| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-9页 |
| 缩略表 | 第9-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-18页 |
| ·棉花黄萎病及其致病真菌大丽轮枝菌概述 | 第10-11页 |
| ·棉花黄萎病的症状及大丽轮枝菌的侵染过程 | 第10-11页 |
| ·大丽轮枝菌致病机理的研究 | 第11页 |
| ·导管堵塞学说 | 第11页 |
| ·毒素学说 | 第11页 |
| ·大丽轮枝菌功能基因研究进展 | 第11-13页 |
| ·真菌中几丁质代谢相关的几丁质合成酶和聚多糖脱乙酰化酶 | 第13-17页 |
| ·几丁质与真菌细胞壁的基本成分与结构 | 第13-14页 |
| ·几丁质合成酶的研究现状 | 第14-15页 |
| ·聚多糖脱乙酰酶的研究现状 | 第15-17页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第17-18页 |
| 第二章 棉花黄萎病菌T-DNA插入突变体库的筛选及VdpdaA家族基因的确定 | 第18-29页 |
| ·材料和方法 | 第18-26页 |
| ·供试菌株、质粒及其棉花品种 | 第18-19页 |
| ·常规试剂及其相关抗生素的配置 | 第19页 |
| ·大肠杆菌超级感受态细胞的制备及热击转化 | 第19页 |
| ·大丽轮枝菌的培养及其DNA的提取 | 第19-20页 |
| ·RNA的提取及Northern杂交分析 | 第20-21页 |
| ·Southern印迹杂交 | 第21-23页 |
| ·TAIL-PCR确定目标基因 | 第23-25页 |
| ·致病性测定 | 第25-26页 |
| ·结果与分析 | 第26-27页 |
| ·T-DNA插入突变体致病性鉴定 | 第26-27页 |
| ·突变体基因组中T-DNA插入拷贝数分析 | 第27页 |
| ·T-DNA插入突变体中目标基因的确定及克隆 | 第27页 |
| ·结论与讨论 | 第27-29页 |
| ·结论 | 第27-28页 |
| ·讨论 | 第28-29页 |
| 第三章 聚多糖脱乙酰酶家族基因VdpdaAs在大丽轮枝菌中的功能分析 | 第29-45页 |
| ·材料和方法 | 第29-38页 |
| ·供试菌株、质粒及其棉花品种 | 第29-30页 |
| ·常规试剂及其相关抗生素的配置 | 第30-31页 |
| ·农杆菌感受态细胞的制备及其电击转化 | 第31页 |
| ·敲除载体的构建 | 第31-33页 |
| ·农杆菌介导的遗传转化 | 第33-34页 |
| ·大丽轮枝菌敲除体的筛选及其验证 | 第34-35页 |
| ·VdpdaA基因家族氨基酸序列的多重比较 | 第35页 |
| ·敲除体生物学性状的观察与测定 | 第35-36页 |
| ·RNA的提取以及目标基因在野生型菌株V592中的表达分析 | 第36页 |
| ·互补载体的构建 | 第36-37页 |
| ·敲除体和互补体的致病性鉴定 | 第37-38页 |
| ·结果与分析 | 第38-43页 |
| ·VdpdaA1、VdpdaA2和VdpdaA3与其他真菌PDA家族基因的氨基酸序列比对 | 第38页 |
| ·目标基因在野生型V592中的表达分析 | 第38-39页 |
| ·目标基因敲除突变体的验证 | 第39-40页 |
| ·突变体△VdpdaA1、△Vdpda A2、△Vdpda A3的表型观察 | 第40页 |
| ·敲除突变体菌落生长速度和分生孢子大小的比较 | 第40-41页 |
| ·突变体产孢量和孢子萌发率的测定 | 第41-42页 |
| ·突变体分生孢子萌发的观察 | 第42页 |
| ·突变体的致病性测定 | 第42-43页 |
| ·结论与讨论 | 第43-45页 |
| ·结论 | 第43-44页 |
| ·讨论 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-51页 |
| 附录1常用试剂及培养基的配置 | 第51-52页 |
| 附录2本试验中所涉及到的引物 | 第52-53页 |
| 致谢 | 第53-54页 |
| 作者简介 | 第54-55页 |
| 导师评阅表 | 第55页 |
