| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 目录 | 第8-10页 |
| 符号说明 | 第10-11页 |
| 第一章 前言 | 第11-14页 |
| 第二章 材料 | 第14-18页 |
| ·主要试验仪器设备 | 第14页 |
| ·主要试验试剂及耗材 | 第14-16页 |
| ·主要试剂配制 | 第16-18页 |
| 第三章 方法 | 第18-39页 |
| ·确定CYP2D6的SNP位点并确认其基因序列 | 第18页 |
| ·选取标本进行基因分型并依CYP2D6标本提取MRNA | 第18-19页 |
| ·CYP2D6特异性扩增引物设计与PCR扩增目的基因cDNA序列 | 第19-21页 |
| ·构建含目的基因野生型和突变型T载体并测序鉴定 | 第21-25页 |
| ·将野生或突变型基因序列构建至PcDNA3.1(-)载体并测序鉴定 | 第25-27页 |
| ·野生和突变重组质粒转染HEPG2及G418筛选重组表达细胞株 | 第27-30页 |
| ·提取重组细胞株MRNA,获得相应cDNA并筛选MRNA细胞株 | 第30-32页 |
| ·野生型和突变型重组蛋白检测、细胞定位 | 第32-34页 |
| ·采用细胞原位培养,加入阿立哌唑孵育,检测阿立哌唑浓度评估重组细胞酶活性 | 第34-35页 |
| ·HPLC分析重组人CYP2D6对阿立哌唑代谢的影响 | 第35-39页 |
| 第四章 结果 | 第39-51页 |
| ·从肝脏中提取的CYP2D6~*1野生型MRNA | 第39页 |
| ·CYP2D6基因重组质粒的构建 | 第39-41页 |
| ·稳定表达CYP2D6-HEPG2细胞的建立与鉴定 | 第41-44页 |
| ·HPLC分析重组人CYP2D6对阿立哌唑代谢的影响 | 第44-51页 |
| 第五章 讨论 | 第51-53页 |
| ·重组表达体系的选择 | 第51页 |
| ·重组表达产物的分析 | 第51页 |
| ·重组CYPs的应用及发展前景 | 第51-52页 |
| ·CYP2D6基因多态性对阿立哌唑代谢的影响 | 第52-53页 |
| 第六章 结论 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-57页 |
| 综述 | 第57-65页 |
| 参考文献 | 第63-65页 |
| 致谢 | 第65-66页 |
| 攻读学位期间主要的研究成果 | 第66页 |
