摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-9页 |
第一章 文献综述 | 第9-17页 |
·牛双芽巴贝斯虫病的研究进展 | 第9-12页 |
·病原 | 第10页 |
·流行病学 | 第10页 |
·临床症状 | 第10-11页 |
·病理变化 | 第11页 |
·诊断 | 第11页 |
·防治 | 第11-12页 |
·展望 | 第12页 |
·牛双芽巴贝斯虫RAP-1表面蛋白的研究进展 | 第12-17页 |
·牛双芽巴贝斯虫棒状体细胞器概述 | 第12-14页 |
·牛巴贝斯虫体入侵宿主细胞的机制 | 第14-15页 |
·牛双芽巴贝斯虫rap-1蛋白概述 | 第15页 |
·牛双芽巴贝斯虫rap-1蛋白的结构与功能 | 第15-17页 |
·展望 | 第17页 |
第二章 牛双芽巴贝斯虫RAP-1基因的克隆与序列分析 | 第17-28页 |
·材料 | 第18-19页 |
·菌株和质粒 | 第18页 |
·主要试剂 | 第18页 |
·培养基和溶液 | 第18页 |
·血样 | 第18页 |
·仪器与设备 | 第18-19页 |
·方法 | 第19-25页 |
·全血基因组DNA的提取(试剂盒) | 第19-20页 |
·引物的设计与合成 | 第20页 |
·牛双芽巴贝斯虫rap-1基因的PCR扩增 | 第20-21页 |
·PCR产物的回收与纯化(试剂盒) | 第21-22页 |
·牛双芽巴贝斯虫rap-1基因片段与T载体的连接19 | 第22页 |
·连接产物的转化 | 第22页 |
·挑斑及载体克隆 | 第22-23页 |
·PCR扩增检验 | 第23-24页 |
·重组质粒的提取(试剂盒) | 第24页 |
·酶切鉴定重组质粒pGEM-T--rap-121 | 第24-25页 |
·阳性克隆产物序列测定及比较分析 | 第25页 |
·结果与分析 | 第25-27页 |
·目的基因的PCR扩增 | 第25页 |
·重组质粒的酶切鉴定 | 第25-26页 |
·rap-1序列的测定及分析比较 | 第26-27页 |
·rap-1基因测序结果 | 第26-27页 |
·结果分析 | 第27页 |
·讨论 | 第27-28页 |
第三章 牛双芽巴贝斯虫RAP-1基因的真核表达 | 第28-44页 |
·材料 | 第28-31页 |
·菌株和细胞 | 第28页 |
·主要试剂 | 第28页 |
·仪器 | 第28-29页 |
·主要试剂的配制 | 第29-31页 |
·方法 | 第31-41页 |
·GFP-rap-1质粒构建 | 第31-37页 |
·转染 | 第37-39页 |
·westernblotting鉴定 | 第39-41页 |
·结果与分析 | 第41-43页 |
·GFP-rap-1质粒双酶切鉴定 | 第41页 |
·转染 | 第41-42页 |
·SDS-PAGE电泳 | 第42-43页 |
·westernblotting鉴定 | 第43页 |
·小结 | 第43-44页 |
第四章 结论 | 第44-45页 |
参考文献 | 第45-52页 |
作者简介 | 第52-53页 |
导师简介 | 第53-54页 |
致谢 | 第54页 |