摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-8页 |
目录 | 第8-10页 |
图表目录 | 第10-12页 |
第一章 文献综述 | 第12-37页 |
·玉米遗传转化研究进展 | 第12-22页 |
·玉米遗传转化方法 | 第13-20页 |
·遗传转化的受体系统 | 第20-22页 |
·植物无选择标记转基因技术研究进展 | 第22-29页 |
·去除选择标记基因的意义 | 第22-23页 |
·无选择标记转基因植株的获得 | 第23-29页 |
·RNAi技术及其在植物中的应用 | 第29-35页 |
·RNA沉默现象 | 第29-30页 |
·RNAi的特点 | 第30-31页 |
·RNA沉默的机理 | 第31页 |
·RNA干扰在植物抗病毒基因工程中的应用 | 第31-34页 |
·外源dsRNA的抗病性研究 | 第34-35页 |
·玉米矮花叶病及粗缩病研究进展 | 第35-37页 |
引言 | 第37-40页 |
第二章 玉米体外应用dsRNA抗SCMV干扰调控技术研究 | 第40-62页 |
·材料与方法 | 第40-52页 |
·实验材料 | 第40页 |
·实验方法 | 第40-52页 |
·结果与分析 | 第52-60页 |
·玉米叶片总RNA的提取 | 第52页 |
·RNA干涉片段的制备 | 第52-53页 |
·pUCCRNAi+F及pUCCRNAi+2F的构建 | 第53-54页 |
·原核表达载体构建LMCP的建立 | 第54页 |
·原核表达载体LMCP dsRNA的诱导表达 | 第54页 |
·dsRNA诱导表达条件的优化 | 第54-55页 |
·dsRNA的稳定性 | 第55-56页 |
·外源dsRNA抗SCMV效果 | 第56-60页 |
·讨论 | 第60-61页 |
·本章小结 | 第61-62页 |
第三章 玉米兼抗甘蔗花叶病毒及粗缩病毒无选择标记RNAi复合表达载体的构建 | 第62-72页 |
·材料与方法 | 第62-66页 |
·材料与试剂 | 第62页 |
·实验方法 | 第62-66页 |
·结果与分析 | 第66-70页 |
·甘蔗花叶病毒cp基因上游片段M1反向重复载体pUCCRNAi+2 F的构建 | 第66-67页 |
·甘蔗花叶病毒cp基因下游片段M2反向重复载体pUCCRNAi+2 F的构建 | 第67-68页 |
·玉米粗缩病毒cp基因上游片段S1及下游片段S2的反向重复载体的构建 | 第68页 |
·中间载体pBluescript+SM的构建 | 第68-69页 |
·无选择标记载体pDTB与Ubiquitin启动子及Nos终止子连接 | 第69页 |
·无选择标记复合表达载体pDTBU SM的构建 | 第69-70页 |
·讨论 | 第70-71页 |
·本章小结 | 第71-72页 |
第四章 农杆菌介导兼抗SCMV和MRDV cp基因RNAi片段转化玉米研究 | 第72-91页 |
·材料与方法 | 第72-80页 |
·材料与试剂 | 第72页 |
·实验方法 | 第72-80页 |
·结果与分析 | 第80-89页 |
·转基因植株的除草剂筛选(T_0代) | 第80-81页 |
·抗性植株的PCR检测(T_1代) | 第81-83页 |
·转基因植株Southern杂交分析 | 第83页 |
·转基因植株cp基因表达量分析 | 第83-86页 |
·诱导时间对转基因植株cp基因表达量的影响(T_2代) | 第86-87页 |
·转基因植株的抗病性检测 | 第87-89页 |
·讨论 | 第89-90页 |
·本章小结 | 第90-91页 |
结论 | 第91-93页 |
参考文献 | 第93-113页 |
附录 | 第113-114页 |
致谢 | 第114-115页 |
作者简介 | 第115-116页 |