致谢 | 第1-8页 |
中文摘要 | 第8-10页 |
1 文献综述 | 第10-25页 |
·Lpin1 基因国内外研究现状分析 | 第10-16页 |
·Lpin1 基因的发现 | 第10页 |
·Lpin1 基因的不同剪接产物 | 第10-11页 |
·Lpin1 基因家族的结构 | 第11页 |
·Lpin1基因是一种Mg2+依赖性磷脂酸(PA)磷酸化酶基因 | 第11页 |
·Lpin1 基因表达量对脂肪沉积的影响 | 第11-12页 |
·Lpin1 基因对甘油三酯含量的影响及对其代谢的调控 | 第12页 |
·Lpin1 基因与脂肪代谢相关基因间的调控 | 第12-14页 |
·Lpin1 基因及不同其剪接形式在人和鼠中的表达情况 | 第14-15页 |
·Lpin1 基因的变异效应研究 | 第15-16页 |
·真核生物基因可变剪接的调控机制 | 第16-18页 |
·可变剪接的概念 | 第16页 |
·可变剪接的类型 | 第16-17页 |
·可变剪接的机理 | 第17-18页 |
·可变剪接的生物学意义 | 第18页 |
·荧光定量PCR 技术 | 第18-23页 |
·荧光定量PCR 原理 | 第18页 |
·荧光探针的种类及其作用原理 | 第18-20页 |
·SYBR GreenⅠ | 第18-19页 |
·水解探针或TaqMan 探针 | 第19页 |
·杂交探针 | 第19页 |
·分子信标(molecular beacon) | 第19页 |
·Scorpions | 第19-20页 |
·荧光定量PCR 的定量方法 | 第20页 |
·荧光定最PCR 技术的优点 | 第20-21页 |
·荧光定量PCR 技术的应用 | 第21-23页 |
·病原微生物检测 | 第21-22页 |
·肿瘤研究 | 第22页 |
·基因表达研究 | 第22页 |
·基因突变分析 | 第22-23页 |
·SNPs 检测研究方法 | 第23-24页 |
·直接测序 | 第23页 |
·单链构象多态性 | 第23页 |
·限制性片段长度多态性 | 第23-24页 |
·创造酶切位点 | 第24页 |
·基因芯片 | 第24页 |
·研究的目的和意义 | 第24-25页 |
2 引言 | 第25-26页 |
3 鸡Lpin1 基因不同剪接体的鉴定及表达特性研究 | 第26-49页 |
·试验材料 | 第26-27页 |
·试验动物 | 第26页 |
·主要试剂以及配置 | 第26页 |
·工具酶及试剂盒 | 第26-27页 |
·主要仪器 | 第27页 |
·试验方法 | 第27-33页 |
·PCR 引物设计与合成 | 第27页 |
·总RNA 的提取 | 第27-28页 |
·RNA 浓度的测定 | 第28-29页 |
·反转录反应 | 第29页 |
·普通PCR 反应 | 第29-30页 |
·琼脂糖凝胶电泳检测 | 第30页 |
·胶回收 | 第30-31页 |
·基因克隆 | 第31-32页 |
·连接反应体系 | 第31页 |
·DNA 的转化 | 第31页 |
·菌液PCR 鉴定 | 第31-32页 |
·DNA 测序 | 第32页 |
·荧光定量PCR 反应 | 第32-33页 |
·荧光定量PCR 试验设计 | 第32页 |
·荧光定量PCR 反应操作步骤 | 第32-33页 |
·荧光定量PCR 反应结果分析 | 第33页 |
·数据分析 | 第33页 |
·结果与分析 | 第33-46页 |
·总RNA 提取 | 第33-34页 |
·用持家基因β-actin 引物进行RT-PCR 检测cDNA 的质量 | 第34页 |
