英文略语表 | 第1-9页 |
中文摘要 | 第9-11页 |
Abstract | 第11-13页 |
第一部分 金属氧化物纳米材料毒性的研究 | 第13-37页 |
前言 | 第13-15页 |
第一节 氧化铜纳米材料引起A549细胞发生自噬性死亡 | 第15-27页 |
1. 实验材料 | 第15-17页 |
·细胞 | 第15页 |
·纳米材料 | 第15页 |
·细胞培养用耗材 | 第15页 |
·实验试剂 | 第15-16页 |
·抗体 | 第15页 |
·试剂盒 | 第15-16页 |
·实验药物及化学试剂 | 第16页 |
·实验设备 | 第16页 |
·主要溶液配方 | 第16-17页 |
·蛋白质电泳及检测缓冲液 | 第16-17页 |
·聚丙烯酰胺凝胶电泳溶液的配制 | 第17页 |
·常用缓冲液的配制 | 第17页 |
2. 实验方法 | 第17-20页 |
·贴壁细胞培养 | 第17页 |
·纳米材料的处理 | 第17-18页 |
·MTS方法测定细胞活性 | 第18页 |
·Western Blotting检测 | 第18-19页 |
·TUNEL检测细胞凋亡 | 第19-20页 |
3. 实验结果 | 第20-24页 |
·金属氧化物纳米材料对A549细胞活性影响的MTS实验 | 第20-21页 |
·金属氧化物纳米材料对H 1650和CNE-2Z细胞活性影响的MTS实验 | 第21-22页 |
·纳米氧化铜处理A549细胞的TUNEL结果 | 第22-23页 |
·纳米氧化铜处理A549细胞末引起Caspase 3的剪切 | 第23页 |
·纳米氧化铜引起A549细胞LC3-Ⅱ上调 | 第23-24页 |
·自噬抑制剂能改善纳米氧化铜引起的细胞死亡 | 第24页 |
4. 讨论 | 第24-27页 |
第二节 金属氧化物纳米材料诱导小鼠肺损伤的研究 | 第27-35页 |
1. 实验材料 | 第27页 |
·实验动物 | 第27页 |
·纳米材料 | 第27页 |
·实验试剂 | 第27页 |
·实验设备 | 第27页 |
2. 实验方法 | 第27-29页 |
·纳米材料的处理 | 第27-28页 |
·小鼠肺干湿比的检测 | 第28页 |
·小鼠支气管肺泡灌洗 | 第28页 |
·ELISA测定细胞因子 | 第28-29页 |
·小鼠死亡率测定 | 第29页 |
3. 实验结果 | 第29-33页 |
·纳米氧化铜对C57BL/6存活情况的影响 | 第29-30页 |
·纳米氧化铜引起小鼠肺水肿 | 第30-31页 |
·纳米氧化铜引起小鼠BALF IL-6水平升高 | 第31-32页 |
·小鼠BALF中其他炎症相关因子的测定 | 第32-33页 |
4. 讨论 | 第33-35页 |
参考文献 | 第35-37页 |
第二部分 自噬性死亡抑制剂的筛选 | 第37-46页 |
前言 | 第37-39页 |
1. 实验材料 | 第39-40页 |
·细胞 | 第39页 |
·纳米材料 | 第39页 |
·实验试剂 | 第39页 |
·实验药物与试剂 | 第39页 |
·试剂盒 | 第39页 |
·细胞培养用耗材 | 第39页 |
·实验设备 | 第39-40页 |
2. 实验方法 | 第40页 |
·PAMAM纳米材料的处理 | 第40页 |
·MTS方法测定细胞活性 | 第40页 |
3. 实验结果 | 第40-44页 |
化合物1、2、6、9、10和3-M A抑制PAMAM G3导致的自噬死亡的MTS结果 | 第40-44页 |
4. 讨论 | 第44页 |
参考文献 | 第44-46页 |
第三部分 禽流感蛋白在哺乳细胞中的表达 | 第46-64页 |
前言 | 第46-48页 |
1. 实验材料 | 第48-51页 |
·质粒 | 第48页 |
·菌株 | 第48-49页 |
·细胞株 | 第49页 |
·工具酶、酶切缓冲液及DNA marker | 第49页 |
·主要化学试剂 | 第49页 |
·细胞培养耗材 | 第49页 |
·试剂盒 | 第49页 |
·主要仪器及设备 | 第49-50页 |
·主要溶液配方 | 第50-51页 |
·E.coli用培养基的配制 | 第50页 |
·抗生素的配制 | 第50页 |
·大量提取质粒DNA的相关溶液 | 第50页 |
·DNA琼脂糖凝胶电泳缓冲液及凝胶的配制 | 第50-51页 |
·常用缓冲液的配制 | 第51页 |
·主要抗体 | 第51页 |
2. 实验方法 | 第51-55页 |
·序列获取和序列优化 | 第51页 |
·酶切消化 | 第51-52页 |
·连接 | 第52页 |
·转化 | 第52-53页 |
·鉴定 | 第53页 |
·质粒DNA的大量提取 | 第53-55页 |
·细胞转染 | 第55页 |
3. 实验结果 | 第55-63页 |
·禽流感蛋白基因序列 | 第55-60页 |
·表达质粒的构建 | 第60-61页 |
·瞬时转染293T细胞,检测禽流感蛋白表达 | 第61-63页 |
4. 小结 | 第63页 |
参考文献 | 第63-64页 |
综述:金属氧化物纳米材料的毒性研究进展 | 第64-78页 |
参考文献 | 第72-78页 |
致谢 | 第78-79页 |
个人简历 | 第79-80页 |