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肿瘤相关抗原TM4SF1对卵巢癌细胞生物学功能影响的初步研究

英文缩略词第1-9页
摘要第9-14页
ABSTRACT第14-20页
第一章 前言第20-22页
 参考文献第21-22页
第二章 TM4SF1 蛋白在上皮性卵巢癌中的表达及临床意义第22-34页
 1 材料与方法第22-27页
   ·材料第22-24页
   ·主要方法与步骤第24-26页
   ·对照组设置第26页
   ·结果判断第26页
   ·统计学方法第26-27页
 2 结果第27-29页
   ·TM4SF1 蛋白在卵巢组织及与上皮性卵巢癌相配对的淋巴结转移灶中的表达情况第27-29页
   ·TM4SF1 蛋白的阳性表达与临床病理因素的关系第29页
   ·上皮性卵巢癌组织中 TM4SF1 蛋白的阳性表达与临床预后的关系第29页
 3 讨论第29-32页
 参考文献第32-34页
第三章 下调TM4SF1基因表达对卵巢癌细胞系生物学行为影响的体外研究第34-79页
 1 材料与方法第34-62页
   ·材料第34-40页
   ·实验方法及主要步骤第40-62页
   ·统计学方法第62页
 2 结果第62-74页
   ·提取的总 RNA 质量检测图第62-63页
   ·不同卵巢癌细胞中 TM4SF1 基因表达情况第63-64页
   ·转染条件的摸索第64-65页
   ·筛选沉默效果最好的 siRNA 片段第65-66页
   ·测序验证 pGPU6/GFP/Neo-TM4SF1-813 重组质粒第66-67页
   ·筛选稳定干扰细胞株药物 G418 的浓度确定第67页
   ·稳定干扰细胞株的筛选第67-68页
   ·稳定转染细胞株 TM4SF1 基因沉默效果验证第68-70页
   ·MTT 法绘制细胞生长曲线第70页
   ·克隆形成实验结果第70-71页
   ·流式细胞仪检测不同组别细胞周期的变化第71-72页
   ·Transwell 迁移实验结果第72-73页
   ·Matrigel 侵袭实验结果第73-74页
 3 讨论第74-77页
 参考文献第77-79页
第四章 上调TM4SF1基因表达对卵巢癌细胞系生物学行为影响的体外研究第79-109页
 1 材料与方法第79-92页
   ·材料第79-81页
   ·实验方法第81-92页
 2 结果第92-104页
   ·RT-PCR 检测低表达或不表达 TM4SF1 的卵巢癌细胞第92页
   ·RT-PCT 扩增 TM4SF1 基因全长并连接入 pWPI 慢病毒表达载体第92页
   ·目的基因与 pWPI 载体连接并进行测序鉴定第92-96页
   ·将 pWPI、pCMV8.74R 及 pMD2.0G 共转染入 293T 细胞第96-97页
   ·收集病毒上清液用病毒浓缩试剂盒浓缩以后进行病毒滴度测定第97-98页
   ·流式细胞仪筛选转染 TM4SF1-pWPI 的卵巢癌细胞并扩大培养,荧光显微镜下观察病毒感染效率第98-99页
   ·荧光定量 PCR 检测 TM4SF1 基因表达第99页
   ·Western-Blot 检测 TM4SF1 蛋白表达量第99-100页
   ·MTT 法测定细胞生长曲线第100页
   ·平板克隆实验第100-101页
   ·流式细胞仪检测细胞周期第101-102页
   ·胞体外迁移能力的测定结果第102-103页
   ·细胞体外侵袭能力测定结果第103-104页
 3 讨论第104-107页
 参考文献第107-109页
第五章 卵巢恶性肿瘤侵袭和转移相关因素的研究进展(文献综述)第109-151页
 1. 卵巢恶性肿瘤概述第109-120页
   ·发病原因第109-112页
   ·卵巢癌发生的危险因素第112-115页
   ·卵巢癌治疗现状第115-119页
   ·卵巢癌治疗存在的问题第119-120页
 2. 恶性肿瘤的侵袭和转移机制第120-123页
   ·肿瘤细胞表面的粘附分子减少第120页
   ·肿瘤细胞与基底膜的粘着增加第120页
   ·基底膜的降解第120页
   ·肿瘤细胞生存或增殖能力增强第120页
   ·肿瘤细胞的迁移第120-121页
   ·肿瘤血管的生成第121页
   ·免疫逃避第121页
   ·肿瘤干细胞的上皮/间质转变第121-122页
   ·失巢凋亡抑制第122-123页
 3.卵巢癌侵袭、转移研究现状第123-130页
   ·粘附分子第123-125页
   ·细胞因子第125-128页
   ·TM4SF 家族第128-130页
 4.TMS4F1 在恶性肿瘤中的研究现状及前景第130-134页
   ·介导前列腺癌细胞侵袭和转移第131页
   ·调控血管形成第131-132页
   ·诱发细胞免疫第132页
   ·增强肺癌细胞侵袭能力第132页
   ·调控细胞凋亡第132页
   ·促进细胞运动及迁移第132-133页
   ·与卵巢癌发生发展第133-134页
 参考文献第134-151页
全文小结第151-152页
攻读硕士学位期间发表的论文第152-153页
致谢第153-154页

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