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β-catenin siRNA阻断Wnt/β-catenin信号通路对肾小管上皮细胞转分化的调控机制研究

缩略词表第1-6页
中文摘要第6-8页
Abstract第8-11页
前言第11-13页
第一部分 β-catenin siRNA慢病毒载体制备第13-32页
 前言第13页
 1 材料与方法第13-21页
   ·实验材料第13-15页
   ·实验方法第15-21页
 2 结果第21-32页
   ·表达Ctnnb1丰度较高的肾细胞第21-23页
   ·酶切慢病毒载体鉴定第23页
   ·双酶切线性化的载体和DNA片段连接后的PCR鉴定第23-24页
   ·测序鉴定结果第24-25页
   ·不同靶点分别感染 293T细胞后滴度测定(荧光法)第25-26页
   ·PCR內源筛选有效靶点第26-29页
   ·RNAi有效靶点慢病毒大量包装及RT-PCR再次验证第29-32页
第二部分 β-catenin siRNA对EMT的影响第32-53页
 前言第32页
 1 材料与方法第32-44页
   ·实验材料第32-36页
   ·实验方法第36-44页
 2 结果第44-53页
   ·造模后肾脏外观第44页
   ·冰冻切片第44-45页
   ·大鼠肾皮质病理HE及Masson染色第45-47页
   ·免疫组织化学检测肾小管上皮细胞目的蛋白表达情况第47-48页
   ·Western blot检测梗阻侧肾皮质目的蛋白相对表达量第48-50页
   ·RT-PCR检测梗阻侧肾皮质目的基因mRNA表达第50-53页
讨论第53-58页
结论第58-59页
参考文献第59-64页
综述第64-72页
 参考文献第69-72页
致谢第72页

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