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薇甘菊MmZFP1和MmTLPs在病害、干旱胁迫响应中的功能及调控研究

摘要第1-4页
Abstract第4-6页
缩写词第6-7页
目录第7-10页
第一章 绪论第10-27页
   ·研究意义第10-11页
   ·国内外研究现状第11-26页
     ·入侵植物-薇甘菊的研究进展第11-15页
     ·植物C_2H_2型锌指蛋白的研究进展第15-19页
     ·类甜蛋白研究进展第19-24页
     ·植物抗病机制研究进展第24-26页
   ·研究内容和方法第26-27页
     ·研究内容第26页
     ·研究方法和技术路线第26-27页
第二章 薇甘菊MmZFP1在病害、干旱胁迫响应中的功能及调控研究第27-63页
   ·引言第27页
   ·材料与方法第27-42页
     ·植物材料第27页
     ·培养基第27-28页
     ·病原菌材料第28页
     ·MmZFP1基因的克隆第28-34页
     ·PCR产物的回收、克隆及测序第34-35页
     ·MmZFP1的序列比对及进化树分析第35页
     ·植物表达载体的构建第35-36页
     ·MmZFP1的亚细胞定位第36-37页
     ·薇甘菊的生物与非生物胁迫处理第37-38页
     ·根癌农杆菌介导转化拟南芥第38-39页
     ·Real-time PCR检测基因表达量第39-41页
     ·转基因拟南芥的细胞凋亡现象的观察第41页
     ·转基因拟南芥抗病、耐旱性分析第41-42页
   ·结果第42-60页
     ·MmZFP1基因的克隆第42-43页
     ·MmZFP1的序列分析第43-44页
     ·MmZFP1的进化树分析第44-46页
     ·MmZFP1的表达特征分析第46-48页
     ·植物表达载体的构建及转基因拟南芥的筛选、鉴定第48-49页
     ·MmZFP1的亚细胞定位第49-50页
     ·MmZFP1对转基因植株生长发育的影响第50-52页
     ·转MmZFP1基因植物的细胞程序性死亡检测第52-53页
     ·转MmZFP1基因拟南芥防卫基因的表达分析第53-54页
     ·MmZFP1的表达调控对病原菌Pst.DC3000的抗性第54-55页
     ·转MmZFP1基因拟南芥抗棉花黄萎病第55-57页
     ·转MmZFP1基因拟南芥的失水率实验第57页
     ·转MmZFP1基因拟南芥的干旱胁迫实验第57-58页
     ·MmZFP1正调控抗逆相关基因第58-60页
   ·讨论第60-63页
第三章 薇甘菊MmTLPs在病害、干旱胁迫响应中的功能研究第63-104页
   ·引言第63页
   ·材料与方法第63-70页
     ·植物和病原菌材料第63页
     ·薇甘菊种子总蛋白的提取第63页
     ·薇甘菊种子抗菌活性蛋白组分的获得第63-64页
     ·MmTLP1和MmTLP2的克隆第64-65页
     ·MmTLP1和MmTLP2的序列比对及进化树分析第65页
     ·原核表达载体的构建第65-66页
     ·pET-32a-MmTLP1和pET-32a-MmTLP2的原核表达第66页
     ·pCold-MmTLP1和pCold-MmTLP2的原核表达第66-67页
     ·十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)第67页
     ·MmTLP1和MmTLP2的三维结构预测第67-68页
     ·植物表达载体的构建第68页
     ·MmTLP1和MmTLP2的亚细胞定位第68页
     ·薇甘菊的生物与非生物胁迫处理第68页
     ·根癌农杆菌介导转化拟南芥第68-69页
     ·转基因拟南芥的筛选鉴定第69页
     ·Real-time PCR检测基因表达量第69页
     ·转基因拟南芥抗病性分析第69页
     ·转基因拟南芥耐旱性分析第69-70页
     ·转基因拟南芥耐盐性分析第70页
   ·结果第70-101页
     ·薇甘菊抑菌蛋白的分离和鉴定第70-71页
     ·MmTLP1基因的克隆第71-73页
     ·MmTLP2基因的克隆第73-76页
     ·MmTLP1和MmTLP2序列比对和分析第76-77页
     ·MmTLP1和MmTLP2的进化树分析第77-78页
     ·MmTLP1和MmTLP2的组织表达特异性第78页
     ·MmTLP1和MmTLP2在薇甘菊中的表达特征分析第78-81页
     ·MmTLP1和MmTLP2的亚细胞定位第81-83页
     ·pET-22b-MmTLP1和pET-22b-MmTLP2原核表达载体的构建及转化第83-84页
     ·pCold-MmTLP1和pCold-MmTLP2原核表达载体的构建及转化第84-85页
     ·pET-32a-MmTLP1和pET-32a-MmTLP2原核表达载体的构建及转化第85-87页
     ·pET-22b-MmTLP1和pET-22b-MmTLP2的原核表达第87-90页
     ·pCold-MmTLP1和pCold-MmTLP2的原核表达第90-91页
     ·pET-32a-MmTLP1和pET-32a-MmTLP2的原核表达第91-92页
     ·重组MmTLP1和重组MmTLP2抑菌活性检测第92-93页
     ·MmTLP1和MmTLP2蛋白的抗菌机制分析第93-94页
     ·MmTLP1转基因株系的获得第94-95页
     ·MmTLP2转基因株系的获得第95-97页
     ·转基因株系目的基因表达量的检测第97-98页
     ·转MmTLP1和MmTLP2基因拟南芥抗棉花黄萎病实验第98-99页
     ·转MmTLP1和MmTLP2基因拟南芥的干旱胁迫试验第99-100页
     ·转MmTLP1和MmTLP2基因拟南芥的失水率测试第100页
     ·转MmTLP1和MmTLP2基因拟南芥的盐胁迫实验第100-101页
   ·讨论第101-104页
第四章 结论第104-107页
   ·薇甘菊MmZFP1在病害、干旱胁迫响应中的功能及调控研究第104-105页
   ·薇甘菊MmTLPs在病害、干旱胁迫响应中的功能研究第105-106页
   ·创新点第106-107页
参考文献第107-120页
致谢第120-122页
作者简介第122页

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