| 摘要 | 第1-3页 |
| Abstract | 第3-6页 |
| 引言 | 第6-8页 |
| 第一章 实验材料 | 第8-11页 |
| ·主要材料 | 第8-9页 |
| ·主要仪器 | 第9页 |
| ·主要试剂 | 第9-11页 |
| 第二章 实验方法 | 第11-25页 |
| ·慢病毒eIF4E-shRNA构建 | 第11-20页 |
| ·eIF4E靶点序列设计 | 第11-14页 |
| ·合成的寡核苷酸模板退火 | 第14-15页 |
| ·慢病毒质粒扩增和回收 | 第15-16页 |
| ·慢病毒质粒pLVTHM经双酶切后回收 | 第16-18页 |
| ·连接反应 | 第18页 |
| ·感受态细胞制备和转化 | 第18-19页 |
| ·重组质粒的鉴定试验 | 第19-20页 |
| ·慢病毒eIF4E-shRNA生产、浓缩与滴定 | 第20-24页 |
| ·293T细胞培养 | 第20-21页 |
| ·Hela细胞株的常规培养 | 第21-22页 |
| ·慢病毒的包装制备 | 第22-24页 |
| ·慢病毒的滴度测定 | 第24页 |
| ·慢病毒颗粒颗粒感染Hela细胞 | 第24-25页 |
| 第三章 实验结果 | 第25-30页 |
| ·慢病毒eIF4E-shRNA构建 | 第25-28页 |
| ·慢病毒质粒pLVTHM的线性化 | 第25页 |
| ·重组质粒PCR鉴定 | 第25-26页 |
| ·重组质粒测序鉴定 | 第26-28页 |
| ·eIF4E-shRNA慢病毒包装及滴度测定 | 第28页 |
| ·eIF4E-shRNA慢病毒包装 | 第28页 |
| ·浓缩病毒的滴度测定 | 第28页 |
| ·慢病毒eIF4E-shRNA感染Hela细胞的初步观察 | 第28-30页 |
| 第四章 讨论 | 第30-33页 |
| 结论 | 第33-34页 |
| 参考文献 | 第34-37页 |
| 综述 | 第37-45页 |
| 综述的参考文献 | 第42-45页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第45-46页 |
| 致谢 | 第46-47页 |