摘要 | 第1-8页 |
ABSTRACT | 第8-13页 |
文献综述 | 第13-32页 |
第一章 猪圆环病毒研究进展 | 第13-23页 |
·病毒及相关疾病 | 第13-14页 |
·病毒基因组 | 第14-15页 |
·病毒蛋白 | 第15-16页 |
·PCV 的转录 | 第16-17页 |
·病毒进入细胞 | 第17-19页 |
·PCV 的复制 | 第19-20页 |
·病毒与宿主的相互作用 | 第20-22页 |
·小结 | 第22-23页 |
第二章 猪圆环病毒 2 型疫苗研究进展 | 第23-32页 |
·商品化疫苗 | 第24-26页 |
·现有的商品化疫苗 | 第24-25页 |
·现有商品化疫苗的免疫效果 | 第25-26页 |
·实验性疫苗 | 第26-31页 |
·以 RNA 为基础的抗病毒疗法 | 第26页 |
·改良减毒活疫苗 | 第26-28页 |
·DNA 疫苗 | 第28页 |
·载体疫苗 | 第28-30页 |
·标记疫苗 | 第30-31页 |
·展望 | 第31-32页 |
试验研究 | 第32-66页 |
第三章 嵌合型猪圆环病毒(PCV1-2b)的构建及增殖特性研究 | 第32-44页 |
·材料 | 第33-34页 |
·病毒和细胞 | 第33页 |
·主要试剂和抗体 | 第33页 |
·主要仪器 | 第33页 |
·主要溶液及培养基的配制 | 第33-34页 |
·方法 | 第34-36页 |
·总 RNA 的提取 | 第34页 |
·嵌合质粒 PCV1-2b 在 PK-15 细胞中的转染 | 第34页 |
·间接免疫荧光(IFA)检测嵌合病毒 | 第34-35页 |
·PCR检测嵌合病毒 | 第35页 |
·嵌合病毒的透射电镜(TEM)观察 | 第35页 |
·Western blot检测嵌合病毒 Cap 蛋白的表达 | 第35页 |
·嵌合病毒在不同细胞上的增殖差异 | 第35-36页 |
·氯化铵对病毒增殖效果的影响 | 第36页 |
·结果 | 第36-41页 |
·转染后细胞形态变化 | 第36页 |
·间接免疫荧光(IFA)检测嵌合病毒 | 第36页 |
·PCR检测嵌合病毒 | 第36-38页 |
·嵌合病毒的透射电镜观察 | 第38页 |
·Westen blot检测嵌合病毒 Cap 蛋白的表达 | 第38-39页 |
·嵌合病毒在不同细胞上的增殖差异 | 第39-40页 |
·氯化铵对病毒增殖效果的影响 | 第40-41页 |
·讨论 | 第41-43页 |
·小结 | 第43-44页 |
第四章 猪圆环病毒1型和2型a与b基因型三重PCR鉴别方法的建立及应用 | 第44-55页 |
·材料 | 第45页 |
·病毒、菌株、载体和细胞 | 第45页 |
·主要试剂及试剂盒 | 第45页 |
·主要仪器 | 第45页 |
·主要溶液及培养基的配制 | 第45页 |
·方法 | 第45-47页 |
·引物设计与合成 | 第45-46页 |
·模板制备 | 第46页 |
·单PCR扩增 | 第46页 |
·PCR产物的鉴定 | 第46-47页 |
·单PCR敏感性、特异性试验 | 第47页 |
·双重PCR扩增条件的优化 | 第47页 |
·三重PCR扩增条件的优化 | 第47页 |
·三重PCR的敏感性、特异性试验、重复性试验 | 第47页 |
·临床样品检测 | 第47页 |
·结果 | 第47-53页 |
·单重PCR扩增结果 | 第47-48页 |
·PCR产物的鉴定 | 第48页 |
·单PCR敏感性、特异性试验结果 | 第48-49页 |
·双重PCR扩增条件的优化结果 | 第49-50页 |
·三重PCR扩增条件的优化 | 第50-51页 |
·三重PCR的敏感性、特异性试验、重复性试验 | 第51-52页 |
·临床样品的检测结果 | 第52-53页 |
·讨论 | 第53-54页 |
·小结 | 第54-55页 |
第五章 PCV2 新转录产物的表达及其功能的初步研究 | 第55-66页 |
·材料 | 第55-56页 |
·菌株和载体 | 第55页 |
·主要试剂及抗体 | 第55-56页 |
·主要仪器 | 第56页 |
·方法 | 第56-58页 |
·真核表达载体 GFP-ORF5 和 GFP-ORF6 的构建 | 第56-57页 |
·重组质粒的细胞转染与鉴定 | 第57-58页 |
·ORF5与OFR6蛋白过表达后细胞凋亡影响的初步研究 | 第58页 |
·结果 | 第58-63页 |
·PCV2 ORF与ORF6的PCR扩增 | 第58-59页 |
·重组质粒的鉴定 | 第59-60页 |
·重组质粒的细胞转染 | 第60-61页 |
·重组质粒表达产物的RT-PCR鉴定 | 第61-62页 |
·表达产物的 Western blot 鉴定 | 第62页 |
·ORF5与OFR6蛋白过表达后对细胞凋亡影响的初步研究 | 第62-63页 |
·讨论 | 第63-64页 |
·小结 | 第64-66页 |
结论 | 第66-67页 |
参考文献 | 第67-77页 |
缩略词 | 第77-78页 |
致谢 | 第78-79页 |
作者简介 | 第79页 |