| 摘要 | 第1-10页 |
| ABSTRACT | 第10-13页 |
| 缩略语表 | 第13-16页 |
| 文献综述 | 第16-46页 |
| 第一章 猪流行性乙型脑炎的研究进展 | 第16-34页 |
| 1 猪流行性乙型脑炎分子生物学特征 | 第16-18页 |
| ·病原学特征 | 第16-17页 |
| ·流行病学特征 | 第17-18页 |
| ·临床症状和病理变化特征 | 第18页 |
| 2 猪流行性乙型脑炎病毒基因组的结构特征 | 第18-22页 |
| ·结构蛋白 | 第19-20页 |
| ·非结构蛋白 | 第20-22页 |
| 3 流行性乙型脑炎病毒的分类和分型 | 第22-23页 |
| 4 流行性乙型脑炎病毒的毒力和致病机理 | 第23-24页 |
| ·流行性乙型脑炎病毒的毒力影响因素 | 第23-24页 |
| ·流行性乙型脑炎病毒的致病机理 | 第24页 |
| 5 流行性乙型脑炎病毒的诊断方法 | 第24-27页 |
| ·临床诊断 | 第24页 |
| ·病原学诊断 | 第24-25页 |
| ·血清学诊断 | 第25-26页 |
| ·分子生物学检测 | 第26-27页 |
| 6 流行性乙型脑炎病毒疫苗的研究进展 | 第27-30页 |
| ·灭活疫苗 | 第27-28页 |
| ·减毒活疫苗 | 第28页 |
| ·基因工程疫苗 | 第28-30页 |
| ·流行性乙型脑炎疫苗的发展方向 | 第30页 |
| 7 猪流行性乙型脑炎的综合防治措施 | 第30-34页 |
| ·预防措施 | 第30-31页 |
| ·治疗措施 | 第31-34页 |
| 第二章 衣壳蛋白靶向核酸酶灭活技术的研究进展 | 第34-38页 |
| 1 CTVI的提出 | 第34-35页 |
| 2 CTVI策略的特点和优越性 | 第35页 |
| ·该融合蛋白是以蛋白质的形式存在 | 第35页 |
| ·可以诱导机体产生免疫反应 | 第35页 |
| ·所选蛋白为衣壳蛋白 | 第35页 |
| 3 用于CTVI的核酸酶 | 第35-37页 |
| ·SNase | 第36页 |
| ·Barnase | 第36页 |
| ·RNaseH I | 第36页 |
| ·APOBEC3G | 第36-37页 |
| 4 CTVI的应用 | 第37-38页 |
| 参考文献 | 第38-46页 |
| 实验部分 | 第46-86页 |
| 第一章 猪乙型脑炎病毒EDⅢ蛋白间接ELISA方法的建立及在宠物犬猫中的流行病学调查 | 第46-58页 |
| 摘要 | 第46页 |
| Abstract | 第46-48页 |
| 1 材料与方法 | 第48-50页 |
| ·材料 | 第48页 |
| ·方法 | 第48-50页 |
| 2 结果与分析 | 第50-55页 |
| ·乙型脑炎EDⅢ-ELISA方法的建立 | 第50-54页 |
| ·各地犬猫血清样品的检测 | 第54-55页 |
| 3 讨论 | 第55-57页 |
| ·乙型脑炎EDⅢ蛋白抗原间接ELISA方法的建立 | 第55页 |
| ·乙型脑炎抗原间接ELISA方法的评价 | 第55-56页 |
| ·犬猫JEV流行病学调査 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-58页 |
| 第二章 猪乙型脑炎病毒衣壳蛋白靶向核酸酶表达系统的建立及鉴定 | 第58-74页 |
| 摘要 | 第58页 |
| Abstract | 第58-60页 |
| 1 材料与方法 | 第60-63页 |
| ·病毒、质粒与细胞 | 第60页 |
| ·抗体 | 第60页 |
| ·工具酶和主要试剂 | 第60页 |
| ·引物的设计与合成 | 第60-61页 |
| ·重组表达载体的构建 | 第61页 |
| ·转染 | 第61页 |
| ·融合蛋白的鉴定 | 第61-62页 |
| ·核酸酶活性分析 | 第62页 |
| ·稳定表达C.JEV-SN的细胞系的抗病毒效果 | 第62页 |
| ·统计学分析 | 第62-63页 |
| 2 结果 | 第63-69页 |
| ·重组表达质粒pcDNA-C-SN的构建 | 第63-64页 |
| ·G418压力筛选稳定表达融合蛋白C.JEV-SN的BHK细胞系 | 第64-65页 |
| ·表达的融合蛋白C.JEV-SN的核酸酶活性分析 | 第65-66页 |
| ·稳定表达C.JEV-SN细胞系的抗病毒效果 | 第66-69页 |
| 3 讨论 | 第69-71页 |
| 参考文献 | 第71-74页 |
| 第三章 猪流行性乙型脑炎衣壳蛋白及葡萄球菌核酸酶融合蛋白的原核表达及其抗血清制备 | 第74-86页 |
| 摘要 | 第74页 |
| Abstract | 第74-76页 |
| 1 材料与方法 | 第76-80页 |
| ·菌种、质粒和小鼠 | 第76页 |
| ·试剂 | 第76-77页 |
| ·引物设计 | 第77页 |
| ·乙脑病毒衣壳蛋白及葡萄球菌核酸酶的融合基因的获得 | 第77-78页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第78-79页 |
| ·重组质粒的诱导表达 | 第79页 |
| ·融合蛋白的Western blot分析 | 第79页 |
| ·目的蛋白切胶免疫小鼠制备多克隆抗体 | 第79页 |
| ·Western blot鉴定血清抗Cap蛋白效果 | 第79-80页 |
| 2 结果 | 第80-83页 |
| ·重组原核表达质粒构建 | 第80页 |
| ·重组质粒pCold-PTD-C.JEV-SN的表达 | 第80-81页 |
| ·融合蛋白的Western blot结果 | 第81-82页 |
| ·抗血清的特异性检测 | 第82-83页 |
| 3 讨论 | 第83-84页 |
| 参考文献 | 第84-86页 |
| 全文总结 | 第86-90页 |
| 1 日本乙型脑炎病毒EDⅢ蛋白间接ELISA方法的建立 | 第86-87页 |
| 2 犬猫血清样品的JEV流行病学调查 | 第87页 |
| 3 猪乙型脑炎病毒衣壳蛋白靶向核酸酶表达系统的建立及鉴定 | 第87-88页 |
| 4 猪流行性乙型脑炎衣壳蛋白及葡萄球菌核酸酶融合蛋白的原核表达及其抗血清制备 | 第88-90页 |
| 附录 | 第90-96页 |
| 1 SDS-PAGE中主要试剂的配制 | 第90-91页 |
| 2 ELISA中主要试剂的配制 | 第91-92页 |
| 3 Western blot分析中主要溶液的配制 | 第92-93页 |
| 4 细胞培养中所用溶液的配制 | 第93-94页 |
| 5 蚀斑实验的所用试剂的配制 | 第94页 |
| 6 其它常用试剂的配制 | 第94-96页 |
| 致谢 | 第96页 |
