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氨苄青霉素免疫原性分析及其抗体制备

摘要第1-5页
Abstract第5-6页
目录第6-10页
第一章 文献综述第10-16页
   ·氨苄青霉素的概况第10-11页
     ·理化性质第10页
     ·作用机理第10-11页
     ·体内代谢第11页
   ·氨苄青霉素残留现状及危害第11-13页
     ·残留现状第11-12页
     ·危害第12-13页
   ·抗生素残留的限量标准第13页
   ·国内外抗生素残留检测方法第13-14页
     ·仪器分析法第13页
     ·微生物检测法第13-14页
     ·免疫分析法第14页
   ·本研究的意义第14-16页
第二章 氨苄青霉素全抗原的合成和鉴定第16-28页
   ·概述第16页
   ·实验药品与仪器第16页
     ·实验药品第16页
     ·实验设备及器材第16页
   ·全抗原的合成第16-21页
     ·生理学法第16-17页
     ·碳化二亚胺法(EDC 法)第17页
     ·NHS+EDC 法第17-18页
     ·戊二醛法第18-19页
     ·BS~3法第19-20页
     ·SMCC 法第20-21页
   ·抗原浓度的测定第21页
   ·全抗原的鉴定第21-22页
     ·紫外光谱扫描鉴定氨苄青霉素全抗原第21页
     ·SDS-PAGE 凝胶电泳鉴定氨苄青霉素全抗原第21-22页
   ·结果和分析第22-24页
     ·全抗原浓度的测定第22-23页
     ·全抗原紫外光谱扫描鉴定第23-24页
   ·全抗原 SDS-PAGE 凝胶电泳鉴定第24-28页
第三章 氨苄青霉素单抗的制备和鉴定第28-42页
   ·概述第28页
   ·实验药品与仪器第28页
     ·实验药品第28页
     ·实验设备及器材第28页
   ·动物免疫及测定第28-30页
     ·动物免疫第28-29页
     ·ELISA 方阵的确定抗原包被浓度及血清效价的测定第29-30页
     ·血清敏感性测定第30页
   ·杂交瘤细胞的制备及培养第30-33页
     ·饲养细胞的制备第31页
     ·骨髓瘤细胞的制备第31页
     ·免疫脾细胞的制备第31-32页
     ·细胞融合第32页
     ·杂交瘤细胞的培养第32页
     ·杂交瘤细胞的筛选及亚克隆第32-33页
     ·单克隆抗体的大量制备第33页
     ·阳性杂交瘤细胞的冻存与复苏第33页
   ·腹水的纯化第33-34页
   ·单克隆抗体的鉴定第34-35页
     ·单抗效价的测定第34页
     ·单抗免疫球蛋白亚类的测定第34页
     ·单抗敏感性的测定第34页
     ·单抗亲和常数的测定第34-35页
     ·单抗与 BSA、KLH 交叉反应的测定第35页
     ·单抗与其他抗生素交叉反应的测定第35页
   ·结果和分析第35-42页
     ·包被抗原最佳浓度以及血清效价测定第35-37页
     ·小鼠血清敏感性测定第37页
     ·杂交瘤细胞融合及筛选第37-38页
     ·单抗效价测定及纯化第38-39页
     ·单抗免疫球蛋白亚类的测定第39页
     ·单抗敏感性的测定第39-40页
     ·单抗亲和常数的测定第40页
     ·单抗与 BSA、KLH 交叉反应的测定第40页
     ·单克隆抗体的交叉反应性测定第40-42页
第四章 氨苄青霉素 ELISA 检测技术的初步建立第42-50页
   ·概述第42页
   ·实验方法第42-44页
     ·抗原包被条件的优化第42-43页
     ·封闭条件的优化第43页
     ·一抗反应时间的优化第43页
     ·二抗反应时间的优化第43页
     ·抗原包被浓度和抗体工作浓度的优化第43-44页
     ·灵敏度与最低检测线第44页
   ·结果与分析第44-50页
     ·抗原包被条件的优化第44-45页
     ·一抗反应时间的优化第45-46页
     ·二抗反应时间的优化第46页
     ·抗原包被浓度和抗体工作浓度的优化第46-47页
     ·间接竞争 ELISA 标准曲线的优化第47-49页
     ·灵敏度与最低检测线第49-50页
第五章 讨论第50-52页
   ·氨苄青霉素全抗原的制备及鉴定第50页
   ·小鼠免疫及检测第50页
   ·单克隆抗体的制备第50-51页
   ·氨苄青霉素 ELISA 检测实验的建立第51-52页
结论第52-53页
参考文献第53-57页
附录第57-59页
致谢第59-60页
攻读学位期间取得的科研成果第60页

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