| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 英文缩略语 | 第10-12页 |
| 前言 | 第12-19页 |
| 第一部分 染色体整合技术提高酿酒酵母中顺,顺-己二烯二酸的产量 | 第19-46页 |
| 实验材料与仪器 | 第19-26页 |
| 1. 菌株 | 第19页 |
| 2. 质粒 | 第19页 |
| 3. 培养基 | 第19-21页 |
| 4. 主要试剂 | 第21-23页 |
| 5. 主要试剂的配制 | 第23-24页 |
| 6. 试剂盒 | 第24页 |
| 7. 主要仪器 | 第24-26页 |
| 实验方法 | 第26-36页 |
| 1. AroY+PGK1p+KanMX整合基因的构建 | 第26-29页 |
| 2. AroY+PGK1p+KanMX基因整合至酿酒酵母基因组上 | 第29-30页 |
| 3. 测定染色体上整合的AroY基因拷贝数 | 第30页 |
| 4. 测定AroY+PGK1p+KanMX整合后MA的产量 | 第30-32页 |
| 5. 第二轮AroY+PGK1+KanMX基因整合 | 第32页 |
| 6. AroY+TEF30+KanMX整合基因的构建 | 第32-33页 |
| 7. AroY+TEF30+KanMX基因整合至酿酒酵母基因组上 | 第33页 |
| 8. 测定AroY+TEF30+KanMX基因整合拷贝数 | 第33-34页 |
| 9. 测定AroY+TEF30+KanMX整合后MA的产量 | 第34页 |
| 10. 移除KanMX基因 | 第34-35页 |
| 11. 第二轮AroY+TEF30+KanMX基因整合 | 第35页 |
| 12. 第二轮AroY+TEF30+KanMX基因整合拷贝数测定 | 第35页 |
| 13. 第二轮AroY+TEF30+KanMX基因整合后MA产量测定 | 第35-36页 |
| 实验结果 | 第36-46页 |
| 1. AroY+PGK1p+KanMX整合基因构建 | 第36-38页 |
| 2. AroY+PGK1p+KanMX整合后AroY拷贝数 | 第38页 |
| 3. AroY+PGK1p+KanMX整合后MA的产量 | 第38-39页 |
| 4. 第二轮AroY+PGKl+KanMX基因整合 | 第39-40页 |
| 5. AroY+TEF30+KanMX整合基因构建 | 第40页 |
| 6. AroY+TEF30+KanMX整合后AroY的拷贝数 | 第40-42页 |
| 8. 移除KanMX基因 | 第42-44页 |
| 9. AroY+TEF30+KanMX第二轮整合后AroY的拷贝数 | 第44页 |
| 10. AroY+TEF30+KanMX第二轮整合后MA的产量 | 第44-46页 |
| 第二部分 Albomycin中铁色素的生物合成 | 第46-60页 |
| 实验材料与仪器 | 第46-50页 |
| 1. 菌株 | 第46页 |
| 2. 质粒 | 第46-47页 |
| 3. 培养基 | 第47-48页 |
| 4. 主要试剂 | 第48页 |
| 5. 常用试剂配制 | 第48页 |
| 6.试剂盒 | 第48-49页 |
| 7.主要仪器 | 第49-50页 |
| 实验方法 | 第50-55页 |
| 1. 铁色素生物合成路径的构建 | 第50-53页 |
| 2. 已构建质粒接合转移至S.lividans | 第53-55页 |
| 实验结果 | 第55-60页 |
| 1. 铁色素生物合成路径的构建 | 第55-59页 |
| 2. 接合转移至S.lividans TK64 | 第59-60页 |
| 第三部分 D(-)-对羟基苯甘氨酸一步酶法合成的实现及其生物固定化策略 | 第60-80页 |
| 实验材料与仪器 | 第60-65页 |
| 1. 菌株 | 第60页 |
| 2. 质粒 | 第60页 |
| 3. 培养基 | 第60-61页 |
| 4. 主要试剂 | 第61页 |
| 5. 常用试剂配制 | 第61-63页 |
| 6. 试剂盒 | 第63-64页 |
| 7. 主要仪器 | 第64-65页 |
| 实验方法 | 第65-72页 |
| 1. 质粒构建 | 第65-66页 |
| 2. 蛋白表达与纯化 | 第66-68页 |
| 3. 纯化蛋白SDS-PAGE电泳检测 | 第68-69页 |
| 4. 融合蛋白活性检测 | 第69页 |
| 5. 融合蛋白固定化 | 第69-70页 |
| 6. 不同pH值对固定化酶和游离酶的影响 | 第70页 |
| 7. D-case酶的优化 | 第70-72页 |
| 实验结果 | 第72-80页 |
| 1. 质粒构建 | 第72-74页 |
| 2. 蛋白表达与纯化 | 第74页 |
| 3. 纯化蛋白SDS-PAGE电泳检测 | 第74-75页 |
| 4. 融合蛋白活性测定 | 第75-76页 |
| 5. 融合蛋白固定化 | 第76页 |
| 6. 不同pH值对固定化酶和游离酶的影响 | 第76-78页 |
| 7. D-case酶的优化 | 第78-80页 |
| 参考文献 | 第80-89页 |
| 全文总结 | 第89-90页 |
| 文献综述 | 第90-103页 |
| 参考文献 | 第99-103页 |
| 致谢 | 第103-104页 |
