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PMAP、Prophenin等猪抗菌肽基因表达的差异及乳铁蛋白对其表达的影响

致谢第1-9页
英文缩写词第9-10页
中文摘要第10-12页
英文摘要第12-14页
第一章 前言第14-31页
   ·猪源Cathelicidins抗菌肽家族的研究进展第14-22页
     ·猪源Cathelicidins抗菌肽家族基因结构和生物合成第14-16页
     ·猪源Cathelicidins抗菌肽家族的结构特征第16-19页
     ·猪源Cathelicidins抗菌肽家族的抗菌作用及抗菌机理第19-21页
     ·抗菌肽的研究应用前景第21-22页
   ·乳铁蛋白的研究进展第22-27页
     ·乳铁蛋白的分子结构第22-23页
     ·乳铁蛋白的生物学功能和作用机理第23-26页
     ·乳铁蛋白的应用前景第26-27页
   ·乳铁蛋白与猪骨髓抗菌肽基因的表达第27-30页
     ·猪源Cathelicidins抗菌肽家族基因的表达与调控第27-29页
     ·乳铁蛋白与抗菌肽基因的表达第29-30页
   ·本研究的目的和意义第30-31页
第二章 仔猪骨髓抗菌肽基因的克隆第31-46页
   ·克隆策略第31-32页
   ·试验材料第32-34页
     ·动物材料第32页
     ·菌种与载体第32页
     ·试剂与工具酶第32页
     ·引物第32-33页
     ·培养基及主要化学试剂的配制第33-34页
   ·试验方法第34-41页
     ·基因组总RNA的提取第34-35页
     ·反转录第35页
     ·聚合酶链式反应(PCR)反应第35-36页
     ·PCR产物电泳及割胶回收第36-37页
     ·PCR回收产物与pGEM-T easy Vector连接第37页
     ·感受态细胞的制备与目的DNA的转化第37-38页
     ·重组克隆筛选和重组质粒的提取与鉴定第38-40页
     ·重组DNA核苷酸序列测定分析第40-41页
   ·试验结果第41-45页
     ·抗菌肽RT-PCR产物电泳结果第41-42页
     ·质粒DNA PCR检验结果第42-43页
     ·抗菌肽测序结果第43-45页
   ·讨论第45-46页
第三章 不同生长阶段猪骨髓抗菌肽基因表达的差异第46-59页
   ·试验材料第46页
     ·动物材料第46页
     ·试剂第46页
   ·试验方法第46-50页
     ·半定量RT-PCR法第46-49页
       ·RNA的提取第46页
       ·反转录第46页
       ·聚合酶链式反应(PCR)第46-49页
       ·琼脂糖凝胶电泳第49页
       ·半定量RT-PCR分析第49页
     ·实时荧光定量PCR分析第49-50页
   ·试验结果第50-56页
     ·循环数对抗菌肽基因表达的影响第50-52页
     ·Mg~(2+)浓度对抗菌肽基因表达的影响第52-53页
     ·不同生长阶段抗菌肽基因表达的差异第53-56页
   ·讨论第56-59页
     ·RT-PCR方法的构建第56-57页
     ·不同生长阶段猪抗菌肽基因表达的差异第57-59页
第四章 乳铁蛋白对猪骨髓抗菌肽基因表达的影响第59-73页
   ·体内试验第59-64页
     ·试验材料第59-60页
     ·试验方法第60-61页
     ·试验结果第61-64页
       ·半定量RT-PCR试验结果第61-62页
       ·实时荧光定量PCR试验结果第62-64页
   ·体外试验第64-70页
     ·试验材料第64页
     ·试验方法第64-65页
       ·细胞分离和培养第64页
       ·不同浓度的乳铁蛋白处理第64页
       ·细胞总RNA的提取第64-65页
       ·检测乳铁蛋白对猪抗菌肽基因表达的影响第65页
     ·试验结果第65-70页
       ·不同浓度的IL-6对抗菌肽PR-39基因表达的影响第65-66页
       ·不同浓度的乳铁蛋白对抗菌肽PMAP基因表达的影响第66-67页
       ·不同浓度的乳铁蛋白对抗菌肽Prophenin基因表达的影响第67-68页
       ·不同浓度的乳铁蛋白对抗菌肽PR-39基因表达的影响第68-69页
       ·不同浓度的乳铁蛋白对抗菌肽Protegrin-1基因表达的影响第69-70页
   ·讨论第70-73页
小结第73-74页
创新点第74-75页
参考文献第75-87页
附录 pGEM-T easy Vector第87页

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