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RNAi调控玉米抗甘蔗花叶病毒和粗缩病毒的研究

摘要第1-5页
Abstract第5-8页
目录第8-10页
图表目录第10-12页
第一章 文献综述第12-37页
   ·玉米遗传转化研究进展第12-22页
     ·玉米遗传转化方法第13-20页
     ·遗传转化的受体系统第20-22页
   ·植物无选择标记转基因技术研究进展第22-29页
     ·去除选择标记基因的意义第22-23页
     ·无选择标记转基因植株的获得第23-29页
   ·RNAi技术及其在植物中的应用第29-35页
     ·RNA沉默现象第29-30页
     ·RNAi的特点第30-31页
     ·RNA沉默的机理第31页
     ·RNA干扰在植物抗病毒基因工程中的应用第31-34页
     ·外源dsRNA的抗病性研究第34-35页
   ·玉米矮花叶病及粗缩病研究进展第35-37页
引言第37-40页
第二章 玉米体外应用dsRNA抗SCMV干扰调控技术研究第40-62页
   ·材料与方法第40-52页
     ·实验材料第40页
     ·实验方法第40-52页
   ·结果与分析第52-60页
     ·玉米叶片总RNA的提取第52页
     ·RNA干涉片段的制备第52-53页
     ·pUCCRNAi+F及pUCCRNAi+2F的构建第53-54页
     ·原核表达载体构建LMCP的建立第54页
     ·原核表达载体LMCP dsRNA的诱导表达第54页
     ·dsRNA诱导表达条件的优化第54-55页
     ·dsRNA的稳定性第55-56页
     ·外源dsRNA抗SCMV效果第56-60页
   ·讨论第60-61页
   ·本章小结第61-62页
第三章 玉米兼抗甘蔗花叶病毒及粗缩病毒无选择标记RNAi复合表达载体的构建第62-72页
   ·材料与方法第62-66页
     ·材料与试剂第62页
     ·实验方法第62-66页
   ·结果与分析第66-70页
     ·甘蔗花叶病毒cp基因上游片段M1反向重复载体pUCCRNAi+2 F的构建第66-67页
     ·甘蔗花叶病毒cp基因下游片段M2反向重复载体pUCCRNAi+2 F的构建第67-68页
     ·玉米粗缩病毒cp基因上游片段S1及下游片段S2的反向重复载体的构建第68页
     ·中间载体pBluescript+SM的构建第68-69页
     ·无选择标记载体pDTB与Ubiquitin启动子及Nos终止子连接第69页
     ·无选择标记复合表达载体pDTBU SM的构建第69-70页
   ·讨论第70-71页
   ·本章小结第71-72页
第四章 农杆菌介导兼抗SCMV和MRDV cp基因RNAi片段转化玉米研究第72-91页
   ·材料与方法第72-80页
     ·材料与试剂第72页
     ·实验方法第72-80页
   ·结果与分析第80-89页
     ·转基因植株的除草剂筛选(T_0代)第80-81页
     ·抗性植株的PCR检测(T_1代)第81-83页
     ·转基因植株Southern杂交分析第83页
     ·转基因植株cp基因表达量分析第83-86页
     ·诱导时间对转基因植株cp基因表达量的影响(T_2代)第86-87页
     ·转基因植株的抗病性检测第87-89页
   ·讨论第89-90页
   ·本章小结第90-91页
结论第91-93页
参考文献第93-113页
附录第113-114页
致谢第114-115页
作者简介第115-116页

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