摘要 | 第1-6页 |
ABSTRACT | 第6-11页 |
第1章 引言 | 第11-13页 |
第2章 材料与方法 | 第13-31页 |
·材料 | 第13-19页 |
·细胞株 | 第13页 |
·购置试剂 | 第13-14页 |
·自配试剂 | 第14-17页 |
·主要仪器设备及耗材 | 第17-19页 |
·方法 | 第19-30页 |
·细胞培养 | 第19-20页 |
·建立AngⅡ促血管平滑肌细胞增殖模型 | 第20-21页 |
·DCFH-DA探针测定细胞ROS水平 | 第21页 |
·SOCS1-siRNA的设计、合成及筛选 | 第21-23页 |
·血管平滑肌细胞的转染及AngⅡ作用 | 第23-24页 |
·MTT法测定细胞活力 | 第24页 |
·流式细胞仪检测细胞凋亡率 | 第24页 |
·荧光定量PCR(qPCR)法检测SOCS1的表达 | 第24-27页 |
·Western-blot检测SOCS1、Bax、Bcl2、总Akt、p-Akt(Ser473)蛋白的表达 | 第27-30页 |
·活性氧的检测 | 第30页 |
·统计学处理 | 第30-31页 |
第3章 实验结果 | 第31-40页 |
·脐动脉血管平滑肌细胞形态 | 第31页 |
·AngⅡ对血管平滑肌细胞增殖影响 | 第31-32页 |
·AngⅡ对血管平滑肌细胞内ROS水平、SOCS1表达的影响 | 第32-33页 |
·SOCS1-siRNA的筛选 | 第33-35页 |
·转染条件的优化 | 第33页 |
·qPCR法和Western-blot分析3对SOCS1-siRNA序列对SOCS1基因表达的抑制作用 | 第33-35页 |
·SOCS1-siRNA对VSMC存活率和凋亡率的影响 | 第35-36页 |
·AngⅡ、SOCS1-si RNA及Ly294002对凋亡相关基因表达的影响 | 第36页 |
·SOCS1-siRNA对Akt信号通路的影响 | 第36-38页 |
·ROS对SOCS1-siRNA抑制AngⅡ诱导的VSMC增殖的影响 | 第38-40页 |
·SOCS1-siRNA对AngⅡ诱导的ROS生成的影响 | 第38页 |
·ROS的变化对VSMC存活率及凋亡的影响 | 第38-40页 |
第4章 讨论 | 第40-44页 |
第5章 结论与展望 | 第44-45页 |
·结论 | 第44页 |
·进一步工作的方向 | 第44-45页 |
致谢 | 第45-46页 |
参考文献 | 第46-48页 |
攻读学位期间的研究成果 | 第48-49页 |
综述 | 第49-56页 |
参考文献 | 第54-56页 |