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hERG基因Q738X突变体的功能检测

摘要第1-5页
Abstract第5-9页
第一章 前言第9-17页
   ·遗传性LQTS概述第9-10页
   ·hERG钾通道第10-11页
     ·hERG基因第10页
     ·hERG通道的结构及功能第10-11页
   ·hERG基因突变第11页
   ·hERG基因突变导致通道功能障碍的机制第11-14页
     ·hERG转运缺陷第12-13页
     ·显性效应第13页
     ·单倍体不足第13-14页
     ·通道动力学改变第14页
   ·本实验的研究基础第14-15页
   ·本章参考文献第15-17页
第二章 材料与方法第17-41页
   ·实验材料第17-20页
     ·实验仪器第17页
     ·主要试剂第17-18页
     ·溶液配制第18-19页
     ·质粒第19-20页
   ·实验方法第20-24页
     ·氯化钙法制备大肠杆菌DH5α.感受态细胞第20-21页
     ·质粒纯化第21-22页
     ·脂质体法转染第22页
     ·HEK293细胞的复苏第22页
     ·HEK293细胞的传代第22-23页
     ·HEK293细胞的冻存第23页
     ·Western-blot法鉴定第23-24页
   ·Flag-hERG及Myc-hERG-Q738X标签表达载体的构建第24-27页
     ·确定上游酶切位点第24-25页
     ·PCR扩增第25-26页
     ·酶切连接第26-27页
     ·菌落PCR检测第27页
     ·质粒提取第27页
   ·免疫共沉淀分析第27-29页
     ·质粒共转染和蛋白提取第27-28页
     ·免疫共沉淀分析Flag-WT-hERG和Myc-Q738X -hERG共转染组第28页
     ·免疫共沉淀分析WT-hERG和Flag-WT-hERG共转染组第28-29页
     ·免疫共沉淀分析Q738X-hERG和Myc-Q738X -hERG共转染组第29页
   ·实验结果第29-36页
     ·Western blot检测蛋白表达第29-30页
     ·构建Flag-WT -hERG和Myc-Q738X-hERG的载体第30-32页
     ·Flag-WT-hERG质粒测序鉴定第32页
     ·Myc-Q738X-hERG质粒测序鉴定第32-33页
     ·免疫共沉淀的结果第33-36页
   ·讨论第36-38页
   ·本章参考文献第38-41页
结论第41-42页
个人简历第42页
硕士期间发表的论文第42页
参加会议情况第42-43页
致谢第43页

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