| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-8页 |
| 英文缩略表 | 第8-9页 |
| 第1章 绪论 | 第9-24页 |
| ·BVDV 的生物学特性 | 第9-10页 |
| ·BVDV 的病原学特征 | 第9页 |
| ·BVDV 的分型 | 第9-10页 |
| ·BVDV 的基因组和编码蛋白 | 第10-12页 |
| ·BVDV 的基因组结构 | 第10页 |
| ·BVDV 编码的结构蛋白 | 第10-12页 |
| ·BVDV 国内外流行现状 | 第12-13页 |
| ·国外流行现状 | 第12页 |
| ·国内流行现状 | 第12-13页 |
| ·临床症状 | 第13-14页 |
| ·检测方法 | 第14-16页 |
| ·病毒的分离鉴定 | 第14-15页 |
| ·免疫学的诊断方法 | 第15页 |
| ·血清学实验 | 第15-16页 |
| ·牛病毒性腹泻粘膜病疫苗的研究进展 | 第16-22页 |
| ·灭活疫苗 | 第16-17页 |
| ·减毒疫苗 | 第17-18页 |
| ·猪瘟兔化弱毒苗 | 第18页 |
| ·基因工程活载体疫苗 | 第18页 |
| ·亚单位疫苗 | 第18-19页 |
| ·核酸疫苗 | 第19-22页 |
| ·研究目的和意义 | 第22-24页 |
| 第2章 BVDV E2 基因真核表达载体的构建与表达 | 第24-36页 |
| ·材料 | 第24-25页 |
| ·病毒与细胞 | 第24页 |
| ·质粒与菌种 | 第24页 |
| ·主要试剂 | 第24页 |
| ·主要仪器 | 第24-25页 |
| ·方法 | 第25-30页 |
| ·BVDV E2 基因的的扩增 | 第25-26页 |
| ·BVDV E2 基因的克隆及鉴定 | 第26-27页 |
| ·真核表达质粒 pVAX1-E2 的构建 | 第27-28页 |
| ·重组质粒 pVAX1-E2 的大量提取 | 第28-29页 |
| ·重组质粒 pVAX1-E2 的细胞转染 | 第29-30页 |
| ·结果 | 第30-33页 |
| ·BVDV E2 基因的扩增结果 | 第30-31页 |
| ·重组质粒 pMD19-T-E2 的鉴定结果 | 第31页 |
| ·真核表达质粒 pVAX1-E2 的鉴定结果 | 第31-32页 |
| ·转染细胞中 E2 基因 mRNA 的检测结果 | 第32-33页 |
| ·转染细胞中 E2 基因表达蛋白的检测结果 | 第33页 |
| ·讨论 | 第33-36页 |
| ·研究 BVD 核酸疫苗的必要性 | 第33-34页 |
| ·载体的选择 | 第34页 |
| ·基因转染方法的选择 | 第34-36页 |
| 第3章 BVDV E0 和 E2 基因原核表达载体的构建及表达 | 第36-47页 |
| ·材料 | 第36页 |
| ·质粒及菌种 | 第36页 |
| ·主要试剂 | 第36页 |
| ·主要仪器 | 第36页 |
| ·方法 | 第36-41页 |
| ·BVDV E0、E2 短截表达基因的扩增 | 第36-37页 |
| ·BVDV E0 与 E2 短截基因的 TA 克隆 | 第37-38页 |
| ·原核表达重组质粒 pET-28a-E0 与 pET-30a-E2 的构建 | 第38-39页 |
| ·BVDV E0 与 E2 基因的原核表达 | 第39-41页 |
| ·目的蛋白的大量制备 | 第41页 |
| ·结果 | 第41-45页 |
| ·目的基因的扩增结果 | 第41-42页 |
| ·原核重组质粒 pET28a-E0 与 pET30a-E2 | 第42页 |
| ·SDS-PAGE 结果 | 第42-43页 |
| ·Western blot 分析结果 | 第43-44页 |
| ·蛋白纯化结果 | 第44-45页 |
| ·讨论 | 第45-47页 |
| 第4章 动物免疫试验 | 第47-55页 |
| ·材料 | 第47页 |
| ·质粒及试验动物 | 第47页 |
| ·主要试剂 | 第47页 |
| ·仪器与材料 | 第47页 |
| ·方法 | 第47-50页 |
| ·小鼠免疫试验 | 第47-48页 |
| ·免疫小鼠血清抗体效价测定 | 第48页 |
| ·免疫小鼠脾淋巴细胞增殖的 MTT 检测 | 第48-49页 |
| ·免疫小鼠抗体中和活性测定 | 第49-50页 |
| ·结果 | 第50-51页 |
| ·免疫小鼠抗体水平的检测结果 | 第50页 |
| ·免疫小鼠淋巴细胞增殖的 MTT 检测结果 | 第50-51页 |
| ·微量中和试验结果 | 第51页 |
| ·讨论 | 第51-55页 |
| ·核酸组的免疫效果 | 第51-52页 |
| ·免疫接种方法的选择 | 第52页 |
| ·免疫接种剂量的选择 | 第52-55页 |
| 第5章 结论 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-60页 |
| 致谢 | 第60-61页 |
| 作者简介 | 第61页 |
