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鸡Lpin1基因的可变剪接体表达特性及基因侧翼区变异的效应研究

致谢第1-8页
中文摘要第8-10页
1 文献综述第10-25页
   ·Lpin1 基因国内外研究现状分析第10-16页
     ·Lpin1 基因的发现第10页
     ·Lpin1 基因的不同剪接产物第10-11页
     ·Lpin1 基因家族的结构第11页
     ·Lpin1基因是一种Mg2+依赖性磷脂酸(PA)磷酸化酶基因第11页
     ·Lpin1 基因表达量对脂肪沉积的影响第11-12页
     ·Lpin1 基因对甘油三酯含量的影响及对其代谢的调控第12页
     ·Lpin1 基因与脂肪代谢相关基因间的调控第12-14页
     ·Lpin1 基因及不同其剪接形式在人和鼠中的表达情况第14-15页
     ·Lpin1 基因的变异效应研究第15-16页
   ·真核生物基因可变剪接的调控机制第16-18页
     ·可变剪接的概念第16页
     ·可变剪接的类型第16-17页
     ·可变剪接的机理第17-18页
     ·可变剪接的生物学意义第18页
   ·荧光定量PCR 技术第18-23页
     ·荧光定量PCR 原理第18页
     ·荧光探针的种类及其作用原理第18-20页
       ·SYBR GreenⅠ第18-19页
       ·水解探针或TaqMan 探针第19页
       ·杂交探针第19页
       ·分子信标(molecular beacon)第19页
       ·Scorpions第19-20页
     ·荧光定量PCR 的定量方法第20页
     ·荧光定最PCR 技术的优点第20-21页
     ·荧光定量PCR 技术的应用第21-23页
       ·病原微生物检测第21-22页
       ·肿瘤研究第22页
       ·基因表达研究第22页
       ·基因突变分析第22-23页
   ·SNPs 检测研究方法第23-24页
     ·直接测序第23页
     ·单链构象多态性第23页
     ·限制性片段长度多态性第23-24页
     ·创造酶切位点第24页
     ·基因芯片第24页
   ·研究的目的和意义第24-25页
2 引言第25-26页
3 鸡Lpin1 基因不同剪接体的鉴定及表达特性研究第26-49页
   ·试验材料第26-27页
     ·试验动物第26页
     ·主要试剂以及配置第26页
     ·工具酶及试剂盒第26-27页
     ·主要仪器第27页
   ·试验方法第27-33页
     ·PCR 引物设计与合成第27页
     ·总RNA 的提取第27-28页
     ·RNA 浓度的测定第28-29页
     ·反转录反应第29页
     ·普通PCR 反应第29-30页
     ·琼脂糖凝胶电泳检测第30页
     ·胶回收第30-31页
     ·基因克隆第31-32页
       ·连接反应体系第31页
       ·DNA 的转化第31页
       ·菌液PCR 鉴定第31-32页
       ·DNA 测序第32页
     ·荧光定量PCR 反应第32-33页
       ·荧光定量PCR 试验设计第32页
       ·荧光定量PCR 反应操作步骤第32-33页
       ·荧光定量PCR 反应结果分析第33页
     ·数据分析第33页
   ·结果与分析第33-46页
     ·总RNA 提取第33-34页
     ·用持家基因β-actin 引物进行RT-PCR 检测cDNA 的质量第34页
     ·鸡Lpin1 基因的扩增及可变剪接形式的鉴定第34-37页
       ·鸡Lpin1 基因的扩增及回收第34-35页
       ·鸡Lpin1 基因克隆检测第35页
       ·测序结果分析第35-37页
       ·鸡Lpin1基因及其不同剪接体在不同品种鸡,不同组织的表达情况研究第37-42页
       ·半定量结果分析第37页
       ·荧光定量结果分析第37-42页
     ·Lpin1 基因及其不同剪接体在丝毛乌骨鸡不同生长发育期的表达情况第42-44页
     ·Lpin1 基因及其不同剪接体在能量限制组与自由采食组的表达情况第44-46页
   ·讨论与结论第46-49页
     ·鸡Lpin1 基因的研究现状第46页
     ·鸡Lpin1 基因可变剪接形式的鉴定及其与其它物种的比较第46页
     ·Lpin1 基因在鸡与其他物种的表达情况第46-49页
4 鸡Lpin1 基因侧翼区遗传变异及其与性状关联分析第49-69页
   ·试验材料第49-50页
     ·试验样品第49页
     ·工具酶及试剂盒第49页
     ·主要试剂配制第49-50页
     ·主要仪器第50页
   ·试验方法第50-53页
     ·PCR 引物的设计与合成第50页
     ·鸡血液DNA 的提取第50-51页
     ·鸡组织样RNA 的提取第51页
     ·反转录反应第51页
     ·PCR 扩增第51-52页
     ·克隆测序第52页
     ·扩增产物的RFLP第52-53页
     ·扩增产物的PAGE 胶检验第53页
     ·图像分析第53页
     ·测序验证第53页
     ·数据统计分析第53页
   ·结果分析第53-67页
     ·鸡Lpin1 基因3′UTR 变异位点研究第53-62页
       ·鸡Lpin1 基因3′UTR 变异位点检测第54页
       ·鸡 Lpin1 基因各变异位点的基因型频率和等位基因频率在品种间的分布第54-55页
       ·鸡Lpin1 基因3′UTR 变异位点单倍型构建和分析第55-56页
       ·鸡Lpin1 基因3′UTR 区域miRNA 结合位点预测第56-57页
       ·PCR-RFLP 检测C77G 变异在固始鸡资源群的分布第57-58页
       ·鸡Lpin1 基因C77G 变异基因型频率和等位基因频率统计第58页
       ·鸡Lpin1 基因C77G 变异与资源群部分经济性状的关联分析第58-61页
       ·鸡Lpin1 基因C77G 变异位点的不同基因型间表达比较第61-62页
     ·鸡Lpin1 基因5′UTR 变异位点研究第62-67页
       ·鸡Lpin1 基因5′UTR 变异位点的检测第62-63页
       ·引物Lp12 的扩增结果第63页
       ·Lp12 扩增产物的PAGE 胶检测结果第63-64页
       ·鸡Lpin1 基因MNLP 变异基因型频率和等位基因频率统计第64页
       ·鸡Lpin1 基因MNLP 变异与部分经济性状的关联分析第64-67页
   ·讨论与结论第67-69页
     ·Lpin1 基因多态性研究第67页
     ·鸡Lpin1 基因非编码区多态性研究第67-68页
     ·鸡Lpin1 基因非编码区多态性与肌纤维特性的相关性分析第68页
     ·鸡Lpin1 基因非编码区多态性与血液生化指标的相关性分析第68-69页
5 总结第69-71页
参考文献第71-78页
Abstract第78-80页
附录第80-83页

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