英文缩略词 | 第1-9页 |
摘要 | 第9-14页 |
ABSTRACT | 第14-20页 |
第一章 前言 | 第20-22页 |
参考文献 | 第21-22页 |
第二章 TM4SF1 蛋白在上皮性卵巢癌中的表达及临床意义 | 第22-34页 |
1 材料与方法 | 第22-27页 |
·材料 | 第22-24页 |
·主要方法与步骤 | 第24-26页 |
·对照组设置 | 第26页 |
·结果判断 | 第26页 |
·统计学方法 | 第26-27页 |
2 结果 | 第27-29页 |
·TM4SF1 蛋白在卵巢组织及与上皮性卵巢癌相配对的淋巴结转移灶中的表达情况 | 第27-29页 |
·TM4SF1 蛋白的阳性表达与临床病理因素的关系 | 第29页 |
·上皮性卵巢癌组织中 TM4SF1 蛋白的阳性表达与临床预后的关系 | 第29页 |
3 讨论 | 第29-32页 |
参考文献 | 第32-34页 |
第三章 下调TM4SF1基因表达对卵巢癌细胞系生物学行为影响的体外研究 | 第34-79页 |
1 材料与方法 | 第34-62页 |
·材料 | 第34-40页 |
·实验方法及主要步骤 | 第40-62页 |
·统计学方法 | 第62页 |
2 结果 | 第62-74页 |
·提取的总 RNA 质量检测图 | 第62-63页 |
·不同卵巢癌细胞中 TM4SF1 基因表达情况 | 第63-64页 |
·转染条件的摸索 | 第64-65页 |
·筛选沉默效果最好的 siRNA 片段 | 第65-66页 |
·测序验证 pGPU6/GFP/Neo-TM4SF1-813 重组质粒 | 第66-67页 |
·筛选稳定干扰细胞株药物 G418 的浓度确定 | 第67页 |
·稳定干扰细胞株的筛选 | 第67-68页 |
·稳定转染细胞株 TM4SF1 基因沉默效果验证 | 第68-70页 |
·MTT 法绘制细胞生长曲线 | 第70页 |
·克隆形成实验结果 | 第70-71页 |
·流式细胞仪检测不同组别细胞周期的变化 | 第71-72页 |
·Transwell 迁移实验结果 | 第72-73页 |
·Matrigel 侵袭实验结果 | 第73-74页 |
3 讨论 | 第74-77页 |
参考文献 | 第77-79页 |
第四章 上调TM4SF1基因表达对卵巢癌细胞系生物学行为影响的体外研究 | 第79-109页 |
1 材料与方法 | 第79-92页 |
·材料 | 第79-81页 |
·实验方法 | 第81-92页 |
2 结果 | 第92-104页 |
·RT-PCR 检测低表达或不表达 TM4SF1 的卵巢癌细胞 | 第92页 |
·RT-PCT 扩增 TM4SF1 基因全长并连接入 pWPI 慢病毒表达载体 | 第92页 |
·目的基因与 pWPI 载体连接并进行测序鉴定 | 第92-96页 |
·将 pWPI、pCMV8.74R 及 pMD2.0G 共转染入 293T 细胞 | 第96-97页 |
·收集病毒上清液用病毒浓缩试剂盒浓缩以后进行病毒滴度测定 | 第97-98页 |
·流式细胞仪筛选转染 TM4SF1-pWPI 的卵巢癌细胞并扩大培养,荧光显微镜下观察病毒感染效率 | 第98-99页 |
·荧光定量 PCR 检测 TM4SF1 基因表达 | 第99页 |
·Western-Blot 检测 TM4SF1 蛋白表达量 | 第99-100页 |
·MTT 法测定细胞生长曲线 | 第100页 |
·平板克隆实验 | 第100-101页 |
·流式细胞仪检测细胞周期 | 第101-102页 |
·胞体外迁移能力的测定结果 | 第102-103页 |
·细胞体外侵袭能力测定结果 | 第103-104页 |
3 讨论 | 第104-107页 |
参考文献 | 第107-109页 |
第五章 卵巢恶性肿瘤侵袭和转移相关因素的研究进展(文献综述) | 第109-151页 |
1. 卵巢恶性肿瘤概述 | 第109-120页 |
·发病原因 | 第109-112页 |
·卵巢癌发生的危险因素 | 第112-115页 |
·卵巢癌治疗现状 | 第115-119页 |
·卵巢癌治疗存在的问题 | 第119-120页 |
2. 恶性肿瘤的侵袭和转移机制 | 第120-123页 |
·肿瘤细胞表面的粘附分子减少 | 第120页 |
·肿瘤细胞与基底膜的粘着增加 | 第120页 |
·基底膜的降解 | 第120页 |
·肿瘤细胞生存或增殖能力增强 | 第120页 |
·肿瘤细胞的迁移 | 第120-121页 |
·肿瘤血管的生成 | 第121页 |
·免疫逃避 | 第121页 |
·肿瘤干细胞的上皮/间质转变 | 第121-122页 |
·失巢凋亡抑制 | 第122-123页 |
3.卵巢癌侵袭、转移研究现状 | 第123-130页 |
·粘附分子 | 第123-125页 |
·细胞因子 | 第125-128页 |
·TM4SF 家族 | 第128-130页 |
4.TMS4F1 在恶性肿瘤中的研究现状及前景 | 第130-134页 |
·介导前列腺癌细胞侵袭和转移 | 第131页 |
·调控血管形成 | 第131-132页 |
·诱发细胞免疫 | 第132页 |
·增强肺癌细胞侵袭能力 | 第132页 |
·调控细胞凋亡 | 第132页 |
·促进细胞运动及迁移 | 第132-133页 |
·与卵巢癌发生发展 | 第133-134页 |
参考文献 | 第134-151页 |
全文小结 | 第151-152页 |
攻读硕士学位期间发表的论文 | 第152-153页 |
致谢 | 第153-154页 |