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牛双芽巴贝斯虫rap-1基因的克隆与真核表达

摘要第1-4页
Abstract第4-9页
第一章 文献综述第9-17页
   ·牛双芽巴贝斯虫病的研究进展第9-12页
     ·病原第10页
     ·流行病学第10页
     ·临床症状第10-11页
     ·病理变化第11页
     ·诊断第11页
     ·防治第11-12页
     ·展望第12页
   ·牛双芽巴贝斯虫RAP-1表面蛋白的研究进展第12-17页
     ·牛双芽巴贝斯虫棒状体细胞器概述第12-14页
     ·牛巴贝斯虫体入侵宿主细胞的机制第14-15页
     ·牛双芽巴贝斯虫rap-1蛋白概述第15页
     ·牛双芽巴贝斯虫rap-1蛋白的结构与功能第15-17页
     ·展望第17页
第二章 牛双芽巴贝斯虫RAP-1基因的克隆与序列分析第17-28页
   ·材料第18-19页
     ·菌株和质粒第18页
     ·主要试剂第18页
     ·培养基和溶液第18页
     ·血样第18页
     ·仪器与设备第18-19页
   ·方法第19-25页
     ·全血基因组DNA的提取(试剂盒)第19-20页
     ·引物的设计与合成第20页
     ·牛双芽巴贝斯虫rap-1基因的PCR扩增第20-21页
     ·PCR产物的回收与纯化(试剂盒)第21-22页
     ·牛双芽巴贝斯虫rap-1基因片段与T载体的连接19第22页
     ·连接产物的转化第22页
     ·挑斑及载体克隆第22-23页
     ·PCR扩增检验第23-24页
     ·重组质粒的提取(试剂盒)第24页
     ·酶切鉴定重组质粒pGEM-T--rap-121第24-25页
     ·阳性克隆产物序列测定及比较分析第25页
   ·结果与分析第25-27页
     ·目的基因的PCR扩增第25页
     ·重组质粒的酶切鉴定第25-26页
     ·rap-1序列的测定及分析比较第26-27页
       ·rap-1基因测序结果第26-27页
       ·结果分析第27页
   ·讨论第27-28页
第三章 牛双芽巴贝斯虫RAP-1基因的真核表达第28-44页
   ·材料第28-31页
     ·菌株和细胞第28页
     ·主要试剂第28页
     ·仪器第28-29页
     ·主要试剂的配制第29-31页
   ·方法第31-41页
     ·GFP-rap-1质粒构建第31-37页
     ·转染第37-39页
     ·westernblotting鉴定第39-41页
   ·结果与分析第41-43页
     ·GFP-rap-1质粒双酶切鉴定第41页
     ·转染第41-42页
     ·SDS-PAGE电泳第42-43页
     ·westernblotting鉴定第43页
   ·小结第43-44页
第四章 结论第44-45页
参考文献第45-52页
作者简介第52-53页
导师简介第53-54页
致谢第54页

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