摘要 | 第1-5页 |
ABSTRACT | 第5-7页 |
目录 | 第7-9页 |
英汉缩略词对照表 | 第9-11页 |
前言 | 第11-14页 |
第一章 材料与方法 | 第14-38页 |
·实验材料 | 第14-17页 |
·菌株、质粒和细胞株 | 第14-15页 |
·主要试剂及其来源 | 第15-16页 |
·主要仪器设备 | 第16-17页 |
·实验技术路线 | 第17-18页 |
·HCV IRES翻译启动活性的分析 | 第17页 |
·体外转录缺失HCV IRES不同结构域的RNA | 第17页 |
·RNA与蛋白质的特异性结合检测 | 第17-18页 |
·实验方法 | 第18-38页 |
·质粒的转化、提取与纯化 | 第18-21页 |
·细胞培养和转染 | 第21-24页 |
·半定量RT-PCR检测HCV IRES在细胞中的转录水平 | 第24-28页 |
·双荧光素酶表达的检测 | 第28-29页 |
·RNA和蛋白质的结合检测 | 第29-37页 |
·统计学分析 | 第37-38页 |
第二章 结果 | 第38-50页 |
·质粒酶切鉴定 | 第38-39页 |
·pRL-TK质粒和pCN1质粒的鉴定 | 第38页 |
·质粒pCN1、pCN1-d2、pCN1-d3和pCN1-d5的鉴定 | 第38-39页 |
·半定量RT-PCR检测HCV IRES在细胞中的转录水平 | 第39-43页 |
·人肾细胞系293T细胞RT-PCR结果 | 第39-40页 |
·人宫颈癌细胞系Hela细胞RT-PCR结果 | 第40-41页 |
·大鼠胶质瘤细胞株C6细胞RT-PCR结果 | 第41-42页 |
·人肝细胞L-02细胞RT-PCR结果 | 第42-43页 |
·双荧光素酶报告基因系统检测HCV IRES的翻译差异 | 第43-48页 |
·人肾细胞系293T细胞转染后双荧光素酶的表达结果 | 第43-44页 |
·人宫颈癌细胞系Hela细胞转染后双荧光素酶的表达结果 | 第44-45页 |
·大鼠胶质瘤细胞株C6细胞转染后双荧光素酶的表达结果 | 第45-46页 |
·人永生化肝细胞株L-02细胞转染后双荧光素酶的表达结果 | 第46-47页 |
·不同细胞间HCV IRES的翻译启动差异的比较 | 第47-48页 |
·体外转录RNA的结果 | 第48页 |
·RNA和蛋白质特异性结合的结果 | 第48-50页 |
第三章 讨论 | 第50-55页 |
·翻译启动活性检测系统的选择 | 第50页 |
·缺失HCV 5'UTR不同结构域对其翻译启动活性的差异 | 第50-52页 |
·RNA特异性结合蛋白检测系统的选择 | 第52-53页 |
·能与HCV 5'UTR特异性结合的蛋白质 | 第53-55页 |
第四章 结论 | 第55-56页 |
参考文献 | 第56-60页 |
综述 | 第60-66页 |
参考文献 | 第64-66页 |
致谢 | 第66-67页 |
攻读学位期间的主要成果 | 第67页 |