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SOCS1介导AngⅡ促血管平滑肌细胞增殖的作用及机制

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-11页
第1章 引言第11-13页
第2章 材料与方法第13-31页
   ·材料第13-19页
     ·细胞株第13页
     ·购置试剂第13-14页
     ·自配试剂第14-17页
     ·主要仪器设备及耗材第17-19页
   ·方法第19-30页
     ·细胞培养第19-20页
     ·建立AngⅡ促血管平滑肌细胞增殖模型第20-21页
     ·DCFH-DA探针测定细胞ROS水平第21页
     ·SOCS1-siRNA的设计、合成及筛选第21-23页
     ·血管平滑肌细胞的转染及AngⅡ作用第23-24页
     ·MTT法测定细胞活力第24页
     ·流式细胞仪检测细胞凋亡率第24页
     ·荧光定量PCR(qPCR)法检测SOCS1的表达第24-27页
     ·Western-blot检测SOCS1、Bax、Bcl2、总Akt、p-Akt(Ser473)蛋白的表达第27-30页
     ·活性氧的检测第30页
     ·统计学处理第30-31页
第3章 实验结果第31-40页
   ·脐动脉血管平滑肌细胞形态第31页
   ·AngⅡ对血管平滑肌细胞增殖影响第31-32页
   ·AngⅡ对血管平滑肌细胞内ROS水平、SOCS1表达的影响第32-33页
   ·SOCS1-siRNA的筛选第33-35页
     ·转染条件的优化第33页
     ·qPCR法和Western-blot分析3对SOCS1-siRNA序列对SOCS1基因表达的抑制作用第33-35页
   ·SOCS1-siRNA对VSMC存活率和凋亡率的影响第35-36页
   ·AngⅡ、SOCS1-si RNA及Ly294002对凋亡相关基因表达的影响第36页
   ·SOCS1-siRNA对Akt信号通路的影响第36-38页
   ·ROS对SOCS1-siRNA抑制AngⅡ诱导的VSMC增殖的影响第38-40页
     ·SOCS1-siRNA对AngⅡ诱导的ROS生成的影响第38页
     ·ROS的变化对VSMC存活率及凋亡的影响第38-40页
第4章 讨论第40-44页
第5章 结论与展望第44-45页
   ·结论第44页
   ·进一步工作的方向第44-45页
致谢第45-46页
参考文献第46-48页
攻读学位期间的研究成果第48-49页
综述第49-56页
 参考文献第54-56页

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