致谢 | 第1-9页 |
英文缩写词 | 第9-10页 |
中文摘要 | 第10-12页 |
英文摘要 | 第12-14页 |
第一章 前言 | 第14-31页 |
·猪源Cathelicidins抗菌肽家族的研究进展 | 第14-22页 |
·猪源Cathelicidins抗菌肽家族基因结构和生物合成 | 第14-16页 |
·猪源Cathelicidins抗菌肽家族的结构特征 | 第16-19页 |
·猪源Cathelicidins抗菌肽家族的抗菌作用及抗菌机理 | 第19-21页 |
·抗菌肽的研究应用前景 | 第21-22页 |
·乳铁蛋白的研究进展 | 第22-27页 |
·乳铁蛋白的分子结构 | 第22-23页 |
·乳铁蛋白的生物学功能和作用机理 | 第23-26页 |
·乳铁蛋白的应用前景 | 第26-27页 |
·乳铁蛋白与猪骨髓抗菌肽基因的表达 | 第27-30页 |
·猪源Cathelicidins抗菌肽家族基因的表达与调控 | 第27-29页 |
·乳铁蛋白与抗菌肽基因的表达 | 第29-30页 |
·本研究的目的和意义 | 第30-31页 |
第二章 仔猪骨髓抗菌肽基因的克隆 | 第31-46页 |
·克隆策略 | 第31-32页 |
·试验材料 | 第32-34页 |
·动物材料 | 第32页 |
·菌种与载体 | 第32页 |
·试剂与工具酶 | 第32页 |
·引物 | 第32-33页 |
·培养基及主要化学试剂的配制 | 第33-34页 |
·试验方法 | 第34-41页 |
·基因组总RNA的提取 | 第34-35页 |
·反转录 | 第35页 |
·聚合酶链式反应(PCR)反应 | 第35-36页 |
·PCR产物电泳及割胶回收 | 第36-37页 |
·PCR回收产物与pGEM-T easy Vector连接 | 第37页 |
·感受态细胞的制备与目的DNA的转化 | 第37-38页 |
·重组克隆筛选和重组质粒的提取与鉴定 | 第38-40页 |
·重组DNA核苷酸序列测定分析 | 第40-41页 |
·试验结果 | 第41-45页 |
·抗菌肽RT-PCR产物电泳结果 | 第41-42页 |
·质粒DNA PCR检验结果 | 第42-43页 |
·抗菌肽测序结果 | 第43-45页 |
·讨论 | 第45-46页 |
第三章 不同生长阶段猪骨髓抗菌肽基因表达的差异 | 第46-59页 |
·试验材料 | 第46页 |
·动物材料 | 第46页 |
·试剂 | 第46页 |
·试验方法 | 第46-50页 |
·半定量RT-PCR法 | 第46-49页 |
·RNA的提取 | 第46页 |
·反转录 | 第46页 |
·聚合酶链式反应(PCR) | 第46-49页 |
·琼脂糖凝胶电泳 | 第49页 |
·半定量RT-PCR分析 | 第49页 |
·实时荧光定量PCR分析 | 第49-50页 |
·试验结果 | 第50-56页 |
·循环数对抗菌肽基因表达的影响 | 第50-52页 |
·Mg~(2+)浓度对抗菌肽基因表达的影响 | 第52-53页 |
·不同生长阶段抗菌肽基因表达的差异 | 第53-56页 |
·讨论 | 第56-59页 |
·RT-PCR方法的构建 | 第56-57页 |
·不同生长阶段猪抗菌肽基因表达的差异 | 第57-59页 |
第四章 乳铁蛋白对猪骨髓抗菌肽基因表达的影响 | 第59-73页 |
·体内试验 | 第59-64页 |
·试验材料 | 第59-60页 |
·试验方法 | 第60-61页 |
·试验结果 | 第61-64页 |
·半定量RT-PCR试验结果 | 第61-62页 |
·实时荧光定量PCR试验结果 | 第62-64页 |
·体外试验 | 第64-70页 |
·试验材料 | 第64页 |
·试验方法 | 第64-65页 |
·细胞分离和培养 | 第64页 |
·不同浓度的乳铁蛋白处理 | 第64页 |
·细胞总RNA的提取 | 第64-65页 |
·检测乳铁蛋白对猪抗菌肽基因表达的影响 | 第65页 |
·试验结果 | 第65-70页 |
·不同浓度的IL-6对抗菌肽PR-39基因表达的影响 | 第65-66页 |
·不同浓度的乳铁蛋白对抗菌肽PMAP基因表达的影响 | 第66-67页 |
·不同浓度的乳铁蛋白对抗菌肽Prophenin基因表达的影响 | 第67-68页 |
·不同浓度的乳铁蛋白对抗菌肽PR-39基因表达的影响 | 第68-69页 |
·不同浓度的乳铁蛋白对抗菌肽Protegrin-1基因表达的影响 | 第69-70页 |
·讨论 | 第70-73页 |
小结 | 第73-74页 |
创新点 | 第74-75页 |
参考文献 | 第75-87页 |
附录 pGEM-T easy Vector | 第87页 |