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柠条锦鸡儿CkLEA4基因克隆及功能分析

摘要第1-4页
Abstract第4-8页
缩略语表第8-9页
1 引言第9-14页
   ·LEA蛋白研究进展第9-12页
     ·LEA蛋白的分类与性质第9-10页
     ·LEA蛋白的功能第10页
     ·LEA蛋白与植物的抗逆性第10-12页
   ·柠条锦鸡儿研究进展第12-13页
     ·柠条锦鸡儿的抗逆性第12-13页
     ·柠条锦鸡儿抗逆相关基因研究第13页
   ·研究目的和意义第13-14页
   ·技术路线第14页
2 材料和方法第14-20页
   ·实验材料第14-16页
     ·植物材料第14页
     ·菌种第14页
     ·试剂第14-15页
     ·实验仪器设备第15页
     ·引物设计第15-16页
   ·实验方法第16-20页
     ·培养基的配制第16页
     ·植物的培养与处理第16-17页
     ·植物cDNA的获得第17页
     ·感受态的制备和目的片段的转化第17页
     ·基因表达量分析第17-18页
     ·CkLE4基因cDNA全长的克隆第18-19页
     ·CkLEA4基因表达载体的构建第19-20页
     ·拟南芥的遗传转化第20页
     ·转基因植物的筛选第20页
     ·生物信息学分析第20页
3 结果与分析第20-34页
   ·CkLEA4基因的表达分析第20-22页
     ·脱水处理后CkLEA4基因表达量分析第21页
     ·NaCl处理后CkLEA4基因表达量分析第21-22页
     ·ABA处理后CkLEA4基因表达量分析第22页
   ·CkLEA4基因cDNA全长的克隆第22-23页
     ·cDNA末端快速扩增(RACE)第22页
     ·CkLEA4基因cDNA全长的克隆第22-23页
   ·生物信息学分析第23-26页
     ·CkLEA4基因cDNA序列分析第23-24页
     ·CkLEA4基因的氨基酸序列分析第24页
     ·CkLEA4蛋白亲水性分析第24页
     ·CkLEA4蛋白的二级结构第24-25页
     ·CkLEA4蛋白的系统进化树分析第25-26页
   ·CkLEA4蛋白的亚细胞定位第26-27页
     ·p35S::CkLEA4-GFP表达载体的构建第26页
     ·稳定表达p35S::CkLEA4-GFP转基因拟南芥的获得第26页
     ·激光扫描共聚焦显微镜观察CkLEA4蛋白的亚细胞定位第26-27页
   ·CkLEA4基因过表达纯合体的筛选及表达量检测第27-29页
     ·p35S::CkLEA4-HA表达载体的构建第27-28页
     ·筛选T3代转基因纯合体株系第28页
     ·CkLEA4基因过表达株系表达量检测第28-29页
   ·非生物胁迫处理下CkLEA4基因过表达株系的萌发率和子叶绿化率检测第29-34页
     ·不同浓度NaCl处理下CkLEA4基因过表达株系的萌发率第29-31页
     ·不同浓度Mannitol处理下CkLEA4基因过表达株系的萌发率第31-32页
     ·不同浓度ABA处理下CkLEA4基因过表达株系的萌发率第32-33页
     ·不同浓度ABA处理下CkLEA4基因过表达株系的子叶绿化率第33-34页
4 讨论与结论第34-37页
   ·讨论第34-36页
     ·LEA蛋白与植物的抗逆性第34-35页
     ·CkLEA4基因的克隆及表达分析第35页
     ·CkLEA4基因功能分析第35-36页
   ·结论第36-37页
致谢第37-38页
参考文献第38-43页
作者简介第43页

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