| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-13页 |
| 全文英语缩写 | 第13-14页 |
| 前言 | 第14-16页 |
| 第一章 文献综述 | 第16-27页 |
| 1 金黄色葡萄球菌表面多糖 | 第16-19页 |
| ·金黄色葡萄球菌荚膜多糖血清型分型 | 第16-17页 |
| ·表面多糖的表达与调控 | 第17-19页 |
| ·多糖的纯化 | 第19页 |
| 2 表面多糖偶联抗原的制备 | 第19-22页 |
| ·偶联载体的选择 | 第19-20页 |
| ·偶联方法 | 第20-21页 |
| ·多糖-蛋白偶联抗原的鉴定 | 第21-22页 |
| ·现有偶联疫苗研究概况 | 第22页 |
| 3 金黄色葡萄球菌感染的免疫与防治 | 第22-27页 |
| ·全菌疫苗 | 第23页 |
| ·亚单位疫苗 | 第23-25页 |
| ·病毒载体疫苗 | 第25页 |
| ·DNA疫苗 | 第25页 |
| ·基因缺失苗 | 第25-27页 |
| 第二章 实验研究 | 第27-78页 |
| 实验一 CP5、CP8和336PS表面多糖的提取与纯化 | 第27-36页 |
| 1 实验材料 | 第27-28页 |
| ·主要仪器 | 第27页 |
| ·试剂 | 第27页 |
| ·菌株及抗血清 | 第27-28页 |
| 2 实验方法 | 第28-30页 |
| ·金黄色葡萄球菌表面多糖的提取与纯化 | 第28-29页 |
| ·CP5、CP8和336PS的化学检定 | 第29-30页 |
| ·反应原性检测 | 第30页 |
| 3 结果 | 第30-33页 |
| 4 讨论 | 第33-36页 |
| 实验二 CP5、CP8和336PS表面多糖与BSA偶联抗原的制备及其免疫原性研究 | 第36-53页 |
| 1 实验材料 | 第36-37页 |
| ·主要仪器 | 第36页 |
| ·试剂 | 第36页 |
| ·主要溶液的配制 | 第36-37页 |
| ·实验动物 | 第37页 |
| 2 实验方法 | 第37-39页 |
| ·pH值对多糖反应原性稳定性的检测 | 第37页 |
| ·CP5、CP8和336PS表面多糖-牛血清白蛋白偶联抗原的制备 | 第37-38页 |
| ·多糖-蛋白质偶联抗原的凝胶过滤层析纯化 | 第38页 |
| ·多糖-BSA偶联抗原的鉴定 | 第38页 |
| ·动物免疫试验 | 第38页 |
| ·间接ELISA对多糖抗体的测定 | 第38-39页 |
| ·小鼠攻毒保护实验 | 第39页 |
| 3. 结果 | 第39-50页 |
| 4. 讨论 | 第50-53页 |
| 实验三 基因工程技术制备绿脓杆菌外毒素A | 第53-71页 |
| 1 实验材料 | 第53-55页 |
| ·仪器设备 | 第53页 |
| ·菌种和质粒 | 第53页 |
| ·主要试剂 | 第53-54页 |
| ·溶液的配制 | 第54-55页 |
| ·引物 | 第55页 |
| ·抗绿脓杆菌血清 | 第55页 |
| 2 实验方法 | 第55-60页 |
| ·绿脓杆菌外毒素A基因(ETA)的克隆 | 第55-56页 |
| ·重组表达载体的构建 | 第56-57页 |
| ·重组质粒的诱导表达及Western-blotting鉴定 | 第57页 |
| ·最佳诱导表达条件的选择 | 第57-58页 |
| ·rEPA的大量表达 | 第58页 |
| ·rEPA的变性与纯化 | 第58-59页 |
| ·rEPA的复性条件的筛选 | 第59-60页 |
| ·重组包涵体蛋白柱上复性 | 第60页 |
| 3 结果 | 第60-68页 |
| 4 讨论 | 第68-71页 |
| 实验四 CP5、CP8、336PS与REPA偶联抗原制备及其免疫原性分析 | 第71-78页 |
| 1 实验材料 | 第71-72页 |
| ·主要仪器 | 第71页 |
| ·试剂 | 第71页 |
| ·主要溶液的配制 | 第71页 |
| ·实验动物 | 第71-72页 |
| 2 实验方法 | 第72页 |
| ·CP5、CP8和336PS表面多糖-rEPA偶联抗原的制备 | 第72页 |
| ·多糖-蛋白质偶联抗原的凝胶过滤层析纯化 | 第72页 |
| ·动物免疫试验 | 第72页 |
| ·清平板凝集实验 | 第72页 |
| 3 结果 | 第72-76页 |
| 4 讨论 | 第76-78页 |
| 第三章 全文结论及创新点 | 第78-80页 |
| 1 全文结论 | 第78页 |
| 2 展望 | 第78-79页 |
| 3 创新点 | 第79-80页 |
| 全文参考文献 | 第80-89页 |
| 附录 | 第89-94页 |
| 致谢 | 第94-95页 |
| 作者简介 | 第95-96页 |
| 导师评阅表 | 第96页 |
