| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 缩略词表 | 第11-12页 |
| 引言 | 第12-13页 |
| 第一部分 文献综述 | 第13-25页 |
| 第一章 细胞质雄性不育的研究进展 | 第13-19页 |
| 1 植物雄性不育的来源 | 第13-15页 |
| ·自然突变 | 第13页 |
| ·杂交转育 | 第13-14页 |
| ·基因转育 | 第14页 |
| ·理化诱变 | 第14页 |
| ·基因工程 | 第14页 |
| ·原生质体融合 | 第14-15页 |
| 2 细胞质雄性不育的类型 | 第15-16页 |
| ·萝卜胞质不育 | 第15页 |
| ·波里马胞质不育 | 第15页 |
| ·NapCMS | 第15页 |
| ·黑介胞质不育 | 第15页 |
| ·墙生二行芥胞质不育 | 第15-16页 |
| ·B.tournefortii Tour胞质不育 | 第16页 |
| ·芥菜型油菜细胞质雄性不育 | 第16页 |
| 3 细胞质雄性不育的机理 | 第16-19页 |
| ·线粒体与细胞质雄性不育 | 第16-17页 |
| ·叶绿体与细胞质雄性不育 | 第17页 |
| ·核基因组的影响 | 第17-19页 |
| 第二章 基因克隆方法研究进展 | 第19-25页 |
| 1 图位克隆技术(map-base cloning or positional cloning) | 第19-20页 |
| 2 转座子或T-DNA标签法(transposon or T-DNA tagging method) | 第20页 |
| 3 同源序列法(homology-based candidate gene method) | 第20-21页 |
| 4 功能克隆(functional cloning) | 第21-22页 |
| 5 差异表达基因的分离方法(differentially expressed gene cloning methods) | 第22-25页 |
| ·差异展示反转录PCR(DDRT-PCR) | 第22页 |
| ·cDNA代表性差异分析(RDA) | 第22-23页 |
| ·抑制性扣除杂交技术(SSH) | 第23-24页 |
| ·RACE技术 | 第24-25页 |
| 第二部分 研究报告 | 第25-61页 |
| 第三章 不结球白菜细胞质雄性不育相关基因TUBA2的克隆及表达 | 第25-47页 |
| 摘要 | 第25页 |
| Abstract | 第25-27页 |
| 1 材料与方法 | 第27-38页 |
| ·材料 | 第27-28页 |
| ·植物材料 | 第27页 |
| ·菌株与质粒 | 第27页 |
| ·各种酶类 | 第27页 |
| ·试剂盒 | 第27页 |
| ·常用储液 | 第27页 |
| ·Southern杂交所需溶液及物品 | 第27-28页 |
| ·方法 | 第28-38页 |
| ·植物材料的准备 | 第28页 |
| ·基因组DNA,总RNA的提取 | 第28-29页 |
| ·单链cDNA的合成 | 第29页 |
| ·引物的设计 | 第29-30页 |
| ·PCR扩增 | 第30-31页 |
| ·3'RACE | 第31页 |
| ·5'RACE | 第31-34页 |
| ·目的片段的回收及克隆 | 第34页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第34-35页 |
| ·序列测定及分析 | 第35页 |
| ·Southern杂交分析 | 第35-36页 |
| ·实时定量PCR分析 | 第36-38页 |
| 2 结果与分析 | 第38-45页 |
| ·不结球白菜总RNA的提取 | 第38页 |
| ·不结球白菜TUBA2基因RT-PCR扩增 | 第38-39页 |
| ·不结球白菜TUBA2基因cDNA中间片段RT-PCR的扩增 | 第38页 |
| ·3’RACE | 第38页 |
| ·5’RACE | 第38-39页 |
| ·不结球白菜TUBA2基因cDNA全长的拼接及序列分析 | 第39-42页 |
| ·不结球白菜TUBA2基因的同源性分析 | 第42页 |
| ·Southern杂交检测TUBA2基因的拷贝数 | 第42-43页 |
| ·TUBA2基因转录表达分析 | 第43-45页 |
| 3 讨论 | 第45-47页 |
| 第四章 不结球白菜细胞质雄性不育相关基因BcCOI1克隆和表达 | 第47-61页 |
| 摘要 | 第47页 |
| Abstract | 第47-48页 |
| 1 材料与方法 | 第48-53页 |
| ·材料 | 第48-49页 |
| ·植物材料 | 第48页 |
| ·菌株与质粒 | 第48-49页 |
| ·试剂盒 | 第49页 |
| ·酶和生化试剂 | 第49页 |
| ·常用储液 | 第49页 |
| ·方法 | 第49-53页 |
| ·植物材料的准备 | 第49页 |
| ·基因组DNA和总RNA的提取 | 第49页 |
| ·单链cDNA的合成 | 第49页 |
| ·引物的设计 | 第49-50页 |
| ·PCR扩增 | 第50页 |
| ·3’RACE | 第50-51页 |
| ·5’RACE | 第51页 |
| ·目的片段的回收及克隆 | 第51页 |
| ·序列测定及分析 | 第51页 |
| ·Southern杂交分析 | 第51-52页 |
| ·BcCOI1基因杂交探针的制备 | 第52页 |
| ·实时定量PCR分析 | 第52-53页 |
| 2 结果与分析 | 第53-59页 |
| ·不结球白菜总RNA的提取 | 第53-54页 |
| ·不结球白菜BcCOI1基因cDNA全长的克隆 | 第54-55页 |
| ·不结球白菜BcCOI1基因cDNA中间片段RT-PCR的扩增 | 第54页 |
| ·3'RACE | 第54页 |
| ·5'RACE | 第54-55页 |
| ·不结球白菜BcCOI1基因cDNA全长的拼接及序列分析 | 第55-56页 |
| ·不结球白菜Bc COI1基因的同源性分析 | 第56-58页 |
| ·Sothern杂交检测BcCOI1基因的拷贝数 | 第58-59页 |
| ·外施茉莉酸甲酯处理对不结球白菜BcCOI1基因表达的实时定量PCR分析 | 第59页 |
| 3 讨论 | 第59-61页 |
| 参考文献 | 第61-69页 |
| 全文总结 | 第69-71页 |
| 论文发表情况 | 第71-73页 |
| 致谢 | 第73页 |
