摘要 | 第1-4页 |
ABSTRACT | 第4-6页 |
文缩略表 | 第6-12页 |
第一章 文献综述 | 第12-28页 |
·口蹄疫病毒及其流行病学 | 第12-15页 |
·O 型口蹄疫病毒 | 第14页 |
·A 型口蹄疫病毒 | 第14页 |
·亚洲 1 型口蹄疫病毒 | 第14页 |
·南非 1、2 和 3 型口蹄疫病毒 | 第14页 |
·C 型口蹄疫病毒 | 第14-15页 |
·口蹄疫准种研究进展 | 第15-19页 |
·错配倾向的复制和病毒准种 | 第15-16页 |
·错误灾变 | 第16页 |
·病毒准种、适合度和进化选择 | 第16-17页 |
·口蹄疫病毒准种特性 | 第17-18页 |
·口蹄疫准种株的量化 | 第18页 |
·口蹄疫准种的优势株与劣势株 | 第18-19页 |
·口蹄疫疫苗 | 第19-24页 |
·灭活疫苗 | 第20页 |
·紧急疫苗 | 第20页 |
·油佐剂疫苗 | 第20-21页 |
·氢氧化铝疫苗 | 第21页 |
·可饲疫苗 | 第21页 |
·抗原表位疫苗 | 第21页 |
·核酸疫苗 | 第21-22页 |
·合成肽疫苗 | 第22页 |
·病毒样颗粒疫苗 | 第22-23页 |
·病毒载体疫苗 | 第23页 |
·基因工程病毒灭活疫苗 | 第23页 |
·弱毒活疫苗 | 第23-24页 |
·疫苗佐剂与病毒抑制剂 | 第24页 |
·口蹄疫天然免疫 | 第24-28页 |
·巨噬细胞(Macrophages,MΦ) | 第24-25页 |
·树突状细胞(Dendritic cells,DC) | 第25-26页 |
·淋巴细胞(Lymphocytes) | 第26页 |
·非免疫细胞(non-immunological cells) | 第26页 |
·干扰素(I interferon type I) | 第26-27页 |
·天然免疫反应(Innate immune response) | 第27-28页 |
第二章 口蹄疫病毒基因组的遗传变异分析 | 第28-37页 |
·前言 | 第28-29页 |
·材料和方法 | 第29-30页 |
·口蹄疫基因组序列 | 第29页 |
·口蹄疫基因组同源性分析 | 第29页 |
·口蹄疫病毒基因组序列的多重排比和进化关系分析 | 第29页 |
·口蹄疫病毒基因组的非编码区二级结构预测 | 第29-30页 |
·结果 | 第30-34页 |
·口蹄疫病毒基因组结构与各组分的大小 | 第30页 |
·口蹄疫病毒基因组的变异性和保守性 | 第30-33页 |
·口蹄疫病毒基因组的进化关系 | 第33-34页 |
·讨论 | 第34-36页 |
·小结 | 第36-37页 |
第三章 O 型口蹄疫病毒基因组的遗传变异 | 第37-46页 |
·前言 | 第37页 |
·材料与方法 | 第37-39页 |
·酶及主要试剂 | 第37-38页 |
·溶液及其配制 | 第38页 |
·仪器 | 第38页 |
·病毒 RNA 的提取 | 第38页 |
·引物设计 | 第38页 |
·目的片段扩增 | 第38页 |
·产物的回收与纯化 | 第38-39页 |
·病毒基因组测序 | 第39页 |
·口蹄疫基因组序列 | 第39页 |
·口蹄疫基因组同源性分析 | 第39页 |
·口蹄疫病毒基因组序列的多重排比和进化关系分析 | 第39页 |
·结果 | 第39-44页 |
·O 型口蹄疫病毒基因组同源性分析 | 第39-43页 |
·口蹄疫病毒基因组的进化关系 | 第43-44页 |
·讨论 | 第44-46页 |
第四章 口蹄疫病毒全长构建和拯救 | 第46-54页 |
·前言 | 第46-47页 |
