| 摘要 | 第1-10页 |
| ABSTRACT | 第10-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-23页 |
| ·植物免疫在抗病中的重要作用 | 第12-13页 |
| ·植物的先天免疫系统在抗病中的重要作用 | 第12页 |
| ·植物免疫系统中的系统获得性抗性和诱导系统抗性 | 第12-13页 |
| ·稻瘟病的研究意义 | 第13-14页 |
| ·水稻干旱胁迫的研究意义 | 第14页 |
| ·植物 bZIP 类基因研究概述 | 第14-21页 |
| ·植物 bZIP 类基因的结构特征 | 第15-17页 |
| ·植物 bZIP 类基因的分类 | 第17-19页 |
| ·双子叶植物 bZIP 类基因功能研究进展 | 第19-20页 |
| ·水稻 bZIP 类基因功能研究进展 | 第20-21页 |
| ·研究目的及内容 | 第21-23页 |
| 第二章 水稻 bZIP 基因在稻瘟病抗性反应中的表达分析 | 第23-36页 |
| ·引言 | 第23页 |
| ·实验材料 | 第23-26页 |
| ·水稻品种 | 第23页 |
| ·主要试剂 | 第23-24页 |
| ·PCR 引物 | 第24-25页 |
| ·主要仪器设备 | 第25-26页 |
| ·实验方法 | 第26-29页 |
| ·稻瘟病菌接种及采样 | 第26页 |
| ·水稻总 RNA 的提取 | 第26-27页 |
| ·cDNA 第一链的合成 | 第27-28页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第28页 |
| ·表达量分析 | 第28-29页 |
| ·实验结果 | 第29-34页 |
| ·实时荧光定量 PCR 条件探索 | 第29-31页 |
| ·引物质量的检测 | 第29-30页 |
| ·模板浓度的确定 | 第30页 |
| ·荧光阈值（Threshold）的选取 | 第30-31页 |
| ·扩增特异性的分析 | 第31页 |
| ·稻瘟病菌处理后 OsbZIPs 基因的诱导表达分析 | 第31-34页 |
| ·讨论 | 第34-36页 |
| 第三章 OsNIF1 和 OsNIF2 基因的干涉与超量表达载体构建 | 第36-46页 |
| ·引言 | 第36-37页 |
| ·实验材料 | 第37-39页 |
| ·水稻品种与载体菌株 | 第37-38页 |
| ·主要试剂 | 第38页 |
| ·PCR 引物 | 第38页 |
| ·主要仪器设备 | 第38-39页 |
| ·实验方法 | 第39-43页 |
| ·OsNIF1 和 OsNIF2 基因干涉载体的构建 | 第39-42页 |
| ·水稻基因组 DNA 提取 | 第39页 |
| ·OsNIF1 和 OsNIF2 基因序列的扩增 | 第39页 |
| ·PCR 产物回收 | 第39页 |
| ·目的片段的纯化 | 第39-40页 |
| ·入门载体构建 | 第40页 |
| ·干涉载体 pANDA 质粒 DNA 的制备 | 第40页 |
| ·LR 反应 | 第40-41页 |
| ·LR 反应产物转化大肠杆菌感受态细胞及阳性克隆鉴定 | 第41-42页 |
| ·OsNIF1 和 OsNIF2 基因超量表达载体的构建 | 第42-43页 |
| ·OsNIF1 和 OsNIF2 基因序列的扩增 | 第42页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第42页 |
| ·PCR 产物的回收 | 第42页 |
| ·目的片段的酶切及其纯化 | 第42-43页 |
| ·中间载体 pUC 质粒 DNA 的制备 | 第43页 |
| ·质粒 DNA 酶切、去磷酸化及其回收 | 第43页 |
