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HCV IRES翻译启动活性的细胞特异性及其机制研究

摘要第1-5页
ABSTRACT第5-7页
目录第7-9页
英汉缩略词对照表第9-11页
前言第11-14页
第一章 材料与方法第14-38页
     ·实验材料第14-17页
       ·菌株、质粒和细胞株第14-15页
       ·主要试剂及其来源第15-16页
       ·主要仪器设备第16-17页
     ·实验技术路线第17-18页
     ·HCV IRES翻译启动活性的分析第17页
     ·体外转录缺失HCV IRES不同结构域的RNA第17页
     ·RNA与蛋白质的特异性结合检测第17-18页
     ·实验方法第18-38页
       ·质粒的转化、提取与纯化第18-21页
       ·细胞培养和转染第21-24页
       ·半定量RT-PCR检测HCV IRES在细胞中的转录水平第24-28页
       ·双荧光素酶表达的检测第28-29页
       ·RNA和蛋白质的结合检测第29-37页
     ·统计学分析第37-38页
第二章 结果第38-50页
     ·质粒酶切鉴定第38-39页
       ·pRL-TK质粒和pCN1质粒的鉴定第38页
       ·质粒pCN1、pCN1-d2、pCN1-d3和pCN1-d5的鉴定第38-39页
     ·半定量RT-PCR检测HCV IRES在细胞中的转录水平第39-43页
       ·人肾细胞系293T细胞RT-PCR结果第39-40页
       ·人宫颈癌细胞系Hela细胞RT-PCR结果第40-41页
       ·大鼠胶质瘤细胞株C6细胞RT-PCR结果第41-42页
       ·人肝细胞L-02细胞RT-PCR结果第42-43页
     ·双荧光素酶报告基因系统检测HCV IRES的翻译差异第43-48页
       ·人肾细胞系293T细胞转染后双荧光素酶的表达结果第43-44页
       ·人宫颈癌细胞系Hela细胞转染后双荧光素酶的表达结果第44-45页
       ·大鼠胶质瘤细胞株C6细胞转染后双荧光素酶的表达结果第45-46页
       ·人永生化肝细胞株L-02细胞转染后双荧光素酶的表达结果第46-47页
       ·不同细胞间HCV IRES的翻译启动差异的比较第47-48页
     ·体外转录RNA的结果第48页
     ·RNA和蛋白质特异性结合的结果第48-50页
第三章 讨论第50-55页
   ·翻译启动活性检测系统的选择第50页
   ·缺失HCV 5'UTR不同结构域对其翻译启动活性的差异第50-52页
   ·RNA特异性结合蛋白检测系统的选择第52-53页
   ·能与HCV 5'UTR特异性结合的蛋白质第53-55页
第四章 结论第55-56页
参考文献第56-60页
综述第60-66页
 参考文献第64-66页
致谢第66-67页
攻读学位期间的主要成果第67页

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