致谢 | 第1-11页 |
中文摘要 | 第11-13页 |
文献综述 | 第13-22页 |
1 骨髓间充质干细胞的研究进展 | 第13-22页 |
·骨髓间充质干细胞的发现及其命名 | 第13-14页 |
·骨髓间充质干细胞的分离和纯化 | 第14-15页 |
·骨髓间充质干细胞的生物学特性 | 第15-16页 |
·骨髓间充质干细胞的鉴定 | 第16-17页 |
·形态学 | 第16页 |
·BMSCs的表面标志 | 第16-17页 |
·免疫细胞化学技术 | 第17页 |
·流式细胞技术术 | 第17页 |
·骨髓间充质干细胞的多项分化潜能 | 第17-20页 |
·BMSCs向成骨细胞的定向诱导分化 | 第18页 |
·BMSCs向软骨细胞的定向诱导分化 | 第18页 |
·BMSCs向脂肪细胞的定向诱导分化 | 第18页 |
·BMSCs向神经细胞的定向诱导分化 | 第18-19页 |
·BMSCs向肝细胞的定向诱导分化 | 第19页 |
·BMSCs向肌腱组织分化 | 第19页 |
·BMSCs向表皮细胞分化 | 第19页 |
·BMSCs向胰岛细胞分化 | 第19-20页 |
·骨髓间充质干细胞的临床应用中的优点及存在的问题 | 第20-22页 |
·应用前景 | 第20-21页 |
·BMSCs在细胞治疗中的应用 | 第20页 |
·BMSCs在基因治疗中的的应用 | 第20-21页 |
·存在的问题 | 第21-22页 |
试验一 兔骨髓间充质干细胞分离、培养、纯化及鉴定的研究 | 第22-30页 |
引言 | 第22页 |
1 材料与方法 | 第22-25页 |
·试验材料 | 第22-23页 |
·试验动物 | 第22页 |
·主要试剂 | 第22页 |
·主要仪器与器械 | 第22-23页 |
·主要溶液配制 | 第23页 |
·无钙镁磷酸缓冲液 | 第23页 |
·胰蛋白酶消化液 | 第23页 |
·DMEM/F-12培养液 | 第23页 |
·试验方法 | 第23-25页 |
·兔骨髓间充质干细胞的分离培养 | 第23-24页 |
·细胞计数 | 第24页 |
·兔骨髓间充质干细胞的传代 | 第24页 |
·免疫细胞化学法鉴定兔骨髓间充质干细胞 | 第24-25页 |
·细胞爬片的制备 | 第24页 |
·兔骨髓间充质干细胞表面标志的鉴定 | 第24-25页 |
2 结果与分析 | 第25-28页 |
·原代培养 | 第25-26页 |
·传代培养 | 第26-27页 |
·兔骨髓间充质干细胞的免疫细胞化学鉴定 | 第27-28页 |
3 讨论 | 第28-29页 |
·兔骨髓间充质干细胞的分离培养 | 第28-29页 |
·兔骨髓间充质干细胞的鉴定 | 第29页 |
4 小结 | 第29-30页 |
试验二 DMSO体外诱导兔骨髓间充质干细胞分化为胰岛细胞的研究 | 第30-39页 |
引言 | 第30页 |
1 材料与方法 | 第30-33页 |
·试验材料 | 第30-31页 |
·试验对象 | 第30页 |
·主要试剂 | 第30-31页 |
·主要仪器与与器械 | 第31页 |
·主要试剂配制 | 第31-32页 |
·含1%DMSO的无血清DMEM/F-12 | 第31页 |
·含10%FBS的H-DMEM培养液 | 第31页 |
·双硫腙染色剂 | 第31页 |
·0.2%TritonX-100 | 第31-32页 |
·DAB显色液 | 第32页 |
·试验方法 | 第32-33页 |
·DMSO联合高糖诱导兔骨髓间充质干细胞定向分化 | 第32页 |
·双硫腙染色 | 第32页 |
·免疫细胞化学染色 | 第32-33页 |
·ELISA检测 | 第33页 |
2 结果与分析 | 第33-36页 |
