| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-11页 |
| 第一章 前言 | 第11-26页 |
| ·缺氧性肺动脉高压(hypoxic pulmonary artery hypertension，HPH) | 第11-12页 |
| ·肺动脉平滑肌细胞 | 第12-13页 |
| ·微小RNA（microRNA，mi RNA） | 第13-14页 |
| ·miRNA的生物合成机制及生物功能 | 第13-14页 |
| ·miRNA与PH的形成密切相关 | 第14-18页 |
| ·miR-145 与PH | 第15-16页 |
| ·miR1792 与PH | 第16-17页 |
| ·miR-21 与PH | 第17-18页 |
| ·miRNA与PH的诊断和治疗 | 第18-19页 |
| ·PKG 1 的概述 | 第19-24页 |
| ·PKG1 表达调控 | 第19-21页 |
| ·PKG1 调节平滑肌细胞的舒张 | 第21-23页 |
| ·PKG1 调节平滑肌细胞表型的转化 | 第23-24页 |
| ·本文的研究内容和意义 | 第24-26页 |
| 第二章 实验材料和方法 | 第26-45页 |
| ·实验材料 | 第26-28页 |
| ·主要试剂的配置 | 第27-28页 |
| ·仪器 | 第28-29页 |
| ·分子实验仪器 | 第28页 |
| ·细胞培养仪器 | 第28-29页 |
| ·蛋白质检测仪器 | 第29页 |
| ·其他仪器 | 第29页 |
| ·实验方法 | 第29-45页 |
| ·载体的构建 | 第29-32页 |
| ·细胞培养 | 第32页 |
| ·慢病毒包装 | 第32-34页 |
| ·双荧光素酶活性实验 | 第34-35页 |
| ·免疫细胞化学实验 | 第35-36页 |
| ·细胞功能实验 | 第36-37页 |
| ·Real-time PCR | 第37-42页 |
| ·Western blots检测蛋白水平的变 | 第42-45页 |
| ·先天性心脏病相关肺动脉高压病人血清样本收集 | 第45页 |
| ·实验数据统计处理 | 第45页 |
| 第三章 结果与分析 | 第45-62页 |
| ·miR-20a在低氧诱导的HPH小鼠模型的肺组织及肺动脉中表达上调 | 第45-46页 |
| ·miR-20a在缺氧的HPASMC中表达上调 | 第46-47页 |
| ·miR-20a对HPASMC功能的影响 | 第47-53页 |
| ·miR-20a促进HPASMC的增殖 | 第47-49页 |
| ·miR-20a促进HPASMC的迁移 | 第49-51页 |
| ·miR-20a抑制HPASMC收缩表型蛋白的表达 | 第51-53页 |
| ·PKG1 在缺氧诱导的HPASMC中表达下调 | 第53页 |
| ·miR-20a抑制PKG1 的表达 | 第53-55页 |
| ·miR-20a通过靶向PKG1 编码区调控其表达 | 第55-58页 |
| ·双荧光素酶报告分析miR-20a对PKG1 的 3’-UTR活性的影响 | 第55页 |
| ·双荧光素酶报告分析miR-20a对PKG1 启动子活性的影响 | 第55-56页 |
| ·位点突变实验证明miR-20a靶向PKG1 的编码区 | 第56-58页 |
| ·PKG1 对HPASMC功能的影响 | 第58-61页 |
| ·PKG1 抑制HPASMC的增殖 | 第58-59页 |
| ·PKG1 抑制HPASMC的迁移 | 第59-60页 |
| ·PKG1 促进HPASMC表型蛋白的表达 | 第60-61页 |
| ·miR-20a在CHD-PAH患者血清中表达上调 | 第61-62页 |
| 第四章 讨论 | 第62-66页 |
| ·miR-20a能促进PASMCs的增殖、迁移、去分化及肺动脉高压的形成 | 第62-64页 |
| ·miR-20a通过靶向PKG1 的编码区调控HPASMCs表型的转化 | 第64-65页 |
| ·miR-20a可能是肺动脉高压潜在的临床诊断生物标志物 | 第65-66页 |
| 第五章 结论 | 第66-67页 |
| 参考文献 | 第67-73页 |
| 致谢 | 第73-74页 |
| 攻读硕士期间的研究成果 | 第74-75页 |
