摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-9页 |
第一章 前言 | 第9-17页 |
·遗传性LQTS概述 | 第9-10页 |
·hERG钾通道 | 第10-11页 |
·hERG基因 | 第10页 |
·hERG通道的结构及功能 | 第10-11页 |
·hERG基因突变 | 第11页 |
·hERG基因突变导致通道功能障碍的机制 | 第11-14页 |
·hERG转运缺陷 | 第12-13页 |
·显性效应 | 第13页 |
·单倍体不足 | 第13-14页 |
·通道动力学改变 | 第14页 |
·本实验的研究基础 | 第14-15页 |
·本章参考文献 | 第15-17页 |
第二章 材料与方法 | 第17-41页 |
·实验材料 | 第17-20页 |
·实验仪器 | 第17页 |
·主要试剂 | 第17-18页 |
·溶液配制 | 第18-19页 |
·质粒 | 第19-20页 |
·实验方法 | 第20-24页 |
·氯化钙法制备大肠杆菌DH5α.感受态细胞 | 第20-21页 |
·质粒纯化 | 第21-22页 |
·脂质体法转染 | 第22页 |
·HEK293细胞的复苏 | 第22页 |
·HEK293细胞的传代 | 第22-23页 |
·HEK293细胞的冻存 | 第23页 |
·Western-blot法鉴定 | 第23-24页 |
·Flag-hERG及Myc-hERG-Q738X标签表达载体的构建 | 第24-27页 |
·确定上游酶切位点 | 第24-25页 |
·PCR扩增 | 第25-26页 |
·酶切连接 | 第26-27页 |
·菌落PCR检测 | 第27页 |
·质粒提取 | 第27页 |
·免疫共沉淀分析 | 第27-29页 |
·质粒共转染和蛋白提取 | 第27-28页 |
·免疫共沉淀分析Flag-WT-hERG和Myc-Q738X -hERG共转染组 | 第28页 |
·免疫共沉淀分析WT-hERG和Flag-WT-hERG共转染组 | 第28-29页 |
·免疫共沉淀分析Q738X-hERG和Myc-Q738X -hERG共转染组 | 第29页 |
·实验结果 | 第29-36页 |
·Western blot检测蛋白表达 | 第29-30页 |
·构建Flag-WT -hERG和Myc-Q738X-hERG的载体 | 第30-32页 |
·Flag-WT-hERG质粒测序鉴定 | 第32页 |
·Myc-Q738X-hERG质粒测序鉴定 | 第32-33页 |
·免疫共沉淀的结果 | 第33-36页 |
·讨论 | 第36-38页 |
·本章参考文献 | 第38-41页 |
结论 | 第41-42页 |
个人简历 | 第42页 |
硕士期间发表的论文 | 第42页 |
参加会议情况 | 第42-43页 |
致谢 | 第43页 |