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拟穴青蟹细胞周期及泛素系统若干基因参与性腺发育的研究

摘要第1-6页
Abstract第6-12页
主要符号表第12-13页
第1章 引言第13-22页
   ·拟穴青蟹的生物学特性第13页
   ·虾蟹类参与性腺发育分子机制的研究进展第13-14页
   ·Cyclin-CDK-CKI 的作用研究第14-16页
     ·Cyclin-CDK-CKI 的组成第14-16页
     ·Cyclin-CDK-CKI 参与生殖过程的研究第16页
   ·UPP 的组成与生理生化特性及其参与生殖调控的研究第16-19页
     ·UPP 的组成及特性第16-18页
     ·UPP 参与生殖调控的研究第18-19页
   ·Cyclin-CDK-CKI 与 UPP 之间的联系第19页
   ·Cyclin-CDK-CKI 与 UPP 系统在虾蟹类性腺发育中的研究进展第19-20页
   ·本研究的目的意义第20页
   ·本研究的主要技术路线第20-22页
第2章 材料与方法第22-29页
   ·材料第22-23页
     ·拟穴青蟹第22页
     ·主要试剂盒及仪器第22页
     ·引物第22-23页
   ·方法第23-29页
     ·总 RNA 的提取第23页
     ·EST 序列分析获取目的基因片段第23页
     ·SMART-RACE 技术克隆目的基因全长第23-24页
     ·割胶纯化目的基因片段第24页
     ·与载体连接第24页
     ·转化第24-25页
     ·单克隆检测第25页
     ·利用生物信息学软件分析目的基因的结构与功能预测第25页
     ·Real-time PCR 检测相关基因在性腺不同时相及不同组织中的表达模式第25-26页
     ·原位杂交技术检测细胞周期相关基因在生殖细胞中的表达与定位第26-29页
第3章 CYCLIN-CDK-CKI 及 UPP 系统相关基因的克隆与序列分析第29-68页
   ·总 RNA 的提取第29页
   ·Sp-cdc2 基因序列分析第29-34页
     ·Sp-cdc2 全长 cDNA 序列分析第29-30页
     ·Sp-cdc2 二级结构和空间模拟结构预测第30-31页
     ·Sp-cdc2 与其他物种 cdc2 的比较分析第31-34页
   ·Sp-cycB 基因序列分析第34-41页
     ·Sp-cycB 全长 cDNA 序列分析第34-35页
     ·Sp-cycB 蛋白二级结构预测与空间结构模拟第35-37页
     ·Sp-cycB 与其他物种的多重比对及构建的系统进化树第37-41页
   ·Sp-cycH 基因序列分析第41-46页
     ·Sp-cycH 全长 cDNA 序列分析第41-42页
     ·Sp-cycH 的二级结构和空间模拟结构预测第42-44页
     ·Sp-cycH 与其他物种 cyclin H 的比较分析第44-46页
   ·Sp-CKS1B 基因序列分析第46-49页
     ·Sp-CKS1B 的全长 cDNA 序列分析第46-47页
     ·Sp-CKS1B 二级结构与空间结构模拟第47-48页
     ·Sp-CKS1B 与其他物种相比较第48-49页
   ·Sp-Ub 基因序列分析第49-53页
     ·Sp-Ub 全长 cDNA 序列分析第49-50页
     ·Sp-Ub 二级结构和空间模拟结构预测第50-51页
     ·Sp-Ub 与其他物种的 Ub 相比较第51-53页
   ·Sp-uce2 基因序列分析第53-57页
     ·Sp-uce2 全长 cDNA 序列分析第53-54页
     ·Sp-uce2 二级结构与空间模拟结构预测第54-55页
     ·Sp-uce2 与其他物种 uce2 蛋白相比较第55-57页
   ·Sp-UCHL3 基因序列分析第57-62页
     ·Sp-UCHL3 的全长 cDNA 序列分析第57-58页
     ·Sp-UCHL3 的二级结构与空间模拟结构预测第58-59页
     ·Sp-UCHL3 与其他物种的 UCHL3 的氨基酸相比较第59-62页
   ·Sp-UCHL5 基因的序列分析第62-68页
     ·Sp-UCHL5 全长 cDNA 序列分析第62-63页
     ·Sp-UCHL5 的二级结构及空间模拟结构预测第63-65页
     ·Sp-UCHL5 与其他物种的 UCHL5 的氨基酸比较第65-68页
第4章 CDK-CYCLIN-CKI 及 UPP 系统相关基因的表达特征第68-82页
   ·半定量 PCR 技术检测各基因在不同组织间的表达第68页
   ·荧光定量 PCR 技术检测各基因在不同组织间的表达差异第68-72页
     ·Sp-cdc2 基因在雌蟹个体中不同组织间的表达差异第68-69页
     ·Sp-cycB 基因在雌蟹个体不同组织间的表达差异第69页
     ·Sp-cycH 基因在雌蟹个体不同组织间的表达差异第69-70页
     ·Sp-CKS1B 基因在雌蟹个体不同组织间的表达差异第70页
     ·Sp-Ub 基因在雌蟹个体不同组织间的表达差异第70-71页
     ·Sp-uce2 基因在雌蟹个体不同组织间的表达差异第71页
     ·Sp-UCHL3 基因在雌蟹个体不同组织间的表达差异第71-72页
     ·Sp-UCHL5 基因在雌蟹个体不同组织间的表达差异第72页
   ·各个基因在性腺不同发育时期的表达第72-77页
     ·Sp-cdc2 基因在各个不同时相中的表达分析第72-73页
     ·Sp-cycB 基因在各个不同时相中的表达分析第73页
     ·Sp-cycH 基因在各个不同时相中的表达分析第73-74页
     ·Sp-CKS1B 基因在各个不同时相中的表达分析第74-75页
     ·Sp-Ub 基因在各个不同时相中的表达分析第75页
     ·Sp-uce2 基因在各个不同时相中的表达分析第75-76页
     ·Sp-UCHL3 基因在各个不同时相中的表达分析第76页
     ·Sp-UCHL5 基因在各个不同时相中的表达分析第76-77页
   ·Sp-cdc2 与 Sp-cycB 在性腺中的定位表达研究第77-82页
     ·Sp-cdc2 与 Sp-cycB 在精巢中的定位研究第77-78页
     ·Sp-cycB 在卵巢 GSI 为 0.177 时的定位研究第78-79页
     ·Sp-cdc2 与 Sp-cycB 在卵巢 GSI 为 1.650 时的定位表达第79-80页
     ·Sp-cdc2 与 Sp-cycB 在卵巢 GSI 为 4.575 时的定位表达第80-81页
     ·Sp-cdc2 在卵巢 GSI 为 10.912 时的定位表达第81-82页
第5章 讨论第82-93页
   ·Cyclin-CDK-CKI 系统第82-88页
     ·Sp-cdc2 和 Sp-cycB 基因第82-86页
     ·Sp-cycH 基因第86-87页
     ·Sp-CKS1B 基因第87-88页
   ·UPP 系统第88-90页
     ·Sp-Ub 和 Sp-uce2 基因第88-89页
     ·Sp-UCHL3 和 Sp-UCHL5 基因第89-90页
   ·Cyclin-CDK-CKI 和 UPP 系统之间的关系第90-93页
第6章 结论和展望第93-95页
   ·结论第93-94页
   ·展望第94-95页
致谢第95-96页
参考文献第96-102页
在学期间发表的学术论文和研究成果第102页

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