| 中文摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-11页 |
| 引言 | 第11-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-28页 |
| 1 几丁质水解酶研究概况 | 第12-18页 |
| ·几丁质 | 第12页 |
| ·几丁质酶 | 第12-14页 |
| ·β-N-乙酰葡萄糖苷酶 | 第14-18页 |
| 2 昆虫Β-N-乙酰葡萄糖苷酶的研究进展 | 第18-20页 |
| ·已克隆的β-N-乙酰葡萄糖苷酶 cDNA 种类 | 第18页 |
| ·β-N-乙酰葡萄糖苷酶在昆虫体内的分布及生理功能 | 第18-19页 |
| ·昆虫β-N-乙酰葡萄糖苷酶在防治害虫领域的展望 | 第19页 |
| ·家蚕中β-N-乙酰葡萄糖苷酶的研究进展 | 第19-20页 |
| 3 BAC-TO-BAC 杆状病毒表达系统 | 第20-23页 |
| ·产生重组病毒的方法 | 第21页 |
| ·Bac-to-Bac 杆状病毒表达系统的原理 | 第21-23页 |
| 4 启动子及其研究进展 | 第23-28页 |
| ·启动子的结构特点 | 第24-25页 |
| ·昆虫启动子研究方法 | 第25-26页 |
| ·昆虫启动子研究进展 | 第26-28页 |
| 第二章 家蚕Β-N-乙酰葡萄糖苷酶的氨基酸序列的比对及进化树分析 | 第28-33页 |
| 1 引言 | 第28-29页 |
| 2 材料和方法 | 第29页 |
| 3 结果 | 第29-31页 |
| ·BmGlcNAcases 的氨基酸序列的比对及进化树分析 | 第29-31页 |
| 4 讨论 | 第31-33页 |
| 第三章 蜕皮激素诱导Β-N-乙酰葡萄糖苷酶基因的表达变化 | 第33-42页 |
| 1 引言 | 第33-34页 |
| 2 材料和方法 | 第34-36页 |
| ·材料及主要试剂 | 第34页 |
| ·实验方法 | 第34-36页 |
| 3 结果与分析 | 第36-41页 |
| ·β-N-乙酰葡萄糖苷酶基因在家蚕不同组织中的表达水平 | 第36-38页 |
| ·表皮中β-N-乙酰葡萄糖苷酶基因在不同时期的表达变化 | 第38-39页 |
| ·蜕皮激素诱导后β-N-乙酰葡萄糖苷酶基因的表达变化 | 第39-41页 |
| 4 讨论 | 第41-42页 |
| 第四章 家蚕Β-N-乙酰葡萄糖苷酶基因启动子在家蚕组织中的活性研究 | 第42-55页 |
| 1 引言 | 第42-43页 |
| 2 材料和方法 | 第43-50页 |
| ·材料及主要试剂 | 第43页 |
| ·家蚕 BmGlcNAcase1 基因启动子的克隆 | 第43-44页 |
| ·重组质粒的构建 | 第44-45页 |
| ·重组质粒转化 DH10Bac△EGT 感受态细胞 | 第45-46页 |
| ·Bacmid DNA 的抽提 | 第46页 |
| ·重组 Bacmid 的鉴定和纯化 | 第46-47页 |
| ·昆虫细胞的培养 | 第47-48页 |
| ·Bacmid 转染 Sf9 培养细胞 | 第48页 |
| ·病毒的大量扩增 | 第48页 |
| ·大量扩增病毒的纯化 | 第48-49页 |
| ·病毒滴度的测定 | 第49页 |
| ·病毒的接种 | 第49-50页 |
| ·细胞水平测荧光强度的测定 | 第50页 |
| ·家蚕组织解剖及样品处理 | 第50页 |
| 3 结果 | 第50-54页 |
| ·BmGlcNAcase1 基因启动子 TA 克隆结果 | 第50-51页 |
| ·重组转移载体质粒的构建 | 第51页 |
| ·重组 Bacmid 的鉴定 | 第51-52页 |
| ·家蚕不同组织中 BmGlcNAcase1 顺次缺失启动子的活性分析 | 第52-54页 |
| 4 讨论 | 第54-55页 |
| 第五章 家蚕Β-N-乙酰葡萄糖苷酶基因中心启动子的研究 | 第55-61页 |
| 1 引言 | 第55页 |
| 2 材料和方法 | 第55-58页 |
| ·材料及主要试剂 | 第55-56页 |
| ·BmGlcNAcase1 基因启动子的克隆 | 第56页 |
| ·荧光素酶报告质粒的构建 | 第56-57页 |
| ·细胞转染 | 第57页 |
| ·细胞抽提物制备和双荧光素酶活性检测 | 第57-58页 |
| 3 结果与分析 | 第58-60页 |
| ·BmGlcNAcase1 基因启动子-574 bp~+1bp 的 PCR 扩增 | 第58页 |
| ·BmGlcNAcase1 基因-547 bp~+1bp 启动子报告载体的构建 | 第58-59页 |
| ·BmGlcNAcase1 基因-547 bp~+1bp 启动子片段在家蚕细胞中的转录活性 | 第59-60页 |
| 4 讨论 | 第60-61页 |
| 结论 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-71页 |
| 攻读学位期间公开发表的论文 | 第71-72页 |
| 致谢 | 第72-73页 |
