4种转基因玉米液相芯片检测方法的建立
| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-6页 |
| 目录 | 第6-8页 |
| 第1章 前言 | 第8-25页 |
| 1 转基因作物的研究现状 | 第8-9页 |
| ·转基因生物的基本概念 | 第8页 |
| ·转基因作物发展态势 | 第8-9页 |
| 2 转基因作物的生物安全性及产品的标识管理 | 第9-13页 |
| ·转基因作物的安全性问题 | 第10-11页 |
| ·转基因产品的标识管理 | 第11-13页 |
| 3 转基因作物的检测方法研究 | 第13-23页 |
| ·蛋白质检测方法研究 | 第13-15页 |
| ·核酸检测方法研究 | 第15-19页 |
| ·xMAP液相芯片 | 第19-23页 |
| ·其它检测方法研究 | 第23页 |
| 4 本研究的目的和意义 | 第23-25页 |
| 第2章 转基因玉米液相芯片检测方法研究 | 第25-58页 |
| 1 实验材料 | 第25-28页 |
| ·植物材料 | 第25页 |
| ·实验试剂 | 第25页 |
| ·主要仪器及设备 | 第25-26页 |
| ·主要试剂的配制 | 第26-28页 |
| 2 实验方法 | 第28-38页 |
| ·植物基因组DNA的提取及浓度测定 | 第28-29页 |
| ·引物、探针的设计与合成 | 第29-30页 |
| ·引物、探针的稀释 | 第30页 |
| ·单重PCR扩增 | 第30页 |
| ·PCR产物的回收纯化 | 第30-32页 |
| ·目的基因克隆与阳性质粒的构建、测序 | 第32-33页 |
| ·探针与微球的偶联 | 第33页 |
| ·探针偶联效率的验证 | 第33-34页 |
| ·不对称PCR体系的建立及优化 | 第34页 |
| ·液相芯片检测仪的使用和结果判定标准 | 第34-35页 |
| ·杂交及检测 | 第35页 |
| ·液相芯片杂交条件的优化 | 第35-36页 |
| ·五种目标基因液相芯片检测体系的建立 | 第36页 |
| ·特异性实验 | 第36-37页 |
| ·灵敏度实验 | 第37页 |
| ·重复性实验 | 第37-38页 |
| 3 结果与分析 | 第38-53页 |
| ·引物的设计与评价 | 第38页 |
| ·特异性引物的PCR检测结果 | 第38-41页 |
| ·目的基因阳性质粒的制备与鉴定 | 第41-43页 |
| ·色标微球上探针偶联效率的验证 | 第43-46页 |
| ·液相芯片各个条件优化结果 | 第46-49页 |
| ·液相芯片检测体系的建立 | 第49-50页 |
| ·特异性试验 | 第50-51页 |
| ·灵敏度试验 | 第51-52页 |
| ·重复性试验 | 第52-53页 |
| 4 讨论 | 第53-58页 |
| ·引物和探针的设计是液相芯片的关键 | 第54-55页 |
| ·探针与微球的有效偶联是液相杂交的前提 | 第55页 |
| ·液相芯片杂交条件的优化 | 第55-56页 |
| ·芯片制备的质量控制是液相芯片技术的主要保证 | 第56页 |
| ·液相芯片检测结果的判定标准及原则 | 第56页 |
| ·液相芯片检测体系的重复性、特异性和敏感性验证 | 第56-58页 |
| 第3章 结论与小结 | 第58-60页 |
| ·结论 | 第58页 |
| ·创新点 | 第58-59页 |
| ·展望 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-67页 |
| 附录：在读期间发表的学术论文及研究成果 | 第67-68页 |
| 致谢 | 第68页 |
