摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
目录 | 第6-10页 |
第一章 文献综述 | 第10-16页 |
·氨苄青霉素的概况 | 第10-11页 |
·理化性质 | 第10页 |
·作用机理 | 第10-11页 |
·体内代谢 | 第11页 |
·氨苄青霉素残留现状及危害 | 第11-13页 |
·残留现状 | 第11-12页 |
·危害 | 第12-13页 |
·抗生素残留的限量标准 | 第13页 |
·国内外抗生素残留检测方法 | 第13-14页 |
·仪器分析法 | 第13页 |
·微生物检测法 | 第13-14页 |
·免疫分析法 | 第14页 |
·本研究的意义 | 第14-16页 |
第二章 氨苄青霉素全抗原的合成和鉴定 | 第16-28页 |
·概述 | 第16页 |
·实验药品与仪器 | 第16页 |
·实验药品 | 第16页 |
·实验设备及器材 | 第16页 |
·全抗原的合成 | 第16-21页 |
·生理学法 | 第16-17页 |
·碳化二亚胺法(EDC 法) | 第17页 |
·NHS+EDC 法 | 第17-18页 |
·戊二醛法 | 第18-19页 |
·BS~3法 | 第19-20页 |
·SMCC 法 | 第20-21页 |
·抗原浓度的测定 | 第21页 |
·全抗原的鉴定 | 第21-22页 |
·紫外光谱扫描鉴定氨苄青霉素全抗原 | 第21页 |
·SDS-PAGE 凝胶电泳鉴定氨苄青霉素全抗原 | 第21-22页 |
·结果和分析 | 第22-24页 |
·全抗原浓度的测定 | 第22-23页 |
·全抗原紫外光谱扫描鉴定 | 第23-24页 |
·全抗原 SDS-PAGE 凝胶电泳鉴定 | 第24-28页 |
第三章 氨苄青霉素单抗的制备和鉴定 | 第28-42页 |
·概述 | 第28页 |
·实验药品与仪器 | 第28页 |
·实验药品 | 第28页 |
·实验设备及器材 | 第28页 |
·动物免疫及测定 | 第28-30页 |
·动物免疫 | 第28-29页 |
·ELISA 方阵的确定抗原包被浓度及血清效价的测定 | 第29-30页 |
·血清敏感性测定 | 第30页 |
·杂交瘤细胞的制备及培养 | 第30-33页 |
·饲养细胞的制备 | 第31页 |
·骨髓瘤细胞的制备 | 第31页 |
·免疫脾细胞的制备 | 第31-32页 |
·细胞融合 | 第32页 |
·杂交瘤细胞的培养 | 第32页 |
·杂交瘤细胞的筛选及亚克隆 | 第32-33页 |
·单克隆抗体的大量制备 | 第33页 |
·阳性杂交瘤细胞的冻存与复苏 | 第33页 |
·腹水的纯化 | 第33-34页 |
·单克隆抗体的鉴定 | 第34-35页 |
·单抗效价的测定 | 第34页 |
·单抗免疫球蛋白亚类的测定 | 第34页 |
·单抗敏感性的测定 | 第34页 |
·单抗亲和常数的测定 | 第34-35页 |
·单抗与 BSA、KLH 交叉反应的测定 | 第35页 |
·单抗与其他抗生素交叉反应的测定 | 第35页 |
·结果和分析 | 第35-42页 |
·包被抗原最佳浓度以及血清效价测定 | 第35-37页 |
·小鼠血清敏感性测定 | 第37页 |
·杂交瘤细胞融合及筛选 | 第37-38页 |
·单抗效价测定及纯化 | 第38-39页 |
·单抗免疫球蛋白亚类的测定 | 第39页 |
·单抗敏感性的测定 | 第39-40页 |
·单抗亲和常数的测定 | 第40页 |
·单抗与 BSA、KLH 交叉反应的测定 | 第40页 |
·单克隆抗体的交叉反应性测定 | 第40-42页 |
第四章 氨苄青霉素 ELISA 检测技术的初步建立 | 第42-50页 |
·概述 | 第42页 |
·实验方法 | 第42-44页 |
·抗原包被条件的优化 | 第42-43页 |
·封闭条件的优化 | 第43页 |
·一抗反应时间的优化 | 第43页 |
·二抗反应时间的优化 | 第43页 |
·抗原包被浓度和抗体工作浓度的优化 | 第43-44页 |
·灵敏度与最低检测线 | 第44页 |
·结果与分析 | 第44-50页 |
·抗原包被条件的优化 | 第44-45页 |
·一抗反应时间的优化 | 第45-46页 |
·二抗反应时间的优化 | 第46页 |
·抗原包被浓度和抗体工作浓度的优化 | 第46-47页 |
·间接竞争 ELISA 标准曲线的优化 | 第47-49页 |
·灵敏度与最低检测线 | 第49-50页 |
第五章 讨论 | 第50-52页 |
·氨苄青霉素全抗原的制备及鉴定 | 第50页 |
·小鼠免疫及检测 | 第50页 |
·单克隆抗体的制备 | 第50-51页 |
·氨苄青霉素 ELISA 检测实验的建立 | 第51-52页 |
结论 | 第52-53页 |
参考文献 | 第53-57页 |
附录 | 第57-59页 |
致谢 | 第59-60页 |
攻读学位期间取得的科研成果 | 第60页 |