| 摘要 | 第1-10页 |
| ABSTRACT | 第10-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-23页 |
| ·杆状病毒概况 | 第13-14页 |
| ·杆状病毒的分类 | 第13页 |
| ·杆状病毒的生活周期 | 第13-14页 |
| ·家蚕核型多角体病毒 | 第14-18页 |
| ·家蚕核型多角体病毒简介 | 第14页 |
| ·家蚕核型多角体病毒基因的级联调控 | 第14-15页 |
| ·家蚕核型多角体病毒增殖复制相关的基因研究 | 第15-18页 |
| ·RNAi技术概况 | 第18-21页 |
| ·RNAi作用机制 | 第19页 |
| ·RNAi的特点 | 第19-20页 |
| ·miRNA概述 | 第20页 |
| ·miRNA和siRNA的比较 | 第20-21页 |
| ·启动子的研究 | 第21-23页 |
| ·启动子的分类 | 第21页 |
| ·影响启动子活性的因素 | 第21-23页 |
| 第二章 引言 | 第23-27页 |
| ·研究背景 | 第23页 |
| ·研究的目的和意义 | 第23-24页 |
| ·主要研究内容 | 第24-25页 |
| ·研究的技术路线 | 第25-27页 |
| 第三章 BmNPV增殖复制相关基因的筛选与克隆 | 第27-41页 |
| ·实验材料和试剂 | 第27-29页 |
| ·实验材料 | 第27页 |
| ·主要仪器 | 第27-28页 |
| ·主要试剂 | 第28页 |
| ·主要溶液及配置 | 第28-29页 |
| ·实验方法 | 第29-35页 |
| ·BmNPV基因组DNA的提取 | 第32页 |
| ·BV病毒的收集 | 第32-33页 |
| ·目的片段的PCR扩增 | 第33页 |
| ·PCR产物回收 | 第33-34页 |
| ·目的片段与PMD19-T载体的连接 | 第34页 |
| ·连接产物的转化 | 第34页 |
| ·阳性克隆的筛选 | 第34页 |
| ·测序验证 | 第34-35页 |
| ·结果与分析 | 第35-38页 |
| ·BmNPV增殖复制相关基因的筛选依据 | 第35-36页 |
| ·增殖复制相关基因的克隆 | 第36-37页 |
| ·确定候选基因 | 第37-38页 |
| ·讨论 | 第38-41页 |
| 第四章 候选基因对BmNPV在细胞水平增殖复制的影响 | 第41-57页 |
| ·实验材料和试剂 | 第41页 |
| ·实验材料 | 第41页 |
| ·主要仪器 | 第41页 |
| ·主要试剂 | 第41页 |
| ·主要溶液及配置 | 第41页 |
| ·实验方法 | 第41-50页 |
| ·荧光素酶报告载体的构建 | 第42-46页 |
| ·干涉载体的构建 | 第46-47页 |
| ·内参载体的构建 | 第47-48页 |
| ·超纯质粒的提取 | 第48-49页 |
| ·铺制细胞平板 | 第49页 |
| ·细胞转染 | 第49页 |
| ·荧光素酶活性检测 | 第49-50页 |
| ·结果与分析 | 第50-55页 |
| ·荧光素酶报告载体、干涉载体的构建 | 第50-52页 |
| ·荧光素酶报告载体有效性的检测 | 第52-53页 |
| ·干涉效率的酶活测定结果 | 第53-54页 |
| ·干涉载体对病毒增殖复制的影响 | 第54-55页 |
| ·讨论 | 第55-57页 |
| 第五章 不同启动子驱动的同一干涉载体对BmNPV在细胞水平增殖复制的影响 | 第57-67页 |
| ·实验材料和试剂 | 第57页 |
| ·实验材料 | 第57页 |
| ·主要仪器 | 第57页 |
| ·主要试剂 | 第57页 |
| ·主要溶液及配置 | 第57页 |
| ·实验方法 | 第57-60页 |
| ·不同启动子驱动的pGL3-Basic载体的构建 | 第57-59页 |
| ·不同启动子驱动的pIZ-DsRed-TAA-milef11的构建 | 第59页 |
| ·超纯质粒的提取 | 第59页 |
| ·铺制细胞平板 | 第59页 |
| ·细胞转染 | 第59页 |
| ·启动子活性检测 | 第59-60页 |
| ·结果与分析 | 第60-64页 |
| ·不同启动子驱动的pGL3-Basic载体与pIZ-DsRed-TAA-milef11干涉载体的构建与鉴定 | 第60-62页 |
| ·干涉效率的酶活测定 | 第62-63页 |
| ·干涉载体对病毒增殖复制的影响 | 第63-64页 |
| ·讨论 | 第64-67页 |
| 第六章 结论 | 第67-69页 |
| 参考文献 | 第69-77页 |
| 附录 | 第77-79页 |
| 在读期间发表文章及参研课题情况 | 第79-81页 |
| 致谢 | 第81页 |
