| 摘要 | 第1-10页 |
| ABSTRACT | 第10-14页 |
| 第一章 前言 | 第14-25页 |
| 1.蛋白质组学发展概况 | 第14-19页 |
| ·蛋白质组学研究策略 | 第14-17页 |
| ·定量蛋白质组学及其应用 | 第17页 |
| ·目标蛋白质组定量及其技术策略 | 第17-19页 |
| 2.本论文的工作和意义 | 第19-25页 |
| ·一种基于18O 同位素标记-QconCAT 结合同位素稀释-MRM 质谱的蛋白质绝对定量新方法研究 | 第20-21页 |
| ·一种基于18O 同位素-QconCAT 的多重内标结合 MRM 质谱的蛋白质绝对定量新方法研究 | 第21-25页 |
| 第二章 18O 同位素标记定量肽段串联体蛋白质结合同位素稀释-多反应监测质谱的蛋白质绝对定量新方法 | 第25-45页 |
| 1.实验部分 | 第27-32页 |
| ·仪器与试剂 | 第27页 |
| ·实验方法 | 第27-32页 |
| ·内标肽段的选择 | 第27-29页 |
| ·构建 QconCAT 质粒 | 第29页 |
| ·QconCAT 的表达和纯化 | 第29-31页 |
| ·内标肽段的制备 | 第31-32页 |
| ·腾冲嗜热菌全蛋白的酶切 | 第32页 |
| 2. 结果与讨论 | 第32-44页 |
| ·QconCAT 重组蛋白质的纯度表征 | 第32-33页 |
| ·QconCAT 重组蛋白质酶切效率 | 第33-36页 |
| ·腾冲嗜热菌全蛋白酶切效率 | 第36-37页 |
| ·内标肽段18O 标记效率 | 第37-39页 |
| ·内标肽段绝对含量的测定 | 第39-41页 |
| ·标准曲线的制作 | 第39-40页 |
| ·QconCAT 蛋白的含量测定 | 第40-41页 |
| ·实际样品腾冲嗜热菌中的应用 | 第41-44页 |
| ·标准曲线的制作与含量测定 | 第41-44页 |
| 3.结论 | 第44-45页 |
| 第三章 一种基于18O 同位素-QconCAT 多重标记内标结合 MRM 质谱的目标蛋白质组绝对定量新方法研究 | 第45-87页 |
| 1.实验部分 | 第47-59页 |
| ·仪器与试剂 | 第47-48页 |
| ·实验方法 | 第48-59页 |
| ·人肝微粒体 QconCAT 内标肽段的选择 | 第48-51页 |
| ·人肝微粒体 QconCAT 质粒构建 | 第51页 |
| ·人肝微粒体 QconCAT 重组蛋白的表达和纯化 | 第51-54页 |
| ·质谱与液相色谱分析 | 第54-56页 |
| ·三种 QconCAT 多重标记的内标肽段的制备 | 第56-57页 |
| ·人肝微粒体蛋白质的提取与酶切 | 第57-59页 |
| 2. 结果与讨论 | 第59-86页 |
| ·QconCAT 重组蛋白质的纯度表征 | 第59-60页 |
| ·QconCAT 重组蛋白质酶切效率 | 第60-62页 |
| ·人肝微粒体全蛋白酶切效率 | 第62-63页 |
| ·内标肽段标记效率考察 | 第63-67页 |
| ·内标肽段绝对含量的测定 | 第67-82页 |
| ·标准肽段 GST 稳定性考察 | 第67-72页 |
| ·标准肽段 GST 含量的测定 | 第72-78页 |
| ·标准曲线的制作 | 第78-80页 |
| ·三种内标肽段的含量测定 | 第80-82页 |
| ·人肝微粒体中药物代谢酶含量测定 | 第82-86页 |
| ·标准曲线的制作 | 第82-85页 |
| ·方法的精密度考察 | 第85-86页 |
| 3.结论 | 第86-87页 |
| 全文小结 | 第87-88页 |
| 参考文献 | 第88-95页 |
| 致谢 | 第95-97页 |
| 攻读硕士学位期间取得的科研成果 | 第97页 |
