摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-9页 |
第1章 绪论 | 第9-15页 |
·萜类合酶研究进展 | 第9-13页 |
·萜类化合物简介 | 第9页 |
·萜类合酶简介 | 第9-10页 |
·萜类合酶的催化机制 | 第10-11页 |
·萜类合酶的研究进展 | 第11-13页 |
·青蒿紫穗槐二烯合酶研究进展 | 第13-15页 |
·紫穗槐二烯合酶基因的克隆 | 第13-14页 |
·紫穗槐二烯合酶的特性 | 第14页 |
·紫穗槐二烯合酶的催化机制 | 第14-15页 |
第2章 实验材料、试剂和技术 | 第15-24页 |
·菌种和质粒 | 第15页 |
·试剂与仪器 | 第15-18页 |
·主要试剂 | 第15-17页 |
·主要实验仪器 | 第17-18页 |
·实验技术 | 第18-24页 |
·大肠杆菌感受态细胞的制备(CaCl法) | 第18-19页 |
·质粒DNA的转化 | 第19页 |
·质粒的提取 | 第19-20页 |
·PCR反应 | 第20页 |
·DNA的酶切和连接反应 | 第20-21页 |
·限制性内切酶酶切片段或PCR扩增片段的回收(回收试剂盒) | 第21页 |
·蛋白质的纯化反应 | 第21-22页 |
·蛋白质的体外催化反应和GC MS分析 | 第22页 |
·快速定点突变 | 第22-24页 |
第3章 青蒿紫穗槐二烯合酶N-末端截短和保守氨基酸突变 | 第24-36页 |
·青蒿紫穗槐二烯合酶N末端截短 | 第24-30页 |
·材料和试剂 | 第24页 |
·方法 | 第24-26页 |
·结果 | 第26-30页 |
·ADS N末端保守氨基酸的定点突变 | 第30-34页 |
·材料和试剂 | 第31页 |
·方法 | 第31-32页 |
·结果 | 第32-34页 |
·讨论 | 第34-36页 |
第4章 青蒿紫穗槐二烯合酶Glycine-439点突变 | 第36-42页 |
·实验材料与方法 | 第36-37页 |
·材料和试剂 | 第36页 |
·方法 | 第36-37页 |
·结果 | 第37-40页 |
·突变质粒的测序验证 | 第37-38页 |
·突变质粒表达产物的电泳检测 | 第38页 |
·突变体的功能鉴定 | 第38-40页 |
·讨论 | 第40-42页 |
结语 | 第42-43页 |
参考文献 | 第43-49页 |
致谢 | 第49页 |