·鸡Lpin1 基因的扩增及可变剪接形式的鉴定 | 第34-37页 |
·鸡Lpin1 基因的扩增及回收 | 第34-35页 |
·鸡Lpin1 基因克隆检测 | 第35页 |
·测序结果分析 | 第35-37页 |
·鸡Lpin1基因及其不同剪接体在不同品种鸡,不同组织的表达情况研究 | 第37-42页 |
·半定量结果分析 | 第37页 |
·荧光定量结果分析 | 第37-42页 |
·Lpin1 基因及其不同剪接体在丝毛乌骨鸡不同生长发育期的表达情况 | 第42-44页 |
·Lpin1 基因及其不同剪接体在能量限制组与自由采食组的表达情况 | 第44-46页 |
·讨论与结论 | 第46-49页 |
·鸡Lpin1 基因的研究现状 | 第46页 |
·鸡Lpin1 基因可变剪接形式的鉴定及其与其它物种的比较 | 第46页 |
·Lpin1 基因在鸡与其他物种的表达情况 | 第46-49页 |
4 鸡Lpin1 基因侧翼区遗传变异及其与性状关联分析 | 第49-69页 |
·试验材料 | 第49-50页 |
·试验样品 | 第49页 |
·工具酶及试剂盒 | 第49页 |
·主要试剂配制 | 第49-50页 |
·主要仪器 | 第50页 |
·试验方法 | 第50-53页 |
·PCR 引物的设计与合成 | 第50页 |
·鸡血液DNA 的提取 | 第50-51页 |
·鸡组织样RNA 的提取 | 第51页 |
·反转录反应 | 第51页 |
·PCR 扩增 | 第51-52页 |
·克隆测序 | 第52页 |
·扩增产物的RFLP | 第52-53页 |
·扩增产物的PAGE 胶检验 | 第53页 |
·图像分析 | 第53页 |
·测序验证 | 第53页 |
·数据统计分析 | 第53页 |
·结果分析 | 第53-67页 |
·鸡Lpin1 基因3′UTR 变异位点研究 | 第53-62页 |
·鸡Lpin1 基因3′UTR 变异位点检测 | 第54页 |
·鸡 Lpin1 基因各变异位点的基因型频率和等位基因频率在品种间的分布 | 第54-55页 |
·鸡Lpin1 基因3′UTR 变异位点单倍型构建和分析 | 第55-56页 |
·鸡Lpin1 基因3′UTR 区域miRNA 结合位点预测 | 第56-57页 |
·PCR-RFLP 检测C77G 变异在固始鸡资源群的分布 | 第57-58页 |
·鸡Lpin1 基因C77G 变异基因型频率和等位基因频率统计 | 第58页 |
·鸡Lpin1 基因C77G 变异与资源群部分经济性状的关联分析 | 第58-61页 |
·鸡Lpin1 基因C77G 变异位点的不同基因型间表达比较 | 第61-62页 |
·鸡Lpin1 基因5′UTR 变异位点研究 | 第62-67页 |
·鸡Lpin1 基因5′UTR 变异位点的检测 | 第62-63页 |
·引物Lp12 的扩增结果 | 第63页 |
·Lp12 扩增产物的PAGE 胶检测结果 | 第63-64页 |
·鸡Lpin1 基因MNLP 变异基因型频率和等位基因频率统计 | 第64页 |
·鸡Lpin1 基因MNLP 变异与部分经济性状的关联分析 | 第64-67页 |
·讨论与结论 | 第67-69页 |
·Lpin1 基因多态性研究 | 第67页 |
·鸡Lpin1 基因非编码区多态性研究 | 第67-68页 |
·鸡Lpin1 基因非编码区多态性与肌纤维特性的相关性分析 | 第68页 |
·鸡Lpin1 基因非编码区多态性与血液生化指标的相关性分析 | 第68-69页 |
5 总结 | 第69-71页 |
参考文献 | 第71-78页 |
Abstract | 第78-80页 |
附录 | 第80-83页 |