·细胞形态学观察 | 第33-34页 |
·双硫腙染色结果 | 第34-35页 |
·免疫细胞化学检测结果 | 第35-36页 |
·ELISA检测结果 | 第36页 |
3 讨论 | 第36-37页 |
·BMSCs在DMSO诱导作用下的形态学变化 | 第36-37页 |
·BMSCs在DMSO诱导作用下细胞内胰岛素分泌情况 | 第37页 |
·BMSCs在DMSO诱导作用下分泌到培养基中的胰岛素情况 | 第37页 |
4 小结 | 第37-39页 |
试验三 细胞生长因子联合诱导兔骨髓间充质干细胞分化为胰岛细胞的研究 | 第39-47页 |
引言 | 第39-40页 |
1 材料与方法 | 第40-43页 |
·试验材料 | 第40-41页 |
·试验对象 | 第40页 |
·主要试剂 | 第40页 |
·主要仪器与器械 | 第40-41页 |
·主要试剂配置 | 第41-42页 |
·bFGF的配制 | 第41页 |
·EGF的配制 | 第41页 |
·HGF的配制 | 第41页 |
·β-cellulin的配制 | 第41页 |
·ActivinA的配制 | 第41页 |
·尼克酰胺的配制 | 第41页 |
·第一阶段诱导剂的配制 | 第41页 |
·第二阶段诱导剂的配置 | 第41-42页 |
·试验方法 | 第42-43页 |
·细胞生长因子联合诱导兔骨髓间充质干细胞向分化 | 第42页 |
·双硫腙染色 | 第42页 |
·免疫组织化学染色 | 第42-43页 |
2 结果与分析 | 第43-45页 |
·细胞生长因子诱导兔BMSCs分化的形态学变化 | 第43-44页 |
·双硫腙染色结果 | 第44页 |
·免疫细胞化学检测结果 | 第44-45页 |
3 讨论 | 第45-46页 |
·BMSCs在细胞生长因子诱导作用下的形态学变化 | 第45-46页 |
·BMSCs在细胞生长因子诱导作用下的DTZ染色情况 | 第46页 |
·BMSCs在细胞生长因子诱导作用下胰岛素分泌情况 | 第46页 |
4 小结 | 第46-47页 |
试验四 尼克酰胺诱导兔骨髓间充质干细胞分化为胰岛细胞的研究 | 第47-55页 |
引言 | 第47页 |
1 材料与方法 | 第47-49页 |
·试验材料 | 第47-48页 |
·主要试剂 | 第47页 |
·主要仪器与器械 | 第47-48页 |
·试验对象 | 第48页 |
·主要试剂配置 | 第48页 |
·含1%DMSO的无血清DMEM/F-12培养液 | 第48页 |
·含10mmol/L尼克酰胺及1%DMSO的无血清DMEM/F-12培养液 | 第48页 |
·含10%FBS的H-DMEM培养液 | 第48页 |
·含10mmol/L尼克酰胺的H-DMEM培养液 | 第48页 |
·含10mmol/L尼克酰胺及10%FBS的DMEM/F-12培养液 | 第48页 |
·胰蛋白酶消化液 | 第48页 |
·双硫腙染色剂 | 第48页 |
·试验方法 | 第48-49页 |
2 结果与分析 | 第49-53页 |
·兔骨髓间充质干细胞的形态学变化 | 第49-50页 |
·双硫腙染色结果 | 第50-52页 |
·ELISA检测结果 | 第52-53页 |
3 讨论 | 第53-54页 |
·BMSCs诱导后的形态学变化 | 第53页 |
·BMSCs诱导后细胞内的胰岛素分泌情况 | 第53页 |
·BMSCs诱导后分泌到培养基中的胰岛素情况 | 第53-54页 |
4 小结 | 第54-55页 |
结论 | 第55-56页 |
参考文献 | 第56-64页 |
中英文缩写词表 | 第64-65页 |
英文摘要 | 第65-67页 |
作者简介 | 第67页 |