| ·目的片段与载体质粒 DNA 的连接 | 第43页 |
| ·连接产物转化大肠杆菌感受态细胞及阳性克隆鉴定 | 第43页 |
| ·超量表达载体 pZH1 的构建 | 第43页 |
| ·实验结果 | 第43-44页 |
| ·OsNIF1 和 OsNIF2 基因干涉载体的构建 | 第43-44页 |
| ·OsNIF1 和 OsNIF2 基因超量表达载体的构建 | 第44页 |
| ·讨论 | 第44-46页 |
| 第四章 水稻遗传转化及功能分析 | 第46-60页 |
| ·引言 | 第46页 |
| ·实验材料 | 第46-48页 |
| ·水稻植物材料及稻瘟病菌株 | 第46页 |
| ·主要试剂 | 第46页 |
| ·主要实验设备 | 第46-47页 |
| ·PCR 引物 | 第47页 |
| ·主要培养基的成分及其制备方法 | 第47-48页 |
| ·实验方法 | 第48-53页 |
| ·根癌农杆菌 EHA105 热激感受态细胞的制备、转化与鉴定 | 第48-50页 |
| ·制备农杆菌 EHA105 热激感受态细胞 | 第48-49页 |
| ·重组载体质粒 DNA 热激转化农杆菌感受态细胞 | 第49页 |
| ·阳性克隆的鉴定 | 第49-50页 |
| ·农杆菌介导的遗传转化 | 第50-51页 |
| ·水稻愈伤组织的诱导及预培养 | 第50页 |
| ·农杆菌的活化及悬浮 | 第50页 |
| ·愈伤组织的农杆菌侵染及共培养 | 第50-51页 |
| ·抗性愈伤组织的筛选 | 第51页 |
| ·抗性愈伤组织的分化 | 第51页 |
| ·幼苗的生根和移栽 | 第51页 |
| ·T0代转基因水稻 DNA 水平的 PCR 鉴定 | 第51-52页 |
| ·转基因水稻中 OsNIF1 和 OsNIF2 基因的表达分析 | 第52页 |
| ·转基因苗 T1代稻瘟病接种鉴定 | 第52页 |
| ·T1代转基因植株对干旱胁迫的应答 | 第52-53页 |
| ·实验结果 | 第53-59页 |
| ·水稻遗传转化与转基因植株的获得 | 第53页 |
| ·T0代转基因水稻 DNA 水平的 PCR 鉴定 | 第53-54页 |
| ·T0代转基因植株基因表达分析 | 第54-56页 |
| ·转基因水稻稻瘟病抗性鉴定 | 第56-57页 |
| ·T1代转基因植株对干旱胁迫的应答 | 第57-59页 |
| ·讨论 | 第59-60页 |
| 第五章 OsNIF1 和 OsNIF2 基因亚细胞定位载体构建 | 第60-66页 |
| ·引言 | 第60页 |
| ·实验材料 | 第60-61页 |
| ·主要试剂 | 第60页 |
| ·主要仪器设备 | 第60页 |
| ·引物 | 第60-61页 |
| ·实验方法 | 第61-63页 |
| ·生物信息学分析 | 第61页 |
| ·OsNIF1GFP 和 OsNIF2GFP 亚细胞定位载体的构建 | 第61-63页 |
| ·OsNIF1 和 OsNIF2 基因序列的获得 | 第61-62页 |
| ·PCR 产物回收 | 第62页 |
| ·目的片段的酶切及其纯化 | 第62页 |
| ·亚细胞定位载体 pM999 质粒 DNA 的制备 | 第62页 |
| ·载体质粒酶切及其回收 | 第62页 |
| ·目的片段与载体质粒 DNA 的连接 | 第62页 |
| ·连接产物转化大肠杆菌感受态细胞及阳性克隆鉴定 | 第62-63页 |
| ·实验结果 | 第63-64页 |
| ·生物信息学分析 | 第63页 |
| ·OsNIF1 和 OsNIF2 基因亚细胞定位载体的构建 | 第63-64页 |
| ·讨论 | 第64-66页 |
| 参考文献 | 第66-74页 |
| 致谢 | 第74-75页 |
| 在读期间发表的论文 | 第75页 |
| 参与的科研课题及学术活动 | 第75页 |
