| 缩略词表 | 第1-7页 |
| 中文摘要 | 第7-9页 |
| 英文摘要 | 第9-12页 |
| 前言 | 第12-16页 |
| 一 全沟硬蜱复合组Salp15蛋白超家族的多样性 | 第16-30页 |
| ·全沟硬蜱Salp15编码序列的扩增 | 第16-20页 |
| ·材料 | 第16页 |
| ·方法 | 第16-20页 |
| ·全沟硬蜱唾液腺蛋白Salp15 CDS序列扩增引物设计 | 第17页 |
| ·全沟硬蜱叮咬 | 第17-18页 |
| ·半饱血蜱RNA提取 | 第18页 |
| ·聚合酶链式反应扩增目的基因及克隆 | 第18-20页 |
| ·实验结果 | 第20-24页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳检测全沟硬蜱RNA | 第20-21页 |
| ·Salp15 目的片段的扩增和克隆 | 第21-24页 |
| ·讨论 | 第24-30页 |
| ·硬蜱属蜱类Salp15蛋白的多样性 | 第24-29页 |
| ·全沟硬蜱Salp15蛋白家族在转录水平上的多样性 | 第29页 |
| ·全沟硬蜱Salp15蛋白Ipers-5 | 第29-30页 |
| 二 Salp15蛋白Ipers-5融合蛋白表达体系建立及优化 | 第30-44页 |
| ·材料 | 第30-33页 |
| ·方法 | 第33-38页 |
| ·表达载体构建 | 第33-35页 |
| ·诱导表达融合蛋白 | 第35-36页 |
| ·融合蛋白的纯化 | 第36-37页 |
| ·酶切重组蛋白,去MBP标签蛋白 | 第37页 |
| ·纯化去标签的融合蛋白 | 第37-38页 |
| ·Western-blotting | 第38页 |
| ·结果 | 第38-43页 |
| ·阳性克隆鉴定结果 | 第38-39页 |
| ·融合蛋白的表达 | 第39-41页 |
| ·融合蛋白纯化 | 第41-42页 |
| ·Western-blotting分析融合蛋白 | 第42页 |
| ·融合蛋白去标签并纯化 | 第42-43页 |
| ·讨论 | 第43-44页 |
| 三 Salp15家族蛋白对莱姆病螺旋体Borrelia burgdorferi(B31)、Borreliagarnii(VH7)感染的拮抗作用 | 第44-58页 |
| 1 实时荧光定量检测螺旋体方法的建立 | 第44-52页 |
| ·材料 | 第44页 |
| ·方法 | 第44-47页 |
| ·菌种的培养与保存 | 第44页 |
| ·螺旋体基因组提取 | 第44-45页 |
| ·小鼠血液基因组提取 | 第45页 |
| ·莱姆病螺旋体目的基因Flagellin扩增 | 第45-46页 |
| ·Borrelia garinii目的基因扩增 | 第45页 |
| ·Borrelia burgdorferi目的基因扩增 | 第45-46页 |
| ·Taqman法荧光定量PCR绘制Flagellin基因标准曲线 | 第46页 |
| ·Taqman法荧光定量PCR绘制小鼠的β-actin基因标准曲线 | 第46-47页 |
| ·结果 | 第47-51页 |
| ·螺旋体鞭毛蛋白基因的扩增 | 第47-48页 |
| ·两株螺旋体鞭毛蛋白目的基因片段标准曲线生成 | 第48-50页 |
| ·小鼠β-actin基因片段的扩增 | 第50-51页 |
| ·讨论 | 第51-52页 |
| 2 全沟硬蜱Salp15蛋白Ipers-5对莱姆病螺旋体传播阻断效应 | 第52-58页 |
| ·材料 | 第52页 |
| ·方法 | 第52-54页 |
| ·Salp15免疫C3H小鼠的实验方案 | 第52页 |
| ·间接酶联免疫吸附实验(ELISA)检测抗体效价 | 第52-53页 |
| ·感染螺旋体 | 第53-54页 |
| ·随机分组小鼠 | 第53页 |
| ·腹腔注射感染小鼠 | 第53页 |
| ·感染蜱叮咬小鼠 | 第53-54页 |
| ·qPCR定量检测螺旋体感染量 | 第54页 |
| ·结果 | 第54-57页 |
| ·小鼠抗体效价检测 | 第54页 |
| ·普通PCR检测螺旋体结果 | 第54-55页 |
| ·相对荧光定量法检测结果 | 第55-57页 |
| ·讨论 | 第57-58页 |
| 结论 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-66页 |
| 综述 | 第66-77页 |
| References | 第73-77页 |
| 附录 | 第77-79页 |
| 附录1 本人简历 | 第77-78页 |
| 附录2 在学期间研究成果目录 | 第78-79页 |
| 致谢 | 第79-80页 |
