41页
       ·脱落酸对拟南芥种子中miRNA-159a表达量的检测第41-42页
3. 结果与分析第42-65页
   ·信号“开”模式的光电化学生物传感器检测miRNA-21第42-47页
     ·硫化铋的表征第42页
     ·不同修饰电极的光电化学行为第42-43页
     ·条件优化第43-44页
     ·miRNA-21的检测性能第44-46页
     ·禽白血病病变组织细胞中mi RNA-21表达量的检测第46-47页
   ·基于T7核酸外切酶辅助酶循环扩增法检测miRNA第47-51页
     ·不同修饰电极的电化学交流阻抗表征第47-48页
     ·实验可行性分析第48-49页
     ·条件优化第49页
     ·标准曲线的测定第49-50页
     ·传感器的选择性第50页
     ·禽白血病病变组织细胞中mi RNA-21表达量的检测第50-51页
   ·基于Anti-DNA:RNA抗体超灵敏检测miRNA-319a第51-54页
     ·实验可行性分析第51-52页
     ·条件优化第52-53页
     ·标准曲线的绘制和传感器选择性研究第53-54页
     ·水稻幼苗中miRNA-319a相对表达量的检测第54页
   ·信号“关”模式的光电化学传感器检测miRNA-159a第54-59页
     ·Bi2S3和AuNPs纳米粒子的表征第54-55页
     ·实验可行性研究第55-56页
     ·条件优化第56-57页
     ·mi RNA-159a的检测性能第57-59页
     ·样品检测第59页
   ·基于缺铁蛋白包铜纳米粒超灵敏检测miRNA第59-65页
     ·铁蛋白包铜纳米粒子的表征第59-60页
     ·生物传感器的表征第60-61页
     ·miRNA杂交时间和Cu-apoferritin固定时间的优化第61-62页
     ·标准曲线第62-63页
     ·生物传感器特异性研究第63页
     ·脱落酸对拟南芥种子中miRNA-159a表达量的检测第63-65页
4 讨论第65-71页
   ·信号“开”模式的光电化学生物传感器检测mi RNA-21第65-66页
   ·基于T7核酸外切酶辅助酶循环扩增法检测miRNA第66-67页
   ·基于Anti-DNA:RNA抗体超灵敏检测miRNA-319a第67页
   ·信号“关”模式的光电化学传感器检测miRNA-159a第67-68页
   ·基于缺铁蛋白包铜纳米粒超灵敏检测miRNA第68-71页
5. 结论第71-73页
   ·信号“开”模式的光电化学生物传感器检测miRNA-21第71页
   ·基于T7核酸外切酶辅助酶循环扩增法检测miRNA第71页
   ·基于Anti-DNA:RNA抗体超灵敏检测miRNA-319a第71页
   ·信号“关”模式的光电化学传感器检测miRNA-159a第71-72页
   ·基于缺铁蛋白包铜纳米粒超灵敏检测miRNA第72-73页
6 创新之处第73-74页
7 参考文献第74-83页
8 致谢第83-84页
9 攻读学位期间发表论文情况第84-85页

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