·材料与方法 | 第47-49页 |
·生物酶和试剂 | 第47页 |
·引物设计 | 第47页 |
·细胞和种毒 | 第47-48页 |
·体外转录 RNA 的制备 | 第48页 |
·转染 BHK-21 细胞 | 第48页 |
·电子显微镜观察 | 第48页 |
·PCR 法检测病毒基因组 | 第48页 |
·间接免疫荧光检测病毒 | 第48-49页 |
·病毒蚀斑实验 | 第49页 |
·乳鼠毒力实验 | 第49页 |
·结果 | 第49-52页 |
·体外转录结果 | 第49-50页 |
·细胞病变观察 | 第50页 |
·电镜结果 | 第50页 |
·PCR 鉴定结果 | 第50-51页 |
·免疫荧光检测结果 | 第51页 |
·蚀斑实验 | 第51-52页 |
·乳鼠毒力试验 | 第52页 |
·讨论 | 第52-54页 |
第五章 口蹄疫基因工程病毒灭活疫苗舌下免疫研究 | 第54-63页 |
·前言 | 第54页 |
·材料与方法 | 第54-57页 |
·病毒、细胞和实验动物 | 第54页 |
·主要试剂及配制 | 第54页 |
·病毒培养 | 第54-55页 |
·病毒的灭活 | 第55页 |
·病毒的纯化 | 第55-56页 |
·病毒 146S 含量测定 | 第56页 |
·动物免疫和 ELISA 检测 | 第56页 |
·病毒中和试验 | 第56页 |
·淋巴细胞转化试验 | 第56-57页 |
·肺脏和肠道洗液的收集 | 第57页 |
·肺脏和肠道中 IgA 检测 | 第57页 |
·统计学分析 | 第57页 |
·结果 | 第57-61页 |
·基因工程病毒灭活检测 | 第57-58页 |
·基因工程病毒抗体的测定 | 第58-59页 |
·口蹄疫基因工程病毒黏膜抗体测定 | 第59-60页 |
·淋巴细胞增殖检测 | 第60页 |
·细胞因子水平检测 | 第60-61页 |
·基因工程病毒灭活疫苗的动物攻毒实验 | 第61页 |
·乳鼠免疫保护实验 | 第61页 |
·讨论 | 第61-62页 |
·小结 | 第62-63页 |
第六章 口蹄疫病毒缺失毒株构建和拯救 | 第63-70页 |
·前言 | 第63页 |
·材料与方法 | 第63-65页 |
·菌株、试验动物及试剂 | 第63页 |
·溶液及其配制 | 第63页 |
·质粒构建和 RNA 体外转录 | 第63-64页 |
·转染和口蹄疫病毒 RNA 定量 | 第64页 |
·病毒增长曲线 | 第64页 |
·病毒中和试验 | 第64-65页 |
·统计学分析 | 第65页 |
·结果 | 第65-68页 |
·讨论 | 第68-70页 |
第七章 口蹄疫缺失病毒核酸疫苗舌下免疫研究 | 第70-79页 |
·前言 | 第70-71页 |
·材料与方法 | 第71-73页 |
·疫苗与动物 | 第71页 |
·主要试剂 | 第71页 |
·壳聚糖纳米粒制备 | 第71页 |
·动物和免疫 | 第71页 |
·病毒中和试验 | 第71-72页 |
·淋巴细胞转化试验 | 第72页 |
·ELISA 检测抗体水平 | 第72-73页 |
·结果 | 第73-76页 |
·IgG 水平检测 | 第73页 |
·IgA 水平检测 | 第73-74页 |
·淋巴细胞增值试验 | 第74-75页 |
·粘膜免疫水平检测 | 第75页 |
·细胞微量中和试验 | 第75-76页 |
·豚鼠免疫保护实验 | 第76页 |
·乳鼠免疫保护实验 | 第76页 |
·讨论 | 第76-77页 |
·小结 | 第77-79页 |
参考文献 | 第79-104页 |
致谢 | 第104-105页 |
作者简历 | 第105-108页 |